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[期刊] 中国农业科学  [作者] 孙耀贵  程佳  李宏全  王俊东  
【目的】"仔猪早期断奶应激综合征"给养猪业带来了巨大的经济损失。中药制剂柴术抗激散(CZKJS)通过现代制药技术制成柴术抗激颗粒(CZKJKL),已被证实其对早期断奶仔猪应激及早期断奶仔猪脂多糖(LPS)免疫应激都具有明显的缓减作用。现进一步探究CZKJKL对LPS免疫应激断奶大鼠应激相关神经递质、细胞因子和HPA轴相关激素的影响,从机理上证实其抗应激作用。【方法】选取体重相近的18日龄断奶的Wistar大鼠72只,随机分为3个处理组,即Ⅰ组(空白对照组)、Ⅱ组(LPS免疫应激模型组)、Ⅲ组(LPS+CZKJKL组)。每个处理设6个重复,每个重复4只。在18—24日龄期间,Ⅲ组的大鼠每天灌服5...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 丁宏标  韩正康  陈杰  
用36只2月龄 Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠研究两种给药制度下 Cimaterol(CIM)对其生长、代谢及内分泌的影响。一种给药制度是日粮中添加 CIM 10mg/kg(Ⅱ组),另一种是含10mg/kg CIM 日粮和基础日粮轮流供给,每2d 变换一次(Ⅲ组)。结果发现间隔2d 添喂组大鼠30d 日增重提高幅度(21.9%)大于连续添喂组(17.2%),肌肉重也较高。同时间隔添喂组大鼠在实验期的0~10d,10~20d,20~30d 和0~30d日增重均显著高于对照组(Ⅰ组),未出现适应现象。而连续添喂组在实验中有明显适应现象。表明间隔给药可以延缓 CIM 的适应现象。两种给...
[期刊] 水产学报  [作者] 王宇  卢丹琪  李伟萍  徐跑  顾若波  姚谧  梁瑶思  张勇  林浩然  
为深入了解刀鲚应激反应中相关神经内分泌因子作用的分子机理,采用手工捕捉的方式对刀鲚进行了急性操作胁迫。通过放射免疫法和化学发光法测定刀鲚应激反应后头肾和血浆皮质醇含量的变化,结果显示,刀鲚胁迫刺激后血浆皮质醇含量极显著性升高,血浆皮质醇浓度平均升高56.48%,头肾皮质醇含量显著性升高,头肾皮质醇浓度平均升高49.68%,表明急性操作胁迫确实引起刀鲚的应激反应。通过同源克隆的方法获得刀鲚促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、硬骨鱼紧张肽(UI)、阿黑皮素原(POMC)基因的部分序列,并应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测上述神经内分泌因子mRNA的表达变化,结果显示,CRH基因的表达...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 于昊  李曼曼  薛洋  姜志洋  茆达干  
[目的]本试验旨在研究毛喉素(FSK)对体外培养的猪卵泡颗粒细胞分化的作用及其机制。[方法]体外分离培养猪原代卵泡颗粒细胞,预培养24 h。应用FSK(10 nmol·L~(-1))处理细胞48 h,检测细胞形态、脂滴积聚、标记基因和周期相关基因表达;处理96 h检测孕酮(P_(4))水平及类固醇合成相关蛋白的表达。[结果]与对照组相比,FSK改变了细胞形态,增大了细胞直径,并使细胞内脂滴含量增加(P < 0.01);FSK降低了细胞的增殖活性和增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA的表达水平(P < 0.01);FSK降低了颗粒细胞标记基因促卵泡素受体(FSHR)mRNA的表达水平,提高了黄体细胞标记基因前列腺素受体(PTGFR)和促黄体素受体(LHCGR)mRNA的表达水平(P < 0.01);FSK促进了P_(4)分泌,提高了类固醇合成相关蛋白StAR、P450scc和3β-HSD的表达水平(P < 0.01);从细胞周期看,FSK降低了细胞周期素B1(CCNB1)、细胞周期素D1(CCND1)和细胞周期蛋白依赖性激酶1 (CDK1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)基因的表达(P < 0.01),而使细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A/B(P21~(cip1)/P27~(kip1))基因表达上调(P < 0.01),并将细胞周期阻滞在G0/G1期。[结论]FSK能够通过抑制细胞增殖、增强脂滴积聚和孕酮合成代谢、退出细胞周期来促进颗粒细胞向黄体细胞转化。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 石勇  胡毅  刘艳莉  车常宝  钟蕾  
