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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
苏玲 胡静 李雨婷 金周雨 杨扬 杨颜铭 宋慧
为确定树舌多糖在小鼠脾淋巴细胞上的定位,应用胺化还原法在树舌多糖(GAP)的还原性末端连接异硫氰酸荧光素(FITC),用荧光分光光度计测定其荧光取代度,xCELLigence RTCA DP全自动实时细胞分析仪检测GAP荧光标记前后生物学稳定性。流式细胞仪检测小鼠脾T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞中的GAP荧光强度,荧光显微镜观察GAP在小鼠脾淋巴细胞中的定位。结果显示:在荧光标记GAP(FITC-GAP)前后的细胞毒活性不变,并且其荧光取代率为0.90%;流式细胞仪检测发现小鼠脾T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞上的荧光信号强度与FITC-GAP加入量成正相关,荧光显微照片显示GAP定位于小鼠...
关键词：
树舌 多糖 荧光标记 脾细胞 细胞定位
[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨姗姗 张秀娟
本文通过观察荷瘤小鼠淋巴细胞内钙离子浓度的变化,初步探究Ca2+作为第二信使在半枝莲多糖诱导淋巴细胞增殖过程中调控作用。采用荧光探针Fura-3/AM对细胞内的Ca2+进行标记,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的荧光强度变化。结果表明,半枝莲多糖各剂量组与空白对照组比较均对脾淋巴细胞中钙离子的浓度有显著提高作用(P<0.01),并呈现剂量依赖关系,而与阳性组比较各剂量组均低于阳性组,低、中剂量组有差异(P<0.05)。从试验结果看出,胞内Ca2+浓度的提高能促进淋巴细胞的增殖。
关键词：
多糖 淋巴细胞 钙离子
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
张龙涛 王舒宁 龚晖 沈恒胜 林锋强 缪伏荣
采用MTT法依次用热水、冷碱、热碱浸提姬松茸菌丝体,研究得到的3种水溶性多糖及胞外多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.结果表明:4种多糖在不同质量浓度下可单独或协同Con A刺激淋巴细胞增殖;以0.5-0.25μg.mL-1冷碱提取的水溶性多糖,可促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖(P>0.05).
关键词：
姬松茸 多糖 脾淋巴细胞 MTT法
[期刊] 西南农业学报
[作者]
谭成明 房慧伶 胡庭俊
为探讨山豆根多糖对地塞米松诱导的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡的影响,通过腹腔注射地塞米松建立小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡模型,并采用琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜和流式细胞术进行观察和检测。结果表明,除空白对照组外,其余各组的琼脂糖凝胶电泳图均出现梯状条带,而且透射电子显微镜观察凋亡对照组和不同剂量山豆根多糖组均可见典型的凋亡特征,胸腺和脾脏淋巴细胞的胞核染色质凝聚呈半月形、C形及凋亡小体,可见巨噬细胞吞噬凋亡小体。流式细胞仪分析显示,不同剂量山豆根多糖组凋亡率与凋亡对照组凋亡率比较有显著性差异(P
关键词：
山豆根多糖 小鼠 淋巴细胞 细胞凋亡
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
特列克·阿依恒别克 赛福丁·阿不拉 萨比热·热夏提 况玲 德力拜尔·木拉提 阿得力江·吾斯曼
