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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈春丽 郭文武 邓秀新
染色体原位杂交技术近年发展较快,已广泛应用于植物遗传育种实践。在植物体细胞杂种遗传鉴定方面,染色体原位杂交技术也日益显示出其优势,可用于倍性变异的来源检测,非对称杂种的非对称程度确认,融合双亲的基因组互作、染色体行为分析,以及融合双亲染色体在体细胞杂种有性过程中的传递等。还探讨了染色体原位杂交技术在柑桔远缘体细胞杂种遗传鉴定中的应用前景。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
王文奎 戴思兰
该文综述了近年来染色体原位杂交技术 (ISH)在植物亲缘关系研究中的应用 .文中介绍了 3种基于不同探针类型的ISH技术 ,以及该项技术在植物供体基因组的识别、不同供体基因组之间关系和物种形成过程中供体基因组的变化等方面的具体应用 ,文章还指出了ISH在该领域的应用前景和它存在的局限性 .
关键词：
植物染色体 原位杂交 亲缘关系
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘艳阳 崔承齐 梅鸿献 武轲 郑永战
【目的】研究和确定芝麻ND-FISH最优试验条件,并对其在芝麻染色体识别中的可行性进行探索。【方法】以寡聚核苷酸(AC)8为探针,研究不同洗脱强度、酶解时间和杂交时间对ND-FISH的影响,确定芝麻ND-FISH最优试验方案。【结果】芝麻ND-FISH最优方案:制片在浓度100μg·mL-1RNase A酶解1h,探针浓度6μL(20 ng·μL-1),杂交4 h,4×SSC/0.2%Tween 20溶液洗脱10 min;18条染色体存在(AC)8杂交信号,其中,14条染色体上存在较强杂交信号,4条染色体上有较弱杂交信号,结合染色体长度及臂比,18条染色体可有效识别。【结论】利用ND-FISH...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘榜 李奎 彭中镇 张会刚 王亚文 汤波
对猪与仓鼠细胞融合形成的一稳定的杂种细胞系进行染色体分析，Ｇ１１ 染色显示该杂种细胞中具有１ 条猪的染色体和２１ 条仓鼠染色体，经ＰＣＲ 检测确证该杂种细胞中含有猪１２ 号染色体
关键词：
猪 染色体鉴定 体细胞杂种
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王三红 章镇 蔡斌华 渠慎春
【目的】建立苹果DNA纤维荧光原位杂交(Fiber FISH)技术体系,从而为利用该技术确定苹果基因组DNA序列间的位置关系、构建精细物理图谱等方面的应用奠定基础。【方法】以‘Florina’苹果幼叶为试材,通过液氮研磨,尼龙膜过滤和TritonX-100去除叶绿素等步骤提取细胞核。细胞核经碱裂解,采用盖玻片拉伸方法制备DNA纤维。比较细胞核不同裂解时间和在5种不同包被类型的载玻片上DNA纤维拉伸的效果。用碱裂解方法提取来自苹果‘Florina’自交不亲和S9基因座的4个细菌人工染色体(Bacterium Artificial Chromosome)BAC 34G16、BAC 45M19、BA...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
余梅 刘榜 赵书红 熊统安 李奎
利用猪×啮齿类体细胞杂种克隆板对本室新克隆和分离的猪胶质细胞原纤维酸性蛋白 (glialfibril laryacidicprotein ,GFAP)基因进行染色体区域定位 ,对应用体细胞杂种克隆板进行染色体区域定位的试验数据统计的基本过程和方法进行了分析 ,研究结果表明 :猪GFAP基因定位于染色体 12p11- (2 /3p13)区域 (P
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
邱小芬 刘虹 覃瑞 陈雁
以地高辛标记的栽培稻基因组(基因组为AA)DNA为探针,对非洲野生稻(基因组为BBCC)的体细胞染色体进行荧光原位杂交分析,研究AA染色体组和BBCC染色体组之间的关系,同时对杂交后的染色体进行同源染色体配对。结果表明:栽培稻A基因组和非洲野生稻基因组有较高的同源性,其中高度重复DNA序列在栽培稻和非洲野生稻间具有保守性。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
董在杰
通过染色体显微切割的方法 ,分别从尼罗罗非鱼XX和YY个体有丝分裂中期相染色体滴片上 ,割取第 1对染色体 ,随后经简并PCR扩增 ,分别用生物素和地高辛标记 ,得到X和Y染色体探针。将探针与尼罗罗非鱼XY个体的染色体进行荧光原位杂交 ,在第 1对染色体上得到很强的杂交信号。结果表明 ,染色体显微切割和简并PCR技术相结合 ,可以有效地制备鱼类DNA探针。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
徐川梅 郑华威 王骢 汤定钦
利用G iem sa C-分带和荧光原位杂交的方法对龟甲竹根尖细胞有丝分裂中期染色体进行了研究。结果表明:龟甲竹的核型公式为2n=48=26m+14 sm+4 st(2SAT)+4 t,核型分类属ⅡB型;带型公式为2n=48=4C I+2C I+T+2CT++10CT++4 I+2 I++6T++6C+8T+2 IT+2 I+T,每条染色体都显示出了可以明显区别的特征带,带纹强弱差异明显。以45S rDNA为探针对龟甲竹根尖染色体进行了荧光原位杂交,杂交位点定位于1对染色体上。将染色体C-带带型和45S rDNA FISH带型相结合可以将龟甲竹的每条染色体区分开。
关键词：
龟甲竹 染色体 C-分带 荧光原位杂交
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王永 朱利泉 荣小营 陈晓丹 唐章林 王小佳
【目的】羽衣甘蓝5SrDNA的染色体定位和拷贝数分析,为进一步利用FISH进行2号染色体基因定位和细胞遗传图谱构建奠定基础。【方法】以羽衣甘蓝为材料,采用荧光原位杂交技术将DIG标记的5SrDNA探针定位于不同分辨率的绒毡层细胞中期染色体、粗线期染色体以及伸长DNA纤维上。【结果】在中期染色体和粗线期染色体上,都同时获得3个杂交信号位点(a、b、c),且位于2号染色体的长臂近着丝粒区域,其信号强度为b>a>c;而在伸长DNA纤维上,出现了3种不同长度的念珠状长链(a、b、c),其物理大小分别为257、359和134kb,这3种长链分别与3个信号位点形成一一对应关系。【结论】在羽衣甘蓝2号染色体...