为探讨血根碱是否具有缓解黄鳝(Monopterus albus)由脂多糖(LPS)诱导后引起的免疫应激及炎症反应作用,本实验设置对照组(基础饲料)和实验组(基础饲料+750μg/kg血根碱),每组3个重复,养殖实验持续8周,结束后每个重复随机取30尾规格一致的黄鳝经腹腔注射大肠杆菌脂多糖(LPS),在注射前0 h和注射后3 h、6 h、12 h、24 h和48 h进行采样。结果显示,在0 h时,实验组肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活力显著高于对照组(P0.05);血清中葡萄糖(GLU)、皮质醇(COR)、IgM、C4、碱性磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)和肝脏中SOD在腹腔注射LPS后均呈先上升后下降的趋势,并在3 h或6 h达到峰值,肝脏中丙二醛(MDA)的变化趋势与其相反;与对照组相比,实验组血清中AKP、IgM、C4的含量和肝脏中SOD活力在注射LPS后上升幅度更大,GLU和COR的含量上升幅度慢,并且GLU、COR、AKP、IgM、C4、GOT和GPT恢复至正常水平速度更快。肠道中炎症相关基因IL-1β、IL-10、IL-12β、IL-15、TGF-β1和TGF-β2表达量在腹腔注射LPS后呈先上升后下降的趋势,并在6 h或12 h达到峰值;与对照组相比,实验组下调了IL-1β和IL-12β基因表达量,上调了IL-10、IL-15、TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3基因表达量。综上所述,在本研究条件下,腹腔注射LPS诱导黄鳝产生了免疫应激及炎症反应,在3~6 h时出现高峰,而饲料中添加750μg/kg血根碱能够有效改善黄鳝由LPS诱导产生的免疫应激及炎症反应。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张德坤  杨利国  曹少先  王文  乌娜尔汗  纪平  古武昌  
用抑制素基因重组质粒(pC IS)免疫生产母羊,剂量分别为每只0.2 mg、0.4 mg和0.8 mg,以生理盐水为对照。结果表明:免疫组抗抑制素抗体阳性率达46.7%。加强免疫后第45天,免疫组的促卵泡素(FSH)水平显著高于对照组(P<0.05)。首次免疫后第20天与加强免疫后第45天抗体阳性羊的促卵泡素水平显著高于抗体阴性羊(P0.05)。抑制素基因免疫能调节绵羊的促卵泡素水平,但对雌激素与孕激素的水平无显著影响。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 邬静  袁慧  彭双清  
为研究大鼠卵巢颗粒细胞(GC)的分泌功能,用氯丙嗪染毒体外培养的大鼠GC,采用MTT法检测细胞相对活力,ELISA法检测收集培养液中孕酮(P)和雌二醇(E2)的含量,半定量RT-PCR检测激素分泌相关调控基因FSHR、StAR、P450scc和P450arom mRNA的表达,免疫细胞化学染色法检测细胞中特异卵泡刺激素受体的表达。结果表明:经0.1、1.0和10.0μmol/L氯丙嗪染毒24 h后,与对照组相比,细胞相对活力分别为87.95%、83.96%和74.48%,E2的分泌量和StAR mRNA相对表达水平分别从对照组的6.16 pg/μg、2.014显著下降到3.70 pg/μg、0...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王慧  王悦尚  李富宽  王振南  潘章源  杨燕  吕慎金  
为了解绵羊母性行为及调节母性行为的神经内分泌、分子机制研究进展,以绵羊"母性行为,影响因素,神经内分泌,分子机制"为检索词,查阅绵羊母性行为相关文献资料。结果发现:绵羊母性行为的表达促进母子关系的建立,母羊品种、胎次、性情、产羔数、饲养面积以及妊娠期营养状况影响其母性行为的表达。母羊体内释放的激素(雌激素、催产素)和神经递质(谷氨酸、γ-氨基丁酸、一氧化氮、去甲肾上腺素)调控母性行为的发生,且DNA甲基化可能是调控母性行为的分子机制之一。绵羊母性行为的影响因素及神经内分泌调控机制研究已较为成熟,但关于调控绵羊母性行为的分子机制尚缺乏深入系统研究。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 夏银  汪兴生  杨利国  韦来红  程瑞禾  
运用Mannich反应制备褪黑激素(MLT)完全抗原(复合物中MLT与BSA的结合比为11.5∶1)。在秋冬季用该抗原主动免疫5只罗曼蛋鸡,经ELISA检测,各鸡均产生MLT特异性抗体。在自然光照下,通过MLT完全抗原主动免疫,可显著提高首次免疫2个月后的雌二醇(E2)水平,且抗体效价高的两只鸡提高的幅度较大;还抑制了雌二醇(E2)和孕酮(P)在秋冬季的下降趋势。因此短日照下通过主动免疫中和蛋鸡体内MLT,可增强蛋鸡生殖内分泌功能,提示短日照下MLT对蛋鸡生殖机能具有抑制作用。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 张志强  吴孝兵  
