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[期刊] 中国农业科学
[作者]
罗丽丹 陈嘉明 安琪 刘磊 孙勤哲 刘欢 王森山 宋丽雯
【目的】明确高温对截形叶螨（Tetranychus truncatus）海藻糖转运蛋白基因的影响，为有害生物的绿色防控提供理论依据。【方法】根据高温诱导下的截形叶螨转录组数据获取两条海藻糖转运蛋白基因TtTret1-like和TtTret1的CDS序列和蛋白氨基酸序列；利用ExPASy、ProScale、MEGA等分析工具对TtTret1-like和TtTret1进行生物信息学分析；利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术分析TtTret1-like和TtTret1在截形叶螨不同发育阶段及不同高温（38、42、46、50℃）处理下的表达特性；采用微量法测定不同高温处理下截形叶螨的海藻糖含量；利用RNA干扰（RNAi）技术沉默TtTret1-like和TtTret1，探究其在应对高温中的功能。【结果】生物信息学分析表明，TtTret1-like和TtTret1的CDS全长分别为1 389和1 569 bp，分别编码463和523个氨基酸，预测的蛋白分子量分别为50 189.03和57 358.10 Da，等电点分别为8.87、8.70。TtTret1-like和TtTret1均为碱性氨基酸和疏水性氨基酸且同属于不稳定蛋白；二级结构预测为螺旋和卷曲结构；两个海藻糖转运蛋白均具有协同转运蛋白超家族（major facilitator superfamily,MFS）的保守结构域及12个跨膜结构域。氨基酸序列相似性和系统发育分析表明，TtTret1-like和TtTret1与蛛形纲其他物种海藻糖转运蛋白序列的一致性较高，尤其与二斑叶螨（T. urticae）的亲缘关系最近。TtTret1-like在卵期、幼螨期和成螨期的表达量较高；TtTret1在幼螨期高表达。随处理温度的升高，TtTret1-like的表达量大致呈上升趋势，在50℃时表达量最高；而TtTret1的表达量随处理温度的升高先上升后下降，在42℃时表达量达到最高；高温胁迫后截形叶螨体内的海藻糖含量显著升高。沉默TtTret1-like和TtTret1 48 h后，截形叶螨体内整体海藻糖含量上升，但血淋巴海藻糖含量下降；用50℃高温处理截形叶螨2 h，然后恢复至96 h时，截形叶螨存活率分别为11%和46.67%，显著低于对照组。【结论】截形叶螨TtTret1-like和TtTret1在其抵御高温胁迫过程中具有重要的作用。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
姜姗 李帅 张彬 李洪刚 万方浩 郑长英
【目的】西花蓟马（Ｆｒａｎｋｌｉｎｉｅｌｌａ ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ）是中国的重要外来入侵和检疫性害虫，对各地的蔬菜和花卉造成了巨大的经济损失。明确极端高温（４５℃）对西花蓟马存活率、繁殖力以及体内海藻糖、山梨醇含量的影响，为西花蓟马的防治提供理论依据。【方法】设置４５℃条件下高温热激西花蓟马当代成虫、２龄若虫２ｈ，经过２４ ｈ变温模式２２℃（４ ｈ）－２５℃（８ ｈ）－２８℃（４ ｈ）－２５℃（８ ｈ）培养后再进行一次４５℃２ ｈ的热激处理。研究热激处理后其亲代、Ｆ＿１代和Ｆ＿２代的种群参数（亲代各虫态存活率、雌成虫寿命，Ｆ＿１和Ｆ＿２代种群数量、存活率、性比）以及２龄若虫和成虫体内海藻糖．．．
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李青峰 赵雪妃 陈俊山 赵贺 仝振祥 李宏 谌苗苗 宋策 李喜升 钟亮