关键词：
羽衣甘蓝 5S rDNA 荧光原位杂交
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
邓祖湖 赖丽萍 林炜乐 符成 林彦铨
对甘蔗斑茅杂种BC1后代崖城01-21和崖城01-36进行内转录间隔(ITS)鉴定和染色体计数与核型分析,探讨甘蔗斑茅杂交后代的染色体遗传行为.结果表明,崖城01-21的体细胞染色体核型公式为:2n=104=100m+4 sm(4SAT),最长与最短染色体的长度比为4.25,平均臂比1.35,染色体属2C型,分子鉴定结合细胞学研究表明其为斑茅的真实后代,其染色体遗传为n+n;崖城01-36经ITS鉴定为真实杂种,其体细胞染色体核型公式为:2n=132=130m+2 sm,最长与最短染色体的长度比为3.94,平均臂比1.27,染色体属2B型,结合其性状的进展,推断亲本向其传递染色体可能以2n+n...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
顾丰
染色体涂染 （ Ｃｈｒｏｍ ｓｏｍ ｅ ｐａｉｎｔｉｎｇ） 是一项在分子细胞遗传学水平上检测染色体重组和畸变的新技术， 包括染色体涂染 Ｄ Ｎ Ａ 探针制备和荧光标记原位杂交两部分。制备染色体涂染 Ｄ Ｎ Ａ 探针可通过流式细胞分类法， 克隆基因库或体细胞杂交株， 以及染色体显微切割和 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增等途径， 现侧重综述近几年国际上用染色体显微切割和 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增的方法制备探针进行家畜染色体涂染的实验技术和主要成果。研究结果表明，用该技术进行家畜染色体涂染具有很高的特异性和分辨力， 可用来检测家畜染色体畸变、性别鉴定、显微克隆等， 提高了对家畜染色体 Ｄ Ｎ Ａ 研究和分析的能...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
赵丹丹 马璐琳 瞿素萍 阮继伟 卢珍红 苏艳 周旭红
【目的】石竹属植物种间杂交能产生不同的花色和花型的后代,对育种具有重要的意义。【方法】采用压片法鉴定石竹属植物的倍性,醋酸洋红染色观察花粉的活力,并对不同杂交组合结实率及杂交亲合指数进行研究。【结果】研究发现香石竹‘Nogalte’、‘D. P Barbara’、‘Thomas’、‘Red Barbara’、‘NH6’、‘NH10’和‘冬梅’以及石竹属的瞿麦、中国石竹、头石竹和须孢石竹为二倍体(2n=2x=30),常夏石竹为六倍体(2n=6x=90);石竹属植物花粉活力较高,在69. 17%～94. 97%;不同石竹种间杂交座果率和每果种子数各不相同,座果率在0%～100%,每果种子数在0～42. 64颗。【结论】石竹属种间杂交组合除少数组合外都具有亲合性,该项研究对石竹种间杂交育种具有指导意义。
关键词：
石竹属 杂交 染色体 花粉 亲合性
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张玉杰 赵燕 徐璐 张乾义 陈锴 孙永芳 邹兴启 朱元源 赵启祖 宁宜宝 王琴
【目的】为研究ＣＳＦＶ ＲＮＡ在体外感染细胞中的分布及定位，建立了一种准确、敏感的ＲＮＡ可视化原位杂交技术。【方法】本研究通过比对ＧｅＮ ＢＡＮｋ中公布的ＣＳＦＶ、ＢＶＤＶ和ＢＤＶ全序列，避开ＢＶＤＶ和ＢＤＶ的同源区，设计了ＣＳＦＶ ＲＮＡ及内参基因β－ＡＣｔｉＮ的特异探针。以ＣＳＦＶ中等致病力毒株（Ｈｅ ＢＨＨ１／９５）为参考毒株，在Ｐｋ１５细胞中培养病毒，加入ＲＮＡ可视化原位杂交的特异探针和相应试剂，采用荧光共聚焦显微镜进行成像观察。通过综合分析观测结果、荧光强度、重复性等因素，采用正交试验优化了对原位杂交过程中具有重要影响的蛋白酶ｋ浓度和甲醛固定时间，建立了ＣＳＦＶ ＲＮＡ可视化原位杂交．．．
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