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[期刊] 海洋水产研究
[作者]
房海 陈翠珍 张晓君 靳晓敏 王秀云 葛慕湘
以分离于病(死)牙鲆(Paralichthys olivaceus L.)的格氏乳球菌(Lactococcus garvieae)的代表菌株(T030817-1株),分别制备全菌(OK)及热处理(121℃作用1h)菌体(O)免疫原,强化免疫接种家兔制备相应抗血清,对10株格氏乳球菌分离株进行了血清同源性检验。结果表明,供试10株菌均存在同种的表面K抗原和同种的菌体O抗原(血清同源),其中O抗原具有强免疫原性、K抗原免疫原性及O凝集抑制阻断作用弱;以相应OK抗血清为第1抗体、标准的羊抗兔IgG荧光抗体为第2抗体,对10株格氏乳球菌的纯培养物及用代表菌株(T030817-1)人工感染病死牙鲆的肝组...
关键词：
牙鲆 格氏乳球菌 血清同源性 血清学检验
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
吴异健 梁英 王劭 李文迹 李江森 吴宝成
采用血清学交叉中和试验方法,分析了4株禽呼肠孤病毒株CL(鸡源禽呼肠孤病毒)、YH和YB(鸭源禽呼肠孤病毒)及S1133(禽呼肠孤病毒标准株)之间抗原的相互关系;并对CL株的S3基因进行克隆测序,用DNAsis和Prosis等分析软件进行序列比较及推导氨基酸序列分析.结果表明:4株禽呼肠孤病毒株之间具有共同的群特异抗原,但不同病毒株间存在中和抗原位点的不对称性;血清学相关性与S3基因序列及其推导的σB蛋白氨基酸序列同源性不一致,表明禽呼肠孤病毒诱导机体产生特异性中和抗体的病毒蛋白不止σB蛋白一个,σB氨基酸序列同源性与血清学相关性没有必然的直接联系.
关键词：
禽呼肠孤病毒 交叉中和试验 S3基因
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
胡青海 李刚 郑明球 蔡宝祥
采用苯酚－氯仿混合法，提取了鸭疫里氏杆菌（Ｒｉｅｍｅｒｅｌａａｎａｔｉｐｅｓｔｉｆｅｒ）血清１型Ｊｂ２株、Ｊｂ３株、未定型菌Ｔｂ１株以及鸭大肠杆菌Ｅ４株和大肠杆菌Ｋ１２株的基因组ＤＮＡ。用热变性法测得Ｊｂ２、Ｊｂ３、Ｔｂ１和Ｋ１２株的解链温度（Ｔｍ）分别为６８．５，６８．５，６９．０和７３．５℃（缓冲液为０．１×ＳＳＣ）。由计算可知Ｊｂ２、Ｊｂ３和Ｔｂ１株的Ｇ＋Ｃ含量分别为３５．６２％，３５．６２％和３６．６７％。应用ＤＮＡ－ＤＮＡ杂交技术（初始复性速率法）比较了１型鸭疫里氏杆菌Ｊｂ２与Ｊｂ３株之间以及Ｊｂ２与Ｔｂ１株、Ｅ４株之间的同源性。结果表明，Ｊｂ２与Ｊｂ３之间的ＤＮＡ同源值为６８．６３...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
马士和 王利兵 李启新 李祥
以棉枯萎镰刀菌菌丝体加孢子提取的蛋白质为抗原免疫家兔制备的２种抗血清Ａｓ２、Ａｓ１０中成分复杂，用琼脂双扩散法和比较对流免疫电泳法测定特异性，交叉反应明显。Ａｓ２用木贼镰刀菌的异种抗原、Ａｓ１０用禾谷镰刀菌的异种抗原吸收排除非特异性成分后，抗血清的专化性提高，消除了交叉反应。特异性测定结果表明：利用此种经吸收后的抗血清检测棉枯萎镰刀菌可以准确地鉴定到尖孢镰刀菌种的水平，但不能区分专化型。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张小芳 张海燕 王永吉 魏兰芳 姬广海
