- 年份
- 2024(2480)
- 2023(3470)
- 2022(2790)
- 2021(2599)
- 2020(2146)
- 2019(4683)
- 2018(4782)
- 2017(8253)
- 2016(4917)
- 2015(5507)
- 2014(5909)
- 2013(5405)
- 2012(4943)
- 2011(4469)
- 2010(4616)
- 2009(4213)
- 2008(4013)
- 2007(3755)
- 2006(3308)
- 2005(2994)
- 学科
- 济(13468)
- 经济(13439)
- 管理(12545)
- 业(9264)
- 企(7494)
- 企业(7494)
- 制(5863)
- 学(5776)
- 体(5425)
- 中国(5307)
- 农(4992)
- 财(4305)
- 理论(3973)
- 方法(3878)
- 银(3717)
- 银行(3690)
- 地方(3602)
- 行(3581)
- 教育(3473)
- 融(3467)
- 金融(3460)
- 业经(3263)
- 体制(3248)
- 数学(3111)
- 数学方法(2958)
- 农业(2800)
- 度(2605)
- 制度(2600)
- 和(2535)
- 教学(2467)
- 机构
- 学院(66635)
- 大学(65394)
- 研究(27084)
- 管理(20674)
- 济(20371)
- 中国(19817)
- 经济(19644)
- 科学(19364)
- 农(17376)
- 理学(16832)
- 理学院(16592)
- 管理学(16068)
- 管理学院(15957)
- 所(15374)
- 京(15310)
- 研究所(14092)
- 农业(13744)
- 业大(13549)
- 江(11910)
- 中心(11814)
- 财(11312)
- 省(11171)
- 技术(10933)
- 院(10715)
- 北京(9742)
- 州(9323)
- 范(9182)
- 师范(8992)
- 室(8989)
- 农业大学(8651)
- 基金
- 项目(45694)
- 科学(33460)
- 研究(31368)
- 基金(29987)
- 家(28448)
- 国家(28199)
- 科学基金(22018)
- 省(19795)
- 社会(16963)
- 划(16561)
- 社会科(15856)
- 社会科学(15850)
- 基金项目(15176)
- 自然(15077)
- 教育(14727)
- 自然科(14697)
- 自然科学(14686)
- 自然科学基金(14397)
- 编号(13297)
- 资助(12721)
- 成果(11637)
- 课题(10701)
- 重点(10635)
- 计划(10199)
- 科技(10090)
- 体(9965)
- 发(9871)
- 创(9105)
- 科研(8891)
- 部(8786)
共检索到109483条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李媛媛 郭修武 代汉萍 刘海涛
为建立适宜树莓(Rubus idaeus L.)的SSR分析体系,设计Taq DNA聚合酶、Primer、Mg2+、dNTP和DNA的5因素4水平正交试验,对SSR反应体系进行筛选和优化。结果表明:适宜树莓的SSR分析体系为15μL反应体系中含Taq DNA聚合酶0.5U,Primer 0.2μmol·L-1,Mg2+0.9mmol·L-1,dNTP 0.25 mmol·L-1,DNA 60ng;Primer Rubus285a的最佳退火温度为54～59℃。利用此反应体系对部分树莓品种进行SSR-PCR扩增并电泳检测,扩增谱带清晰且多态性较好,证明此体系稳定可靠。
关键词：
树莓 正交试验 SSR 优化
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张玉平 潘青华 金万梅 李少宁 许奕华 姜明 韩振海
本研究主要对树莓SSR-PCR体系进行优化,以‘来味里(Reveille)’红树莓为试材,利用L9(34)正交试验设计和两因素完全随机试验,研究各主要参数的适宜浓度,建立适合树莓SSR反应的最佳体系,并通过16个不同的树莓栽培品种对优化后的体系进行验证。结果表明:各影响因素中,引物浓度的变化对扩增结果的影响最大,优化后的最佳反应体系(25μL)中,Taq DNA聚合酶和DNA最适用量分别为1.0U和30ng;Mg2+、dNTP和引物最适浓度分别为1.5、0.2mmol/L和0.4μmol/L。利用优化后的反应体系和10对SSR引物对16个树莓品种进行PCR扩增,不同品种间扩增结果稳定,多态性位...