应用5种特异性哺乳动物胃肠激素抗血清,采用卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(Avidin-biotin-peroxidase complex,ABC)免疫组织化学法,对红耳龟(Trachemys scripta elegans)消化道内分泌细胞进行了鉴别和定位研究。结果显示:大多数内分泌细胞呈楔形、梭形或烧瓶形,少数呈圆形或椭圆形。5-羟色胺和生长抑素细胞在消化道各段均有分布,分别以胃幽门部和十二指肠、胃体部为最高,在食道和空肠处最低。胰高血糖素和胃泌素细胞均在直肠处密度最高,但分布型不同。血管活性肠肽细胞在胃幽门部密度最高,回肠未见。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 孙娜  张司寰  岑龙座  曹志刚  张华  孙盼盼  孙耀贵  范阔海  尹伟  李宏全  
为探讨苦参碱在小鼠体内的抗炎作用及其机制,本研究利用猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染诱导小鼠肺炎模型,将32只昆明小鼠均分为空白对照组、PCV2组、苦参碱处理组(40mg/kg)和利巴韦林阳性对照组(40mg/kg)。除空白对照组外,其他各组小鼠每只腹腔注射0.5mL PCV2,攻毒后的第5天开始腹腔注射对应药物,每天给药一次,连续给药5d。在攻毒后的第11天,观察小鼠肺脏的病理组织学变化,qPCR检测PCV2 Cap基因,IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因的mRNA表达,Western blot检测相应炎症因子、TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及NLRP3炎症小体关键蛋白的表达。结果表明:1)苦参碱可显著抑制PCV2感染诱发的肺间质增宽现象。2)苦参碱可显著降低肺脏PCV2病毒载量(P<0.05)及炎症因子IL-1β(P<0.05)、IL-6(P<0.01)、NLRP3(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 杜露平  侯立婷  于晓明  程海卫  郑其升  陈瑾  
[目的]本试验旨在探究免疫增强剂CVC1302促进淋巴滤泡生发中心(GC)应答的作用机制。[方法]将模式抗原4-羟基-3-硝基苯乙酰基耦联鸡卵白蛋白(NP-OVA)与CVC1302配伍后,与ISA206佐剂乳化制备疫苗NP-CVC1302,免疫6周龄BALB/c雌性小鼠。免疫后不同时间点,利用NP-BSA作为捕获抗原检测小鼠血清NP~+抗体水平及亚型抗体水平。免疫后14 d,流式细胞术检测腹股沟淋巴结的滤泡辅助性T细胞(T_(FH)细胞)、NP~+ GC B细胞、NP~+浆母细胞比例;激光共聚焦显微镜检测GC数目;免疫后42 d,流式细胞术检测骨髓处NP~+长寿浆细胞(LLPC)比例。[结果]NP-CVC1302组小鼠NP特异性抗体水平极显著高于NP组(P<0.01),且NP特异性IgG_1、IgG_(2a)抗体水平也显著高于NP组(P<0.05或P<0.01或P<0.001),且GC数目也极显著高于NP组(P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李勇  沈文正  杨春荣  窦忠英  
为了探讨神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)在体外培养中的生物学特性,研究不同细胞因子对NSCs分化的影响,试验对大鼠胎儿神经干细胞进行了分离培养,并研究了10,50和100 ng/mL的神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain derived neruotrophic factor,BDNF)和胶质源性神经生长因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对NSCs的定向诱导分化作用。结果表明,大鼠胎儿NSCs可在体外增殖并形成典型的神经球,指数增长期在传代后...
[期刊] 华北农学报  [作者] 铁英  杨成林  常诚  王耀辉  孙鸿举  
植物先天免疫的分子基础是位于植物细胞膜的受体蛋白对病原菌特有分子模式的特异识别。脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁的核心组分,可以被动物细胞质膜的TLR4复合物识别。为了探索植物细胞识别LPS的受体,用动物TLR4氨基酸序列比对拟南芥蛋白数据库,发现拟南芥AtGHR1氨基酸序列同TLR4高度类似。利用β-葡萄糖苷酸酶(GUS)报告基因和绿色荧光蛋白标记技术,发现AtGHR1在叶片和根尖中强表达,其编码蛋白位于细胞质膜。在AtGHR1基因缺失突变体atghr1叶子上,含有LPS的病原菌Pst DC3000
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 张德坤  杨利国  张红琳  王文  乌娜尔汗  纪平  古武昌  
应用抑制素基因免疫重组质粒 (PCIS)免疫绵羊 ,首次免疫后 ,绵羊能够产生抗抑制素抗体 ,加强免疫后抗体增加显著 (P
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