【目的】魔芋软腐病是魔芋生产中的一个重要细菌性病害,严重威胁着魔芋产量。【方法】本实验拟利用血清学技术建立快速检测魔芋细菌性软腐病菌的方法。【结果】采用棋盘滴定法确定抗原和抗血清的最适工作浓度分别为106CFU/m L和1∶10000;病原菌检测灵敏度为103CFU/m L;抗血清与其它细菌标准菌株的交叉反应结果均呈阴性,结果表明该方法具有较高的特异性。将该方法检测了24份魔芋种球、病土和带病植株,检出率高达91.67%。【结论】该技术可以有效的检测魔芋软腐病原菌胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacter
关键词：
魔芋软腐病 细菌性病害 血清学检测
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李启新 杜琦 陈长法 李祥
以棉枯萎镰刀菌公安菌株为材料,用物理法和化学法提取抗原并制备抗血清,并选有代表性的抗血清对其特异性和灵敏度分别采用4种检测方法进行了检测比较研究。结果表明:(1)采用 Richard’s培养基振荡培养菌株,化学法提取菌丝孢子抗原,按改进的 J.E.Devay 设计的免疫方案免疫,能产生效价高达1:64的抗血清。(2)琼扩、比较对流免疫电泳、间接 ELISA,SPA-ELISA 等4种方法检测其特异性具有鉴别到尖孢镰刀菌种的水平的特异性,但不能鉴别专化型和生理小种。并用上述方法检测抗血清灵敏度。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
周晶辉 胡超 刘晓柱 彭珍子 张学文
从湘西富含豆粕下脚料土壤中筛选鉴定出1株产α-半乳糖苷酶细菌,对其进行显微形态观察、分子生物学鉴定及酶学特性分析。结果表明,该细菌为球形细菌,革兰氏染色阳性,16S rDNA序列与乳球菌有98%的同源性,可以确定为乳球菌属。细菌产分泌性α-半乳糖苷酶,其胞外α-半乳糖苷酶摇瓶发酵液初酶活为6.21 U/mL,在45℃、pH 5.5时该酶活性表现为最大值。酶的表达受D-棉籽糖的诱导和葡萄糖的抑制,当D-棉籽糖的浓度为30μmol/mL时诱导效果最佳,当葡萄糖浓度为30μmol/mL时对该酶的合成有较明显的抑制作用,表现为糖代谢操纵元的典型调控方式。
[期刊] 华北农学报
[作者]
王彩霞
利用3种不同来源的柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)抗体(PAb-L5、PAb-I、MAbs-S4)对武汉地区发生的CTV进行检测,筛选到一个表现特异血清学性状的分离物CTV-HB1,该分离物仅同来源于中国的多克隆抗体PAb-L5发生血清学反应。为揭示该血清学差异的分子机制,对CTV-HB1和其他几个分离物CP基因序列进行了分析,结果显示:CTV-HB1CP基因与其他19个分离物的核苷酸序列相似性在90.4%~99.4%,但CTV-HB1和CTV-L5的CP基因氨基酸序列间仅存在3个位点的变异,暗示:此3个氨基酸位点可能与CTV-HB1的血清学特性有关。
关键词：
柑橘衰退病毒 CP基因 抗体 序列分析
[期刊] 中国水产科学
[作者]
房海 陈翠珍 张晓君
对一次养殖牙鲆(Paralichthys olivaceusL.Temminck et Schlegel)发生的病害进行了临床特征和病理变化等方面的检验。以5尾病(死)牙鲆做病变组织中的细菌检查及细菌分离,对分离做纯培养的10株菌(T030817-1至T030817-10)进行形态特征、理化特性等较系统的表观分类学指征鉴定;同时择代表菌株(T030817-1)进行16S rRNA基因分子鉴定,测定16S rRNA基因序列、分析相关细菌相应序列的同源性、构建了系统发生树。结果表明,10株分离菌均为乳球菌属(LactococcusSchleifer et al 1986)的格氏乳球菌(L.garv...
