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[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 余剑  
针对传统人工免疫网络安全模型在对异常检测中的弊端,首先定义了危险理论树突状细胞在网络安全模型中的表示形式,并提出了一种新的抗原识别和抗原提呈算法来解决该弊端。结果表明:该算法可以大大降低入侵检测系统的误报率和提高检测率,该模型不仅对建立计算机安全系统具有重要的理论意义,并能应用在农业病虫害预测和水文气象监测中建立实时监测模型。
[期刊] 水产学报  [作者] 陈孝煊  李思思  周成翀  吴志新  
树突状细胞(DCs)是目前已知的体内功能最强的抗原递呈细胞,是唯一能够激活初始T淋巴细胞反应的细胞,在先天性免疫、适应性免疫以及维持自身免疫耐受方面具有重要的作用,因此一直是免疫学研究的重要领域。本文简要综述了DCs的类型及其在动物体内的功能、各类DCs的细胞标记。总结了鱼类DCs的分离、纯化方法和形态学观察方法;现有研究表明,鱼类DCs具有吞噬细菌、刺激T细胞增殖、诱导CD4+T细胞的活化、表达DCs的标记基因、被Toll样受体的配体激活、迁移能力、引起混合淋巴细胞反应等生物学功能;不同鱼类DCs的分子标记并不完全一样;鱼类的头肾、肾、鳃、皮肤、胸腺、脾、肠等均有DCs的分布。目前,对鱼类DCs的研究虽然取得了一定进展,但仍有许多重要问题需要解决:①鱼类DCs目前缺乏明确的细胞标记,加强这方面的研究有助于提高鱼类DCs的分离、体内分布与功能的研究水平;②加强和完善鱼类DCs的分离、培养技术的研究,掌握各种鱼类DCs的分离培养方法;③加强鱼类DCs在抗原递呈中的功能研究,对深入分析鱼类免疫机理,合理设计和应用疫苗,具有重要的理论指导意义。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 申育萌  赵姗姗  杨倩  
本试验选用MHCⅡ、CD11b和CD16三种猪树突状细胞(DC)的抗体,对10头2月龄的杜长大三元杂交猪咽鼓管扁桃体和软腭扁桃体中的DC进行标记,应用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜技术对分布于猪扁桃体内的DC进行观察和分析。结果发现:猪咽鼓管扁桃体和软腭扁桃体黏膜下固有层和淋巴滤泡内的DC可共表达CD11b与CD16或CD11b与MHCⅡ分子。咽鼓管扁桃体和软腭扁桃体黏膜下固有层中双阳性DC数量大约是淋巴滤泡双阳性DC数量的3倍。正常状态下双阳性DC在扁桃体上皮细胞间分布较少,咽鼓管扁桃体上皮细胞间几乎没有分布。单阳性CD11b+DC多分布于咽鼓管上皮细胞下方,仅有少量的CD11b+DC可向上皮...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 袁晨  张恩  王佳璐  黄璐璐  杨倩  
[目的]本试验旨在建立体外分离猪肠黏膜派尔集合淋巴结(Peyer’s patch,PP)中树突状细胞(dendritic cell,DC)的方法。[方法]应用密度梯度离心的方法获得单个核细胞,然后分别采用免疫磁珠法、流式细胞术根据细胞表面标志MHC-Ⅱ和SWC3a分选猪肠黏膜PP结DC,并进行DC形态学和免疫学性质鉴定。[结果]磁珠分选(magnetic cell sorting,MACS)富集SWC3a+细胞纯度达90.2%,而SWC3a+/MHC-Ⅱ+细胞纯度达50.5%。流式细胞术分选猪肠黏膜PP结中SWC3a+/MHC-Ⅱ+DC纯度高达95.6%,将该DC培养2 d后,细胞有聚集现象,细胞表面不规则,略有突起,具有刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。[结论]成功建立了体外分离猪肠黏膜PP结中DC的方法,分离到的DC具有体内DC的生物学特性,为进一步研究猪肠黏膜PP结中DC的功能奠定了基础。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 高雪  朱立麒  栗云云  吴海琴  朱怡蕾  庾庆华  
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 夏兵兵  汪袁  樊彦红  李银环  王晴晴  孙卫东  张海彬  何成华  
[目的]本试验旨在研究脱氧血腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的小鼠骨髓源性成熟树突状细胞(mature dendritic cell,m DC)的表型和吞噬功能的影响。[方法]体外培养小鼠骨髓细胞诱导分化成未成熟的树突状细胞,分别用不同质量浓度的DON(0、125、250、500 ng·m L(-1))处理DC 6 h后,再加入LPS刺激18 h。以仅用LPS处理的为阳性对照组。用流式细胞仪检测DC表型(CD80、CD86和M
[期刊] 华北农学报  [作者] 温立斌  何孔旺  杨汉春  刘梦雅  
采用实时定量PCR技术对类猪圆环病毒因子P1感染猪不同时相猪肺泡巨噬细胞中外源性抗原加工递呈相关分子SLA-DR、SLA-DM和CD74及共刺激分子CD40、CD80和CD86 mRNA的表达进行了检测。结果表明,病毒感染后3 d,上述分子的mRNA表达皆低于对照组相应分子的mRNA表达。其中,CD80 mRNA的表达呈下调趋势(P<0.1),CD40、CD74和SLA-DR的mRNA的表达显著下调(P<0.1);...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 乔文娜  王培永  李翔  马志禹  苏娟  雷治海  
