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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李林梅   刘柠   马长义   胡椿   李珊珊   沈慧   高南  
[目的] 旨在明确枯草芽孢杆菌发酵液组分对番茄幼苗生长的影响,针对有效代谢产物进行发酵条件优化,为制备高效微生物肥料提供技术支持。[方法] 以枯草芽孢杆菌枯草亚种(Bacillus subtilis subsp. subtilis)NRCB002为供试菌株,通过温室盆栽试验,明确NRCB002发酵液组分对番茄幼苗生长和根系形态的影响;以NRCB002菌株生长量及代谢产物乙偶姻产量为评价指标,通过单因素优化法确定碳源和氮源的种类、浓度、发酵温度和发酵时间,通过正交试验设计和极差分析优化无机盐成分。[结果] 与去离子水和发酵培养基对照相比,重悬菌液、发酵液上清、发酵液及含乙偶姻的重悬菌液均显著提高了株高、茎粗、叶面积、根冠比、总根长、总根表面积、总根体积、侧根数、地上部和根部的干重;其中,发酵液上清及含乙偶姻的重悬菌液处理的番茄幼苗地上部干重显著高于重悬菌液处理幼苗地上部干重;发酵液上清、发酵液及含乙偶姻的重悬菌液处理的番茄幼苗根部干重显著高于重悬菌液处理幼苗根部干重。NRCB002菌株以80g ·L~(–1)蔗糖为碳源、以25 g·L~(–1)酵母浸粉为氮源时NRCB002的生物量和乙偶姻产量均较高;最优无机盐组合为:KH_(2)PO_(4 )1.5 g·L~(–1)、MgSO_(4)·7H_(2)O 1.0 g·L~(–1)和MnSO_(4)·H_(2)O 0.2 g·L~(–1);优选的发酵温度为37 ℃,发酵时间96 h。使用优化后的发酵条件,用1 L摇瓶进行发酵,NRCB002生物量(OD_(600))为15.70,乙偶姻产量为29.65 g·L~(–1),分别是初始发酵培养基的3.4倍和11.8倍。[结论] 菌株NRCB002发酵液对番茄的生长具有良好的促生作用,乙偶姻是其发酵液中关键的促生物质;优化后的发酵培养基为:蔗糖80 g·L~(–1)、酵母浸粉为25 g·L~(–1)、KH_(2)PO_(4) 1.5 g·L~(–1)、MgSO_(4) 1.0 g·L~(–1)和MnSO_(4)·H_(2)O 0.2 g·L~(–1);发酵温度37 ℃,发酵时间96 h。可为制备功能稳定的芽孢杆菌类微生物肥料提供一定的借鉴。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 郑双凤  谭武贵  丰来  罗志威  徐滔明  张冬雪  谭石勇  
[目的]优化枯草芽孢杆菌NTGB-178发酵工艺,为提高发酵液中的生物量与芽孢产量,降低该菌产品制剂生产成本提供技术支撑。[方法]采用响应面法(RSM)对NTGB-178发酵工艺进行优化。在单因素试验基础上,利用Plackett-Burman设计试验,筛选出影响NTGB-178芽孢产量的主要影响因子。利用最陡爬坡试验,确定逼近存在最大响应值的中心点。最后利用Design-Expert软件设计Box-Behnken试验,对其结果进行多元二次回归拟合,建立响应面方程,绘制响应面图,并对影响发酵产孢的主要因素及
[期刊] 西南农业学报  [作者] 彭化贤  席亚东  刘波微  朱建义  
通过单因素试验和正交试验,对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Xi-55的液体发酵培养基和工艺条件进行了优化,确定了在500 mL锥形瓶中发酵培养基的最佳培养基为:蛋白胨3%,甘油1.0%,K2HPO40.05%,MgSO4.7H2O 0.15%;最适发酵条件为:时间36~48 h,温度28~30℃,初始pH为7,接种量2%,装液量100 mL/500 mL锥形瓶。20 L发酵罐扩大培养的初始pH为7.2,发酵温度28℃±0.5℃,通气量10 L/min,搅拌转速180 r/min,罐压0.05~0.06 MPa,发酵终止在44 h前,最佳放罐时间为40~44 h,此时发酵液中...