关键词：
牙鲆 格氏乳球菌 感染症
[期刊] 水产学报
[作者]
蒋国民 李金龙 刘丽 何志刚 邹利 王余德 吴启藩 王冬武 邓时铭
克氏原螯虾是当今中国人工养殖最广的淡水螯虾品种。近几年来，稻田养虾面积呈爆发式增长，但随着养殖规模的扩大，养殖环境的恶化，各种病害频发。为查清稻田养殖克氏原螯虾死亡的原因，取濒死病虾胃和肠组织进行病原菌分离，用生理生化试验、16S rDNA基因序列测定与系统进化分析鉴定优势菌；用回归感染和药敏试验评价优势菌毒力和药物敏感性，通过血清免疫相关酶活性变化探究优势菌的致病机理。结果显示：分离获得1株优势菌PCW-01，回归感染健康克氏原螯虾，出现与自然发病相同的病理症状，活力下降，胃部有积液，半致死量达0.60×10~(5 )CFU/g，经理化分析和分子鉴定为维氏气单胞菌，对呋喃妥因、妥布霉素、头孢他啶等7种药物敏感；人工感染后的克氏原螯虾，血清谷丙转氨酶(ALT)和溶菌酶（LZM）活性极显著地上升（P＜0.01），总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性极显著下降（P＜0.01），丙二醛（MDA）浓度略有上升。从结果可看出，优势菌PCW-01为致病菌，可失活抗氧化因子，破坏细胞膜结构，导致疾病发生。本研究结果揭示出了克氏原螯虾细菌性疾病的免疫应答规律，为其细菌性疾病的防控提供了科学依据。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
车勇良 俞伏松 陈少莺 陈仕龙 程晓霞 王隆柏 魏宏 胡奇林
用PCR方法扩增了PRVFB弱毒株和PRVFA野毒株的gE,gI基因,对FB弱毒株的gE,gI基因进行克隆和测序,并将其与GenBank中收录的PRVFA的gE,gI基因进行了比较。结果发现,PRVFB和PRVFA株的gE基因有2处碱基发生了点突变,同源性为99%;gI基因有7处碱基发生了突变,其中1处发生了3个碱基的插入突变,同源性为98%。表明PRVFB在传代过程中发生了遗传性变异。
关键词：
伪狂犬病病毒 基因克隆 序列分析
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
韩谦
弓形虫病 Toxoplasmosis 是一种人兽互通的寄生虫场,其病原体为龚地弓形虫 Toxoplasma gondii.自1908年法国人 Nicolle 首次在北非的一种啮齿动物中分离出弓形虫以来,现已在200多种哺乳动物和鸟类中发现弓形虫.美国人 Ferrell 在1952年首次报告了猪弓形虫病.1957年,我国的于恩庶在猪体内首次分离到了弓形虫.进入70年代,我国部分地区猪群出现"无名高热"病,后证实病原为弓形虫,弓形虫病的重要性开始得到认识.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨增岐 杨泽晓 姜艳芬 祝卫国 王旭荣 史怀平
2004-01~2005-06,从陕西榆林、宝鸡、西安、渭南、汉中、商洛、安康等7个地区的猪场采集不同日龄猪血清样品237份,用间接EL ISA方法进行猪圆环病毒2型(PCV 2)感染的血清抗体检测,并用阻断EL ISA方法对部分血清样品进行了猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因蛋白的抗体检测。结果表明,未断奶仔猪PCV 2血清抗体阳性率为0%(0/40),断奶仔猪为28.6%(2/7),肥育猪为43.7%(31/71),种公猪为7.7%(1/13),后备母猪为15.6%(7/45),经产母猪为60.4%(29/48),临床上有多系统衰竭综合征(PMW S)疑似症状的13头断奶仔猪的阳性率为61.5...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
汪登如 严玉霖 陈玲 高洪 王亚超 洪玉莲
为了解昆明地区犬戊型肝炎(HE)流行的情况,共采集血清样本268份,其中包括昆明主城区家庭散养犬血清样本163份,养犬场犬血清样本65份,城市流浪犬血清样本40份。采用双抗原夹心ELISA方法对上述血清样本进行HEV抗体的检测。结果显示,268份犬血清中HEV抗体平均阳性率为48.51%,城市流浪犬HEV抗体阳性率较高,不同品种不同年龄犬HEV抗体阳性率有差异显著。结果表明昆明地区犬戊型肝炎已经普遍流行,尤其以流浪犬HEV的感染较为严重。
关键词：
犬戊型肝炎 血清学调查
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
韩谦 王庆华 鲁炳义 经字 沈震宇 吴志坚 李爽 甘绍伯
1996年秋季北京有许多猪场发生了弓形虫病 Toxoplasmosis,为搞清此次弓形虫病的发生原因,受北京鲲鹏集团公司的资助进行了规模化猪场弓形虫感染的血清学调查工作。本次调查采用 SPA-ELISA 法,其原理是利用金黄色葡萄球菌 A 蛋白代替第二抗体,与哺乳动物血清中的 IgG 结合;其特点是敏感性高,兼容性强,适应于多种哺乳动物及人的血清学检查.
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