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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
段艳欣 范净 李鼎立 郭文武
转化子的高效筛选与再生是获得转基因植株的关键。为快速有效地筛选出转化子,并尽可能在较短时间内获得纯合的转基因植株,开展了柑橘胚性愈伤组织的转化研究。以椪柑、冰糖橙、默科特橘橙等胚性愈伤组织为外植体,采用根癌农杆菌介导法进行转化试验,根据愈伤组织再生过程中不同发育阶段的组织对抗生素的敏感程度及在不同筛选压下抗性组织的生长情况,提出了"5步筛选再生法",获得了大量的再生细胞系,并经GUS检测证实为转化子。
关键词：
根癌农杆菌 GUS检测 卡那霉素 柑橘
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
范永梅 甘霖 邓秀新
以冰糖橙成熟果实中的未发育胚珠为外植体 ,培养诱导胚性愈伤组织并进行植株再生。结果表明 :在不同的培养基和不同的培养条件下胚性愈伤组织和胚状体的发生频率不同 ;麦芽提取物和GA3 有利于胚性愈伤组织的发生 ,暗培养有利于胚性愈伤组织的诱导 ;在MKBN (MT +KT 0 .5mg/L +BA 0 .5mg/L +NAA0 .1mg/L)培养基上 ,胚状体的再生率达 88.2 4 % ,以酸橙作砧木进行试管嫁接 ,嫁接成活率达 88.89%。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
薛婉钰 刘娜 苑鑫 张婷婷 曹云娥 陈书霞
【目的】对黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生进行研究,为黄瓜高频率遗传转化奠定基础。【方法】以欧洲温室型黄瓜自交系14-1子叶节为外植体,在MS培养基上附加1.5 mg/L 2,4-D,进行25 d的胚性愈伤组织诱导培养后,取胚性愈伤组织在添加30,60,90,100,110,120,130,140和150 g/L蔗糖及1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基进行继代培养,每30 d继代1次,观察胚性愈伤组织的褐变情况及胚性分化能力,并用电子天平在超净工作台中记录胚性愈伤组织质量的变化。继代培养60 d后,将保存的胚性愈伤组织和体细胞胚移至含1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,待出现体细胞胚后移至MS培养基进行萌发,观察再生小植株的生长情况。【结果】将欧洲温室型黄瓜自交系14-1的子叶节,接种到附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上进行诱导培养后,子叶节一端的愈伤组织集中聚集于下胚轴处,之后有黄色胚性愈伤组织产生。在继代培养过程中,当培养基中添加的蔗糖为60～150 g/L时,胚性愈伤组织能保持胚性愈伤状态达60 d。之后将继代培养60 d后的胚性愈伤组织转接至附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,在蔗糖质量浓度为60 g/L条件下保存的胚性愈伤组织可诱导出正常胚状体,且能形成健康小植株。【结论】由黄瓜子叶节诱导出的胚性愈伤组织可在MS+60 g/L蔗糖的培养基上保存达60 d,之后能正常萌发形成胚状体,进而形成正常小植株。
关键词：
黄瓜 遗传转化 胚性愈伤组织 离体保存
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
唐东芹 钱虹妹 黄丹枫 唐克轩
为建立稳定高效的胚性愈伤组织基因转化受体系统,以麝香百合Liliumlongiflorum花丝为外植体进行了愈伤组织诱导、植株再生研究以及抗生素敏感性试验。结果表明:愈伤组织诱导增殖培养基为MS+NAA1 0mg·L-1+BA0 5mg·L-1,分化培养基为MS+KT1 0mg·L-1+NAA0 2mg·L-1。抗生素敏感性试验表明,百合基因转化胚性愈伤组织的卡那霉素选择压为75mg·L-1,潮霉素的选择压为20mg·L-1,头孢霉素选择压为250mg·L-1。表4参10
关键词：
组织培养 麝香百合 胚性愈伤组织 抗生素
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
何少海 姚盛存 丰宇凯 汪轲 李飞飞
为建立以草丁膦为选择标记的农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的水稻Oryza sativa胚性愈伤组织转化体系,通过农杆菌介导法将bar基因导入了‘日本晴’Oryza sativa‘Nipponbare’‘秀水134’‘Xiushui 134’和‘中花11’‘Zhonghua 11’等3个水稻品种的胚性愈伤组织。在分别以选择压15.0,10.0和10.0 mg·L(-1)的草丁膦质量浓度进行了3次选择后,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)
[期刊] 林业科学研究
[作者]
裘珍飞 曾炳山 李湘阳 刘英
The embryogenic callus induction and shoot regeneration were studied systematically in elite clone GL9 of Eucalyptus cultivated widely in south China.We investigated TDZ 0.02-0.05 mg·L-1 was the proper concentration.The callus induction rate was 92.9%—100%.When TDZ concentration was higher than 0.1 ...