[期刊] 华北农学报  [作者] 赵达  刘伟成  裘季燕  刘霆  傅俊范  
利用单因素筛选和均匀设计试验对拮抗性枯草芽孢杆菌B03发酵生产活菌体的液体培养基和发酵条件进行了研究,优化出了以经济、易得的玉米粉和豆饼粉为碳、氮源的最佳摇瓶发酵培养基,其配方为:玉米粉3.0%,豆饼粉6.0%,K2HPO4.3H2O 0.3%;最佳发酵条件为:种龄21~24 h,接种量5%,500 mL三角瓶装液量50 mL,初始pH值6.0,发酵温度35℃,摇床转速180 r/min,发酵周期60~66 h。利用优化后的培养基和发酵条件进行验证试验,获得了104.24×108~105.75×108cfu/mL的活菌体产量,较原始基础发酵培养基在常规培养条件下的菌体产量提高了96%以上。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 章四平  刘圣明  王建新  周明国  
通过单因子试验筛选到了适合枯草芽孢杆菌NJ-18生防菌株生长及其拮抗物质产生的最佳碳源为玉米粉和麦芽糖,最佳氮源为豆粕,最佳金属离子是Ca2+。用正交试验法确定了该培养基各组分的最佳含量为:玉米粉10g.L-1、麦芽糖30g.L-1、豆粕30g.L-1、CaCO31.5g.L-1;在确定适合该菌株的培养基组分基础上,对其培养条件进行优化试验,结果表明:初始pH为6.8、培养温度为28℃、250mL摇瓶装液量为90mL、接种量为2%(体积分数)、培养时间为36h、转速为180r.min-1时为该菌株的最佳培养条件。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 张蕾  黎继烈  蒋丽娟  
通过单因素试验、Plackett-Burrman设计及响应面法对芽孢杆菌T3—4的产脂肪酶条件进行优化。确定最适C、N源分别为麦芽糖、蛋白胨+硫酸铵,碳氮比为1∶3。其最适产酶条件为:七水硫酸镁0.05%,蓖麻油1.5%,蛋白胨0.75%,磷酸氢二钾0.1%,麦芽糖0.5%,硫酸铵0.3%,pH值6.5,接种量10%。在此条件下,发酵脂肪酶活力可达805.836 U/mL。
[期刊] 草业科学  [作者] 梁玉婷   石海春   张海英   李惠霞   高有军   刘永刚  
萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)ZY1825是从荒漠沙土中分离得到的一株细菌菌株,具有良好的生防潜能。本文通过平板对峙法,测定其对箭筈豌豆炭疽病菌、黑麦草叶斑病菌、苜蓿春季黑茎病菌、青稞镰孢根腐病菌、紫花苜蓿根腐病菌的拮抗效果,并对其进行生理生化特征测定和发酵条件优化。结果表明,该菌对这5种牧草病菌抑菌率分别为49.29%、47.21%、50.78%、44.28%和45.99%;该菌株为革兰氏阳性菌,最优发酵培养基为马铃薯200 g,蔗糖15 g、酵母浸粉12 g、硫酸镁5 g、蒸馏水1000mL;32 ℃、210 r/min液体培养24 h时活菌数达到最大,为9.28×109cfu/mL,相比优化前提高了5.91倍,对尖孢镰孢菌的抑菌率提高了33.45%。本研究可为进一步利用萎缩芽孢杆菌ZY1825制备生防菌剂防治牧草病害提供技术参数和理论依据。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 方传记  陆兆新  孙力军  别小妹  吕凤霞  黄现青  
【目的】提高淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)发酵产脂肽类抗菌物质的产量。【方法】采用Plackett-Burman Design对影响B.amyloliquefaciens ES-2-4产脂肽类抗菌物质产量的13个因子进行筛选,在筛选结果的基础上,再运用Uniform Design(均匀设计)对关键因子的最佳水平范围进行研究,通过回归方程求解得到最高产量时各关键因子的最优组合。【结果】影响抗菌物质产量的关键因子为葡萄糖、L-谷氨酸钠、转速和温度;获得最佳产量时关键因子的最优组合为:葡萄糖(42g·L-1)、L-谷氨酸钠(14g·L-1)、温度(27℃)、...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 林崇宝  杨雯馨  何铁光  何永群  张野  胡钧铭  韦彩会  李婷婷  俞月凤  李忠义  唐红琴  王瑾  
为筛选液化淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)YM3的发酵配方,初期以摇瓶进行培养,确定最适配方并以此配方进行培养条件筛选。结果表明最适配方为糖蜜0.5%、乳糖1%、大豆分离蛋白2%,以此配方进行培养条件研究,接种24 h内菌量显著提升1000倍,24~8 h菌量显着提升10倍,此后培养菌量无显着差异。其他培养条件如不同温度、p H之间菌量则无显着性差异。用10 L发酵槽测试,显示以糖蜜0.5%、乳糖1%、大豆分离蛋白2%作为培养基,转速200至300 r/min、温度30℃、p H无调整,培养5 d,可得到菌量4×109CFU/m L以上之发酵液。利用1 t大...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 乔俊卿  刘邮洲  张荣胜  刘永锋  