关键词：
树莓 SSR 体系优化 应用
[期刊] 华北农学报
[作者]
侯万伟 樊军锋 张小娟 李雪林
以杨树基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物4种因素3个水平对杨树RAMP反应体系进行优化,建立了适合于杨树的RAMP-PCR优化反应体系,该体系为25μL:Mg2+浓度为1.5 mmol/L,dNTPs为0.2 mmol/L,Taq酶1.0 U,引物各为0.4μmol/L。PCR反应程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,45℃复性1 min,72℃延伸2 min,45个循环,72℃延伸10 min。
关键词：
杨树 RAMP 优化
[期刊] 林业科学研究
[作者]
廖声熙 崔凯 张鹏 王海英 崔永忠 袁首乾
利用正交试验对Taq酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度和模板DNA浓度5个因素进行优化,从而建立了一套适宜构树的ISSR-PCR反应体系。在20μL的反应体系中,各反应物的最适宜含量为:0.07 U.μL-1TaqDNA聚合酶、0.35μmol.L-1ISSR引物、0.3 mmol.L-1dNTPs,2.0 mmol.L-1Mg2+、1.2 ng.μL-1模板DNA。PCR扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性30 s,46℃退火45 s,72℃延伸2 min,40个循环。
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
闫丽君 王红霞 黄芳芳 何长青 梁艳 徐刚标
以伯乐树叶片为材料,利用单因素试验及正交试验对影响伯乐树SSR-PCR扩增的主要因素进行了优化。结果表明,伯乐树SSR-PCR最佳反应体系(20μL)为:Mg2+1.25 mmol/L,d NTP 0.2 mmol/L,Taq DNA聚合酶0.5U,引物0.3μmol/L,DNA 90 ng。这为利用SSR标记进一步开展伯乐树种群遗传多样性研究奠定了前期实验基础。
关键词：
伯乐树 SSR-PCR 体系优化
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李银霞 李天红
以‘新大久保’桃为试材,利用正交设计直观分析法和2因素完全随机试验优化了桃SSR技术中PCR反应体系。试验结果表明,适宜桃遗传分析的SSR技术体系为:在25μL反应体系中Taq DNA聚合酶和DNA最适用量分别为1 U和50~100 ng;Mg2+、dNTP和引物最适终浓度分别为1.5~2.0 mmol/L、0.20~0.28 mmol/L和0.2~0.6μmol/L。利用30个桃品种验证此反应体系,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,扩增产物在100~300bp,多态性高,且反应体系的稳定性和可重复性好。
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
李显煌 高丽云 王娟 张贵良 唐军荣 叶鹏 雷瀚 辛培尧
以云南金花茶为试验材料,利用试剂盒法、SDS法及CTAB法3种方法提取其DNA,并对3种方法的提取结果进行比较;经初筛合成云南金花茶EST-SSR引物,并对影响SSR-PCR体系的Mg~(2+)、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物及模板DNA这5个因素进行L_(16)(45~)正交实验,以期建立较为稳定的云南金花茶SSR-PCR体系。试验结果表明:试剂盒法提取得到的云南金花茶DNA质量最好且符合SSR分子标记试验。各因素对PCR扩增效果的影响程度为:Mg2+>引物> Taq DNA聚合酶> dNTP>模板DNA。试验最终确定的金花茶SSR-PCR最佳反应体系(20μL)为:2.0μL Taq Buffer、1.5μL Mg2+(25 mmol/L)、0.3μL dNTP(10 mmol/L)、0.2μL Taq DNA聚合酶(5 U/μL)、前后引物各0.4μL(10μmol/L)、0.5μL模板DNA(50 ng/μL)、14.7μL ddH_2O。建立和优化云南金花茶SSR反应体系,可为云南金花茶不同种群的遗传变异研究提供基础。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
柳晓磊 汤华 李东栋 王茜 周蓉 林艳青
为摸索适宜椰子的SSR反应体系,分析了PCR反应体系中的Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、模板浓度以及退火温度对扩增结果的影响,建立了适合椰子的SSR反应体系。研究结果表明:在20μL反应体系中,Mg2+、引物和dNTP的最适浓度分别为2.5 mmol/L、0.3μmol/L、0.2 mmol/L;TaqDNA聚合酶的最佳使用量为1 U,模板DNA应加入50 ng,引物最佳退火温度比Tm值较小者低2~3℃。在参数优化的基础上,应用标记分析该反应体系对24个海南不同地区高种椰子样品进行SSR分析,不同样品间DNA谱带多态性丰富,本研究建立的分析体系将为今后椰子资源的S...