海藻糖作为柞蚕体内的血糖，能够与蛋白质形成稳定复合物，越冬期保护机体蛋白质免受损伤，并参与营养储存与代谢过程，对柞蚕滞育-越冬生理进程具有重要意义。测定了柞蚕蛹解除滞育后海藻糖含量、相关酶活力及基因表达量，比较不同保存温度对柞蚕越冬蛹海藻糖含量的影响，旨在通过改变环境条件，增加育种选择压，获得海藻糖含量更高的育种材料。结果表明：“J”材料在低温保存的海藻糖含量高于常规保存，表明“J”的海藻糖受温度变化影响更大，而“D”材料变化不明显，雄蛹海藻糖含量大于雌蛹；海藻糖酶活性在低温保存环境高于常规保存环境，“D”材料在不同保存环境下表现出雄蛹海藻糖酶活力大于雌蛹的规律。“J”材料正好相反，不同保存环境下表现出雌蛹大于雄蛹的规律；ApTreh1A,ApTreh1B和ApTreh2和ApTPS这4种基因表达量测定结果显示，低温保存环境下，只有“D”材料的雄蛹体内ApTreh1A的表达量和雌蛹的ApTreh1B较其他处理有差异，其他基因差异不显著，但“D”相对表达量更高。试验结果证明改变保存温度能够影响海藻糖等物质的含量，达到提高育种选择压的目的，有利于筛选海藻糖含量高的柞蚕材料及亲本组配形式，为柞蚕新品种选育提供技术辅助。
关键词：
柞蚕 海藻糖 酶活力 表达量
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
钟国华 胡美英 林进添 周利娟
闹羊花素 Ⅲ (Rhodojaponin Ⅲ ,简称R Ⅲ )能显著降低 5龄菜青虫血淋巴和肌肉海藻糖含量。R Ⅲ以每虫 1～ 10 μg处理试虫后 6 0h ,血淋巴海藻糖酶活性明显受抑制。R Ⅲ对肌肉海藻糖酶活性的影响依剂量不同而异。处理后 6 0h内 ,10 μg处理时无明显影响 ,3～ 5 μg处理则有可逆性激活作用 ,1μg处理则在 6 0h内保持激活作用
关键词：
闹羊花素-Ⅲ 菜青虫 海藻糖 海藻糖酶
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
陈欣 刘佩锋 刘书禹 徐亮 谌苗苗 陈俊山
为探索柞蚕蛹糖代谢与种茧耐贮性之间的关系，以期为选育适宜的二化一放品种提供理论依据，以1个一化性品种（辽8）和7个二化性品种（大9、凤久、抗大、辽蚕527、辽蚕582、墨玉和青黄1号）的种茧为试验材料，分阶段连续测定并比较分析在低温贮藏期种茧蛹体脂肪体糖原和血淋巴海藻糖含量的变化情况。结果表明：低温贮藏期，糖类含量变化趋势在各化性品种间表现较为一致，血淋巴海藻糖含量呈上升-下降-上升的波动变化，峰值出现时间及水平各化性品种间具有显著性差异，脂肪体糖原的变化状态与之呈现明显的此消彼长；相较于春制种出库期，二化一放制种出库期各化性品种种茧血淋巴海藻糖含量均发生显著下降，一化性品种下降后含量水平显著高于二化性品种，二化性品种间也存在显著性差异；皮尔逊相关系数表明脂肪体糖原和血淋巴海藻糖含量之间呈线性相关关系，一化性品种呈极显著负相关，二化性品种呈显著性负相关，判定系数进一步表明二化性品种间二者相关的密切程度也具有差异，说明海藻糖含量及其在低温贮藏期与糖原含量的相关程度可作为衡量柞蚕种茧耐贮性的指标，以之为参考指标，测试的二化性品种中，大9、凤久、辽蚕527较为耐低温贮藏。
关键词：
海藻糖 耐贮性 二化一放
[期刊] 中国农业科学
[作者]
雷芳 张桂芬 万方浩 马骏
【目的】研究海藻糖及海藻糖酶在B型烟粉虱寄主谱扩张及与温室粉虱的竞争适应过程中的作用。【方法】以番茄饲养的B型烟粉虱与温室粉虱转移取食嗜好(棉花、甘蓝)或非嗜好(玉米)寄主植物后,其体内海藻糖含量及海藻糖酶活性的变化和响应。【结果】改变寄主会使B型烟粉虱和温室粉虱的海藻糖含量降低,其中棉花的作用最为明显,分别比对照减少了33%和25%;将植物种类转换为B型烟粉虱嗜好、温室粉虱亦可利用的寄主棉花或B型烟粉虱嗜好而温室粉虱非嗜好的寄主甘蓝,两种粉虱海藻糖含量的变化基本一致,而在两种粉虱非嗜好寄主玉米上B型烟粉虱(112.6%)较温室粉虱(60.8%)的恢复能力强、稳定性能好。尽管改变寄主对两种粉虱...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
昝林森 张莺莺 耿繁军 田万强
【目的】研究海藻糖(TH)和牛血清白蛋白(BSA)单独或配合使用对牛精液冷冻效果的影响。【方法】向种公牛精液商业稀释液中添加不同浓度的TH(0,0.000 37,0.025和0.05 mol/L)和BSA(0,1,2,3 g/L),TH和BSA的4个添加水平分别两两组合,组成16个处理,以其中二者添加水平均为0作为对照,制作0.25 mL细管冻精,解冻(40℃,10 s)后比较分析精子活率、顶体完整率和质膜完整性3个指标。【结果】单独添加TH、BSA及其互作对牛精液的冷冻效果与对照组相比达到显著水平。与对照组相比,单独添加不同水平的TH或BSA对冻后牛精子活率和质膜完整率均有明显影响(P<0....