[目的]本文旨在探讨不同浓度神经介素U(NMU)对外周血单核源树突细胞(DC)刺激T淋巴细胞增殖和相关细胞因子分泌的影响。[方法]采集小梅山猪外周血,用集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4联合诱导外周血单核细胞形成未成熟树突细胞,再加入脂多糖(LPS)刺激获得成熟的树突细胞,同时观察DC形态。加入不同浓度(0.01、0.1、1、10、100、1 000 nmol·L(-1))NMU并分别培养2、4、8和12 h后,收集细胞上清液,用ELISA法测定IL-4、IL-5和IL(-1)3的浓度。加入不同浓度(
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 孙智锋  杜念兴  徐为燕  
通过ELISA迭加试验对6株抗兔出血症病毒(RHDV)单克隆抗体(McAb)的抗原表位进行了分析。抗体反应增值结果表明,6株单抗分别针对3类不同的抗原决定簇。CG4-1、CH3-1和AA8-1针对病毒结构多肽上的同一决定簇,CF2-1和RM-17针对另一决定簇,而RM-14针对第3种决定簇;其识别表位可能与AA8-1非常接近。单抗的识别表位与其生物学活性密切相关
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 付佳  梁金逢  阴银燕  杨倩  
为建立鸡骨髓源树突状细胞(DC,dendritic cells)体外培养方法,用重组鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rGM-CSF)和重组鸡白细胞介素4(rIL-4)体外诱导鸡骨髓细胞分化为DC,然后通过形态观察、表型鉴定及功能分析来初步鉴定所培养的DC。试验结果表明:培养7 d后,光学显微镜下观察到细胞表面不规则,有显著的树突状突起,呈典型的DC形态,流式细胞仪测得细胞表面CD11c和MHCⅡ分子的表达量分别为69.3%和63.0%。经脂多糖或CpG-ODN刺激24 h后的DC,其表面成熟分子标志CD40和CD86上调表达,同时其刺激同种异体T细胞增殖的能力显著增强(P<0.01)。结论:本...
[期刊] 华北农学报  [作者] 季海峰  刘彦  莫余忠  高羽军  张春英  
对 2 32头经产母猪进行了SLA分型、生殖激素水平和产仔性状测定 ,其中 ,D型母猪的产仔性能显著高于其他类型 ,表明SLA分型可以成为猪繁殖性能的辅助选择遗传标记 ;在母猪泌乳阶段 ,促黄体素 (LH) 雌激素 (E2 )和孕酮 (P4 )的水平都较低 ,在配种阶段 ,雌激素分泌达到峰值 ,在怀孕 15d时 ,促黄体素和孕酮的分泌达到峰值 ;高产、中产和低产母猪在各生理阶段的激素水平差异不显著 ,难以预测产仔数的多少
[期刊] 华北农学报  [作者] 贾秋磊  王林  陈鹏  杨青  姜秀萍  
白眉蝮蛇降纤酶是我国在临床上用来治疗血栓栓塞性疾病的国家基本药物。但该酶来源于蛇毒,是异源蛋白,且是大分子蛋白质,不可避免的存在免疫原性问题。另外该蛋白药物在我国使用规模很大,因此由免疫原性导致的安全性问题不容忽视。首先通过DNAStar软件和ABCpred、BCPREDS等服务器预测得到肽端AA27~35、44~50、66~72、79~98、101~109、117~127、134~142、151~164、179~188、194~206、221~233、247~260区域为白眉蝮蛇降纤酶的B细胞线性表位优势区域。然后以蝮蛇毒蛋白C激活剂蛋白的晶体结构为模板,利用MODELLER 9.10软件中...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 谈永松  韦习会  徐银学  王林云  黄瑞华  
采集二花脸猪、大约克夏猪和大二杂种猪的外周血,分离淋巴细胞,取其中一部分经丝裂霉素C处理后作为刺激细胞,另一部分为反应细胞,以3H标记的胸腺嘧啶核苷(3HTdR)作标记,进行单相混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture,MLC)。结果表明:对于猪白细胞Ⅱ类抗原(swinelymphocyteantigenⅡ,SLAⅡ)经自身、有血缘关系和无血缘关系个体的淋巴细胞间相互刺激后,所得放射性脉冲频率(脉冲数/分钟,CPM)及刺激指数(stimulationindex,SI)存在显著性差异。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 孙俊丽  牟玉莲  刘小林  冯书堂  王素荣  
【目的】为探讨五指山小型猪(WZSP)近交系群体中SLAⅠ3(SLA-3)位点等位基因分布结构及其特性。【方法】利用4对引物,采用RT-PCR扩增了32头WZSPSLA-3基因部分外显子1、外显子2和大部分外显子3序列。根据家系和扩增结果,选择8头个体的PCR产物克隆测序。【结果】获得9个不同的核苷酸序列。与GenBank中所用SLA-3基因的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行比较分析,确定这9个序列均为SLA-3位点上的新等位基因,但这些等位基因间核苷酸变异很少;氨基酸序列比较发现猪和人之间有很高的保守性。同时,构建了23个SLA-3的等位基因和1个HLA-A等位基因核苷酸序列的系统树。【结...
[期刊] 水产学报  [作者] 乌日琴  张培军  徐芃  李军  徐永立  
To observe the surface microstructure features by using scanning electron microscope,and study the surface antigen on lymphocytes of Paralichthys oliveaceus by form rosette with sheep red bloods cells and the cross-reactivity by using monoclonal antibody against human CD.Under scanning microscope ...
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