[期刊] 华北农学报
[作者]
白锦荣 潘会堂 张启翔
采用L16(54)正交设计和二因素完全随机试验,分析了月季SSR-PCR反应体系的主要成分TaqDNA聚合酶、样本浓度、Mg2+浓度d、NTP浓度以及引物浓度对扩增结果的影响,建立了适合月季的SSR反应体系。研究结果表明:在20μL反应体系中,TaqDNA聚合酶宜加入1.5 U,样本最适宜浓度为30~40 ng,Mg2+的最适浓度为1~1.5 mmol/L,dNTP最适浓度为0.2 mmol/L,单引物的最适浓度均为1μmol/L。用建成的反应体系对19对引物筛选,对12个月季品种扩增,3%的琼脂糖凝胶电泳检测,品种间DNA谱带多态性丰富,证明该体系稳定可靠。
关键词：
月季 SSR 正交试验 反应体系
[期刊] 华北农学报
[作者]
贾新平 孙晓波 梁丽建 邓衍明 苏家乐 周建涛
为了建立适合绣球的ＳＳＲ－ＰＣＲ反应体系，采用正交设计Ｌ２５（５６）对影响ＳＳＲ－ＰＣＲ反应体系的５个主要因素（Ｍｇ２＋、ｄ ＮＴＰＳ、引物、ｄＮＡ模板和ＴＡｑ聚合酶）在５个水平上进行优化，筛选出每个因素的最佳水平，建立适合绣球的ＳＳＲ－ＰＣＲ反应体系。结果表明，２０μＬ的ＳＳＲ－ＰＣＲ反应体系中，ｄＮＡ模板用量为６０ Ｎｇ，Ｍｇ２＋浓度为１．５ ＭＭｏＬ／Ｌ，ｄ ＮＴＰＳ浓度为０．３ ＭＭｏＬ／Ｌ，引物浓度为０．４μＭｏＬ／Ｌ，ＴＡｑ聚合酶用量为０．８ Ｕ。扩增程序为：９４℃预变性５ ＭｉＮ；９４℃变性１ ＭｉＮ，最佳温度退火４０ Ｓ，７２℃１ ＭｉＮ，３３个循环；７２℃延伸１０ ＭｉＮ，４．．．
关键词：
绣球 SSR-PCR 正交设计 反应体系
[期刊] 林业科学
[作者]
房玉林 张昂 孟江飞 刘金串 王华
为提高树莓酒品质,采用4种传统工艺和CO2浸渍工艺进行小容器(10L)树莓干酒的酿造,测定各种酒中单体酚。结果表明:CO2浸渍法酿制的树莓干酒中除芦丁外,其他酚类物质均要高于传统酿造法酿制的树莓干酒。2年陈酿的11%(v/v)干型树莓酒与未经陈酿的11%(v/v)干型树莓酒相比,阿魏酸、香豆酸和芦丁含量有所下降,水杨酸含量基本未发生变化,其余均有不同程度提高,特别是陈酿过程中槲皮素和安息香酸增量明显。高酒度利口酒芦丁含量远低于其他酒类,且有芦丁含量随酒度增高而降低的趋势。与传统工艺相比,CO2浸渍酿造的酒更适合酚类物质的转化,陈酿过程有利于芦丁含量下降,进一步改善酒的风味,实现口感的平衡。
关键词：
树莓酒 工艺 单体酚 变化
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
尤卫艳 黄华宏 程龙军 童再康 朱玉球
采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)-硅珠法提取光皮桦Betula luminifera嫩叶DNA,利用近缘种日本白桦B.platyphylla var.japonica和欧洲白桦B.pendula的引物,建立光皮桦简单重复序列标记(SSR)反应体系。在体系建立过程中,采用单因素法分别对影响聚合酶链式反应(PCR)反应的因素进行分析。结果表明:在20μL反应体系中,模板DNA用量、Mg2+浓度、脱氧核糖核苷酸(dNTPs)浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量分别为60ng,1.500mmol·L-1,0.175mmol·L-1,2.500mmol·L-1,1.0×16.67nkat时结果最...
[期刊] 华北农学报
[作者]
葛风伟 张海英 陈青君 王永健 许勇
为摸索适宜黄瓜的SSR反应体系,分析了PCR反应体系中的Mg2+浓度、、dNTP浓度、DNA模板浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度对扩增结果的影响,并比较了琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶体系在检测扩增产物多态性方面的差异。结果表明:在25μL PCR反应体系中,Mg2+的最适浓度为0.2 mmol/L;dNTP最适浓度为0.2 mmol/L;反应体系中Taq聚合酶宜加入1U,引物应加入30 ng;DNA 最适浓度为 5 ng/μL。
关键词：
黄瓜 SSR 琼脂糖凝胶 聚丙烯酰胺凝胶
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
付海滨 丛斌 褚栋
以松毛虫赤眼蜂为试材,研究了单头赤眼蜂DNA的提取方法以及SSR反应体系的的主要成分对SSR扩增结果的影响。结果表明:在20μL PCR反应体系中,Mg2+的最适浓度为2.0mmol.L-1,dNTP的最适浓度为2.0mmol.L-1,引物的最适浓度为0.8μmol.L-1,Taq聚合酶的最适浓度为1.0U。利用此反应体系,对13个松毛虫赤眼蜂地理品系进行SSR反应,用6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测PCR扩增产物,不同品系间DNA谱带多态性丰富。
关键词：
赤眼蜂 简单序列重复 反应体系
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