[期刊] 水产学报
[作者]
陈文康 张莹莹 卢俊 徐年军 孙雪
为了探讨海藻糖在大型藻类抗逆中的作用及其机制，实验利用生理生化分析、高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)、荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析了外源海藻糖对高温胁迫下大型海藻龙须菜生长、抗逆相关物质和酶活性、植物激素及相关基因表达的影响。结果发现，外源添加10 mmol/L海藻糖使龙须菜的相对生长速率和脯氨酸含量分别升高0.34倍(3 d)和0.30倍(24 h)，叶绿素荧光参数、超氧化物歧化酶和海藻糖-6-磷酸合成酶活性升高，但丙二醛含量和脂氧合酶(LOX)活性降低。同时，海藻糖激活了龙须菜中水杨酸代谢关键酶—异分支酸合成酶的活性及其基因表达，促进了水杨酸的积累(2.05倍)。此外，海藻糖可以使热激蛋白70基因表达稳定升高、lox2基因表达下调(12 h)。可见，外源海藻糖可以通过清除活性氧自由基，降低膜脂过氧化，促进渗透保护物质和抗逆植物激素水杨酸的积累等来促进高温下龙须菜的生长。该研究证明了海藻糖在龙须菜抗高温胁迫中具有重要作用，为龙须菜的抗逆育种工作提供了参考。
关键词：
龙须菜 海藻糖 高温 生理 基因表达
[期刊] 中国水产科学
[作者]
薛勇 薛长湖 李兆杰 刘艺杰 王进勉
从鳙(Aristichthys nobilis)肌肉中提取肌原纤维蛋白,在蛋白溶液中加入10%(W/V)蔗糖、山梨醇混合物(质量比1∶1)或10%(W/V)海藻糖。蛋白溶液在-18℃下冻藏30 d,测定冻藏过程中肌原纤维蛋白盐溶性、Ca2+-ATPase活性、活性巯基含量、总巯基含量、表面疏水性变化和冻藏结束时的SDS-PAGE。测定结果表明,蔗糖、山梨醇混合物和海藻糖都抑制了冻藏过程中肌原纤维蛋白盐溶性、Ca2+-ATPase活性、巯基含量的降低和表面疏水性的升高,延缓了鳙肌原纤维蛋白的冷冻变性。海藻糖比蔗糖、山梨醇混合物有更好的抗冷冻变性效果。[中国水产科学,2006,13(4):637-...
关键词：
海藻糖 冷冻变性 肌原纤维蛋白 鳙
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘晓健 孙亚文 崔淼 马恩波 张建珍
【目的】海藻糖酶（ｔｒｅｈａｌａｓｅ）可专一性地将一分子海藻糖水解成为两分子葡萄糖，在昆虫能量代谢和几丁质合成过程中发挥重要作用，因此，海藻糖酶已成为害虫控制的潜在靶标。本研究以重要农业害虫飞蝗（ｌｏｃｕｓｔａ ｍｉｇｒａｔｏｒｉａ）为材料，探讨海藻糖酶基因的分子特性及生理功能，为飞蝗的有效治理提供理论依据。【方法】通过搜索飞蝗转录组和基因组数据库，获得４个海藻糖酶基因ｃＤＮａ全长序列，运用ｂｌａｓｔ、ｔｍｈｍｍ和ｓｉｇＮａｌＰ等相关软件分析其序列特征；利用ｃｌｕｓｔａｌＷ进行海藻糖酶全长氨基酸序列比对，ｍｅｇａ７构建海藻糖酶的系统进化树；运用ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａＮｓｃｒｉＰｔｉｏＮ－ｑｕａ．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘秀明 黄晨阳 陈强 邬向丽 张金霞
【目的】探索食用菌对高温胁迫后恢复响应差异的机制,为食用菌的高温育种研究提供理论基础。【方法】以肺形侧耳热敏感型菌株CCMSSC 00494和耐热型菌株CCMSSC 00499为材料,通过测定高温胁迫后恢复培养期间菌丝体内海藻糖代谢相关酶活性和基因相对表达量的变化,研究海藻糖代谢途径的应激响应。【结果】高温胁迫后恢复培养期间,两株肺形侧耳菌株海藻糖含量迅速降至对照水平,CCMSSC 00494中海藻糖含量降低速率高于CCMSSC 00499。CCMSSC 00494中海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)活性随着处理时间的延长增加,而CCMSSC 00499中的TPS活性缓慢下降。两菌株中合成海藻糖...