[目的]枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)T-500是1株对水稻纹枯病和稻瘟病均有良好防治效果的生防菌,通过优化其摇瓶发酵工艺,从而提高发酵液中脂肽类抗生素的含量,为T-500菌株生防制剂的开发提供技术支撑。[方法]以水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)为指示菌,利用酸沉淀法提取T-500菌株发酵液中的脂肽类抗生素,并进行脂肽抗生素粗提液的抑菌效果分析,筛选影响抑菌效果的发酵培养基主成分;随后通过Plackett-Burman试验设计、中心组合试验设计和响应曲面法,优化T-500菌株高产脂肽类抗生素的发酵培养基成分和发酵条件。[结果]T-500菌株高产脂肽类抗生素的最佳培养基为:黄豆饼粉7.00 g·L~(-1),蛋白胨4.92 g·L~(-1),酵母粉1.90 g·L~(-1),小麦粉5.00 g·L~(-1),玉米糊5.00 g·L~(-1),NaCl 1.00 g·L~(-1),MgSO_40.20 g·L~(-1),MnSO_45.0 mg·L~(-1),FeSO_40.5 mg·L~(-1)。最佳发酵培养条件为:装液量500 mL三角瓶装105 mL,接种量0.87%,发酵时间41.35 h,温度28℃,转速180 r·min~(-1)。利用最佳摇瓶发酵工艺,T-500菌株所产生的脂肽类抗生素对纹枯病菌的抑菌带最宽,达(11.23±0.15)mm,菌含量达(7.41±1.18)×109CFU·mL~(-1)。经摇瓶发酵试验和抑菌活性验证,理论预测值与实际值无显著差异。质谱和色谱检测表明:优化发酵工艺后产生的Surfactin含量较基础培养基提高了48.2%,Iturin含量较基础培养基提高了180.9%;优化发酵工艺后检测到了Fengycin的产生,但优化前未发现Fengycin的产生。[结论]利用响应曲面法成功优化了枯草芽胞杆菌T-500产脂肽类抗生素的摇瓶发酵工艺;优化后,T-500产脂肽类抗生素产量增加,抑菌活性增强。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 乔俊卿  刘邮洲  张荣胜  刘永锋  
[目的] 枯草芽胞杆菌 (Bacillus subtilis) T-500是1株对水稻纹枯病和稻瘟病均有良好防治效果的生防菌,本研究通过优化其摇瓶发酵工艺,从而提高发酵液中脂肽类抗生素的含量,为T-500菌株生防制剂的开发提供技术支撑。[方法] 本研究以水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)为指示菌,利用酸沉淀法提取T-500菌株发酵液中的脂肽类抗生素,并进行脂肽抗生素粗提液的抑菌效果分析,筛选影响抑菌效果的发酵培养基主成分;随后通过Plackett-Burman试验设计、中心组合试验设计(
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 蔡亚君  彭可凡  戴顺英  高梅影  
从土壤中分离出几株广谱杀鳞翅目昆虫的苏云金芽孢杆菌。其中杀虫效果最好的1株C-33血清型为H5,产生近方形和菱形的伴孢晶体,含有cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1C基因,产生144 kDa和77 kDa的晶体蛋白质。毒力生物测定证明C-33对棉铃虫及甜菜夜蛾有高毒力。对该天然广谱Bt菌株C-33进行了摇瓶发酵和小试发酵试验,结果表明其发酵性能良好。通过2L全自动罐发酵试验,优化了发酵培养基和发酵条件,发酵效价达到3400~3700 IU/μ1(棉铃虫)。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 杨保伟  来航线  盛敏  
 对3株蜡样芽孢杆菌的培养特征、生理生化实验、喂养实验、动物毒性实验、生长特性及其性质进行了研究,并对其SOD液体发酵条件进行了分析。结果表明,3株蜡样芽孢杆菌均为有益菌;pH为7.5时,3株菌在25~30℃发酵60h后酶活均达到最高;在35~45℃发酵24~36h后酶活最高。通过比较发现,02号菌株的SOD活性在整个培养过程中均比较高,且酶活值比较稳定,是生产微生态制剂的理想菌株。
[期刊] 水产学报  [作者] 张皎皎  马富平  李艳红  吴正理  姚维志  
为优化嗜水气单胞菌拮抗菌——甲基营养型芽孢杆菌WM-1的发酵条件,获得抑菌物质产生的最佳培养基配方和培养条件,本实验以嗜水气单胞菌为指示菌,以发酵上清液的抑菌活性为检测指标,采用单因素和正交实验设计,对菌株WM-1的发酵条件进行优化。结果显示,菌株WM-1最适发酵培养基为可溶性淀粉1.0%、牛肉膏1.5%、硫酸镁0.07%、磷酸氢二钾0.05%;最佳发酵条件为初始pH 7.5、培养温度30°C、装液量20%、摇床转速210 r/min、培养时间48 h。在最适培养基和最佳发酵条件下,菌株WM-1发酵液抑菌圈直径达(22.5±0.50)mm,抑菌活性比优化前提高了40.6%。本研究为嗜水气单胞菌的防治提供了新的材料、为甲基营养型芽孢杆菌应用于嗜水气单胞菌的生物防控提供了理论基础。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 纪明山  王毅婧  
探讨地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)SDYT-79菌株液体发酵条件,为提高其活性次级代谢产物的产量提供技术支持。通过单因子试验和正交试验,对该菌株的最适发酵培养基成分及发酵条件进行优化。结果表明:地衣芽孢杆菌SDYT-79菌株培养基各组分的最佳配比为:蔗糖3.0%、蛋白胨0.3%、酵母膏2.0%、氯化钠0.3%,最佳发酵培养条件为:初始pH值9.0、培养温度24℃、培养时间36h、250mL三角瓶装液量120mL、接种量体积分数0.5%~1%。在最佳发酵培养基和培养条件下,SDYT-79菌株抑菌能力提高14.3%。
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