关键词：
TDZ 巨尾桉GL9 愈伤诱导率 再生率
[期刊] 林业科学
[作者]
唐巍 欧阳藩 郭仲琛
火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究唐巍欧阳藩（中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京１０００８０）郭仲琛（中国科学院植物研究所北京１０００９３关键词火炬松，体细胞胚胎发生，植株再生本文于１９９６年１０月２８日收到。国家“８６３”资...
关键词：
火炬松,体细胞胚胎发生,植株再生
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李新国 王艳 何利刚 王会良 牛王翠 孙中海
研究了不同Ca2+浓度和Ca2+信号系统抑制剂对低温下柑橘愈伤组织中3种主要渗透调节物质的影响。结果表明,外源5 mmol/L Ca2+能明显地增加柑橘愈伤组织可溶性蛋白质、可溶性糖和脯氨酸含量。采用Ca2+螯合剂EGTA或钙调素拮抗剂TFP对柑橘愈伤组织低温处理12 d后,柑橘愈伤组织中可溶性蛋白质、可溶性糖和脯氨酸含量降低。以上结果说明Ca2+信号系统参与了调节柑橘抗寒过程中渗透物质的合成。
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
荆茹月 霍坤 李志辉
【目的】通过组织细胞学观察、扫描电镜观察、生理生化指标测定三种方法为香樟胚性和非胚性愈伤组织的区分提供了可靠的判断依据,建立起愈伤组织的胚性发生能力与生化代谢间的关系,以此为基础可以提高香樟体胚诱导率、优化体胚发生体系。【方法】以长沙7月初采摘的香樟Cinnamomum camphora L.的未成熟合子胚为材料,诱导出四种不同类型的愈伤组织,对其进行组织细胞学观察以及生理生化测定。【结果】研究结果表明:胚性愈伤组织多为白色,表面散布淡黄色颗粒,细胞壁厚质浓、细胞体积较小,排列紧密,在电镜下表面细胞成团分布,大小近似,细胞核大核仁明显,细胞器丰富。而非胚性愈伤组织多为灰色、白色或深黄色,细胞壁薄,内含物少,空泡化明显,细胞多数衰老、破碎,在电镜下非胚性愈伤表面细胞不饱满大部分死亡破裂,且表面存在附着物,内部几乎没有细胞器。且胚性愈伤组织的适应性、抗逆性强于非胚性愈伤组织。对于胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织发生的位置来说,非胚性愈伤组织先发生在两片子叶的中间向外部扩增。胚性愈伤组织的发生位置有三种:一种是发生在胚根端,第二种发生在已形成的愈伤组织的外侧,第三种褐化的愈伤组织边缘。【结论】四类愈伤组织中有三类为非胚性愈伤组织,一类为胚性愈伤组织。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
蔡英卿 赖钟雄 陈义挺 林玉玲 李惠华 张妙霞
分离克隆了龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织Leafy Cotyledon 1(LEC1)基因,并分析该基因在龙眼体细胞胚胎(简称体胚)发生过程中的表达情况.采用RT-PCR结合RACE法及TAIL-PCR法,获得龙眼胚性愈伤组织LEC1基因的cDNA全长序列,运用生物信息学方法对该序列进行分析,并通过实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)研究该基因在龙眼体胚发生过程中的表达.克隆得到LEC1基因803 bp的cDNA全长序列(GenBank检索号为GU584089.2),该cDNA的开放阅读框推定的氨基酸序列(含222个氨基酸)与其他植物LEC1具有较高同源性...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
文峰 肖诗鑫 聂扬眉 马秋香 张鹏 郭文武
【目的】建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础。【方法】酶解木薯品种TMS60444的脆性胚性愈伤组织(FEC)的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90%。用TM2G培养基以液体浅层法分别在5×105个/mL和2×105个/mL密度下培养,培养过程中前30 d用0.3 mol.L-1TM2G新鲜培养基每10 d更换1次,此后每10 d用0.25 mol.L-1TM2G新鲜培养基更换。原生质体培养45 d后即可挑出1—2 mm大小的愈伤组织分别在MSN培养基上分化胚、CMM上促胚成熟、CEM上茎伸长、MS上生根。【结...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王子成 邓秀新
由于多种原因 ,柑橘的育种工作落后于生产。基因转移技术为柑橘育种提供了一种新的途径 ,有望能改变这一局面。笔者从柑橘再生体系的建立、遗传转化方法、重要价值基因的转化以及外源基因在转基因植株中的稳定性等方面进行了评述 ,并分析了柑橘转基因中所遇到的问题 ,对今后的研究方向和研究重点进行了讨论
关键词：
柑橘 遗传转化 基因 再生
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