关键词：
肺形侧耳 海藻糖 高温后恢复培养 耐热性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
鄂伟 张启迪 王君玮 曲志娜 赵思俊 邹明
建立癸氧喹酯壳聚糖-海藻酸钠微囊中癸氧喹酯的HPLC含量测定方法。采用破囊液(0.2 mol/L NaHCO3和0.06 mol/L Na3C6H5O7·2H2O,pH=7.8~8.2)对癸氧喹酯壳聚糖-海藻酸钠微囊进行破囊,破囊后用甲醇和三氯甲烷混合溶液(4∶1)超声提取癸氧喹酯。HPLC检测方法采用Agilent ZORBAX 80A Extend-C18色谱柱;以乙腈-0.1%甲酸水溶液(75∶25)为流动相;检测波长为267 nm;流速为1 mL/min。结果表明,所采取的破囊方法破解效率高,微囊破解完全。方法精密度与准确度表明,癸氧喹酯浓度在0.05~10μg/mL的范围内线性关系良...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
闫甜甜 郭新勇 向本春 祝建波
【目的】甜菜是重要的糖料作物,块根中的蔗糖含量是其品质的决定因子。利用基因工程技术将葡萄蔗糖转运蛋白基因(VvSUC11和VvSUC12)导入甜菜块根中,以了解蔗糖转运蛋白是否能提高甜菜的含糖量。【方法】利用葡萄蔗糖转运蛋白基因VvSUC11和VvSUC12构建的根特异性表达植物双价表达载体(pCAMBIA2301-SP1-VvSUC11-SP2-VvSUC12),通过农杆菌介导法转化到甜菜(Beta vulgaris L.)品种KWS-9103中。利用PCR和RT-PCR技术检测目的基因是否整合到甜菜中并表达。将获得的转基因甜菜和对照甜菜生根后移栽大田,对其叶片性状、相关的生理指标、块根重和...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张富新 张媛媛 党亚丽 于月英
探讨了中性蛋白酶在海藻酸钠中的固定化技术,并对影响固定化酶的固定化率和固定化酶活性的 因素进行了研究。结果表明,固定化酶的质量受海藻酸钠浓度、固定化酶量、固定化时间以及CaCl2浓度的影响,其 最佳工艺条件为:海藻酸钠浓度3．0％,固定化酶液量与海藻酸钠体积比1:2,固定化时间2．5 h,CaCl2浓度 3．0％,由此制得的固定化酶的固定化率可达97．5％,固定化酶活性为3 600 U／g,其热稳定性、pH值稳定性均极显 著高于游离酶。
关键词：
海藻酸钠 固定化 中性蛋白酶
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张树山 李青旺 李刚 陈晓宇 胡建宏 韩增胜 王立强
比较了在冷冻保存液中添加不同水平海藻糖、蔗糖和乳糖对猪精液冷冻保护的效果。结果表明,添加3种双糖均能提高精液的冷冻保护效果,其最佳添加水平均为0.035 g/mL,在该添加水平下,海藻糖组的精子活率、活力和精子质膜完整率分别为(46.34±0.52)%,(41.38±0.39)%和(43.51±1.78)%,与蔗糖组差异均不显著(P>0.05),但均显著高于乳糖和对照组(P<0.05);海藻糖组的有线粒体活性精子百分率和精子顶体完整率分别为(44.56±1.16)%,(64.09±0.81)%,显著高于蔗糖、乳糖和对照组(P<0.05),3种双糖均随添加水平升高精子的顶体完整率逐渐升高;海藻糖...
关键词：
猪精液 精液冷冻 海藻糖 蔗糖 乳糖
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