[目的]探讨骆驼刺酸性多糖 (Acidic Alhagi sparsifolia shap polysaccharide， aASP) 对小鼠脾淋巴细胞的免疫增强作用。[方法]本试验采用醇沉法提取骆驼刺多糖，采用柱层析法对骆驼刺多糖进行分离及纯化，采用苯酚硫酸法、硫酸-咔唑法和BCA微孔酶标仪法，检测糖含量、糖醛酸和蛋白含量，采用红外光谱法鉴别多糖性质。采用MTT法确定aASP对小鼠脾脏淋巴细胞的安全浓度，在安全浓度范围内500 μg·mL~(-1)、125 μg·mL~(-1)和31.25 μg·mL~(-1)三个浓度下检测单独、协同LPS和PHA对脾淋巴细胞的增殖效果；流式细胞术检测aASP对淋巴细胞亚群分化的影响；ELISA法检测aASP对淋巴细胞细胞因子分泌的影响。[结果]骆驼刺多糖提取物中多糖含量为81.8%±1.2%，糖醛酸含量为17.34%±0.75%，蛋白含量为0.54%±0.08%；红外光谱显示aASP在1746.53 cm~(-1)处有较强的吸收峰，结合糖醛酸含量判定aASP为酸性多糖。高、中、低浓度的aASP均可促进脾脏淋巴细胞增殖，协同LPS和PHA能够更显著促进B细胞和T淋巴细胞的增殖(P<0.05)。流式细胞术和ELISA检测结果显示aASP能够促进CD4~(+)T和CD8a~(+)T细胞的分化，并促进脾淋巴细胞分泌IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-4。[结论]aASP可以增强小鼠脾脏淋巴细胞的增殖，诱导小鼠脾脏T淋巴细胞产生Th1及Th2混合型免疫应答，免疫细胞偏向CD4~(+)T细胞分化。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王燕 周学军 蔡亚非 陈杰 杨帆 李平 刘再群 邓立翠
取发育到第14天的鹅胚胎(E14)到1日龄雏鹅的脾脏用免疫荧光双标法研究CD4和CD8抗原表达,用Hoeschst33342的荧光染色方法分析细胞凋亡率,探索鹅胚脾淋巴细胞选择机制。结果显示:E14脾初具轮廓,E19脾出现红髓和白髓,1日龄时脾被膜增厚,脾小结数目增多,脾结构完整。CD4和CD8共表达于脾的红髓和被膜上,白髓中表达量较少。鹅胚脾的CD4+CD8+表达量为1%～30%;1日龄雏鹅的双阳性面积百分比与胚胎鹅E14、E19、E24、E27差异极显著(P<0.01);1日龄雏鹅的凋亡率与胚胎鹅E14、E24差异极显著(P<0.01)。表明鹅胚脾的CD4+CD8+表达与细胞凋亡存在协同关...
关键词：
鹅胚 脾 CD4+CD8+ 外周淋巴细胞
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
范云鹏 王德云 胡元亮 刘家国 赵晓娟 袁菊 高焕 王远垒
为了观察黄芪多糖(APS)被制备成黄芪多糖脂质体后是否能够提高其生物活性,用MTT法测定了其对鸡T、B淋巴细胞增殖的影响,以APS溶液和空白脂质体作为对照。结果显示:APS脂质体在125～15.625μg.mL-1时无论是单独作用还是协同植物血凝素(PHA)作用均能显著促进鸡T淋巴细胞的增殖,并且在125～31.25μg.mL-1时,效果显著优于APS溶液和空白脂质体(P<0.05);APS脂质体在125～15.625μg.mL-1时无论是单独作用还是协同脂多糖(LPS)作用均能显著促进鸡B淋巴细胞的增殖,并且在31.25μg.mL-1的效果显著优于APS溶液和空白脂质体(P<0.05)。表明...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张玲 胡庭俊 陈炳全
马尾藻具有很高的食用和药用价值,分离提取马尾藻多糖(Sargassum polysaccharides,SP),对其理化性质进行分析;研究马尾藻多糖对氧化应激态鸡脾脏淋巴细胞内谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)分泌水平及淋巴细胞体外增殖的影响。结果表明:马尾藻多糖提取率为152.8 g/L;马尾藻多糖浓度为100、200、400 mg/L时,能显著促进体外培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖;H2O2浓度为50μmol/L时,能诱导体外培养的鸡脾脏淋巴细胞处于氧化应激状态。马尾藻多糖浓度为400 mg/L,与细胞共孵育4 h或12 h,能显著增加氧化应激态细胞内GSH含量;共孵育培养8 h,能显著降低氧...
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
李丽立 张彬 朱南山 印遇龙 彭慧珍 邱细敏 唐志如
为探讨多糖对早期断奶仔猪淋巴细胞增殖与细胞因子的影响,选用21d龄健康杜×长×大断奶仔猪(5.30±0.25kg)25头,随机分为5个组,每组5头,分别饲喂玉米-豆粕型基础日粮(CR)、基础日粮+0.3%白术纯多糖(PPAM)、基础日粮+0.6%复合粗多糖(CCP)、基础日粮+0.6%白术粗多糖(CPAM)、基础日粮+抗生素(15%金霉素150mg/kg+4%黄霉素50mg/kg)(ANT),试验期为14d。结果显示:PPAM、CCP能提高血清中TNF的含量(P<0.05),同时PPAM、CCP、CPAM也有提高淋巴细胞增殖和IL-2的趋势。表明饲料中添加PPAM、CCP能够有效提高早期断奶仔...
[期刊] 华北农学报
[作者]
朱南山 张彬 李丽立 侯德兴
本试验研究了白术多糖对仔猪血淋巴细胞转化率及细胞内信息分子一氧化氮(NO)、环腺苷酸(cAMP)、环鸟苷酸(cGMP)及干扰素γ(IFN-γ)的影响。分离制备仔猪血淋巴细胞悬液,MTT法检测细胞增殖;酶联免疫法测定培养上清液IFN-γ的浓度;放射免疫法测定cAMP、cGMP的浓度;利用硝酸还原法测定NO,发现白术多糖能显著促进仔猪血淋巴细胞转化率I、FN-γ、细胞内NO浓度及cAMP浓度。以上结果提示,白术多糖能显著提高血淋巴细胞免疫功能,其作用是通过改变细胞内信息传导实现的。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
邱妍 崔保安 胡元亮 张红英 王远阁
450羽14日龄蛋公鸡随机均分成9组,用鸡新城疫-传染性支气管炎二联(NDV-IBV)弱毒苗首次免疫的同时,8个试验组分别肌肉注射高、低剂量的黄芪多糖、板蓝根多糖、牛膝多糖和山药多糖溶液,对照组注射生理盐水,每天1次,连续3 d。28日龄用NDV-IBV灭活油乳苗再次免疫。各组分别于首次免疫后第7、14、21、28、35、42和49天随机抽取8羽翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制(HI)抗体效价;于首次免疫后第10、20、30、40和50天每组随机抽取5羽心脏采血,分离淋巴细胞,分别用MTT法和流式细胞仪双染色法测定淋巴细胞增殖和CD4+、CD8+T淋巴细胞含量的动态变化。结果...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福
从鲤胸腺、头肾和血液中分离淋巴细胞，在添加不同剂量的柱状嗜纤维菌脂多糖（ＬＰＳ）的ＲＭＰＩ１６４０培养基中培养一定时间后，采用ＭＴＴ比色法测定ＬＰＳ对淋巴细胞的刺激指数（ＳＩ），比较了ＬＰＳ对不同组织中离体培养淋巴细胞的转化率。结果表明，ＬＰＳ添加量和培养时间对淋巴细胞的转化率都有明显的影响，当ＬＰＳ添加量为２０μｇ／ｍｌ，培养时间为７２ｈ，鲤各种组织中淋巴细胞的转化率达到峰值。血液中淋巴细胞转化率最高，ＳＩ达到１．７７；头肾其次，ＳＩ为１．３３；而胸腺中淋巴细胞的转化率最低，ＳＩ仅为１．０３。
关键词：
鲤 脂多糖 淋巴细胞 转化率
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福
用荧光素标记的兔抗鲤ＩｇＭ和胸腺淋巴细胞表面抗原（ＣＡＴＬＣ）抗体，对从鲤血液中分离的淋巴细胞类型进行了鉴定。结果表明，正常鲤血液淋巴细胞中Ｂ淋巴细胞样细胞约占（２５．３±７．２４）％，Ｔ淋巴细胞样细胞约占（３１．６±９．４８）％。
关键词：
荧光标记抗体 鲤 淋巴细胞
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
杨桂红 黄一帆 林珊珊 祁保民 王全溪
分别采用基因克隆技术、细胞分离培养技术和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法首次克隆了番鸭神经肽S(NPS)的基因,并探讨NPS对番鸭脾淋巴细胞体外增殖能力的影响.基因测序结果显示,所克隆的番鸭NPS c DNA序列为181 bp,与其他物种NPS的同源性极高,其中与鸡NPS的亲缘关系最近.MTT法研究结果显示:0.01-1000 nmol·L-1NPS可促进番鸭脾淋巴细胞体外的增殖,其中以10 nmol·L-1NPS的促进效果最优;10 nmol·L-1NPS协同脂多糖(LPS)及1 nmol·L-1NPS协同植物血凝素(PHA)对促进脾淋巴细胞增殖的效果最好.上述结果表明,番鸭NPS基因在进化上是高...
关键词：
番鸭 神经肽S 基因克隆 脾淋巴细胞增殖
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李奎 李明 康相涛 刘英
为了探讨固始鸡脾脏内淋巴细胞自然凋亡的过程和超微结构的变化。应用透射电子显微镜技术,对固始鸡17日龄胚胎和4,19周龄固始鸡3组正常发育的脾脏内淋巴细胞自然凋亡的超微结构进行了研究。结果表明,脾脏内自然凋亡的淋巴细胞主要表现为细胞核的变化,其次是线粒体增多。核质凝集为新月形、C字形、圆环形、花瓣状等多种形态,凋亡细胞裂解为凋亡小体,最后被巨噬细胞吞噬;固始鸡胚胎和4,19周龄固始鸡脾脏内自然凋亡细胞有逐渐增加的趋势。由此可见,固始鸡脾脏内淋巴细胞存在着自然凋亡现象,凋亡细胞主要表现为细胞核的变化,其次是线粒体增多。
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