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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王一光 林羽 陈方永 杨小平
为了查明浙江省温州市瑞安大面积杨梅枝条枯死的主要原因,采用组织分离法对枯死的杨梅枝条进行病原分离,获得1种主要真菌分离物HN01。根据分离物的培养性状、孢子大小,结合显微镜检测和分子生物学ITs序列测定,该菌株被鉴定为聚多拟盘多毛孢(Pestalotiopsis sydowiana)。对菌株进行柯赫氏法则验证,证明聚多拟盘多毛孢是导致杨梅枝条枯死的病原菌。筛选4种杀菌剂对该病原菌进行室内毒力测定,结果50%咪鲜胺可湿性粉剂的防效较好,EC50值为1.21mg/L。
关键词：
杨梅 拟盘多毛孢 ITs序列 室内毒力
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王一光 林羽 陈方永 杨小平
为了查明浙江省温州市瑞安大面积杨梅枝条枯死的主要原因,采用组织分离法对枯死的杨梅枝条进行病原分离,获得1种主要真菌分离物HN?01。根据分离物的培养性状、孢子大小,结合显微镜检测和分子生物学ITs序列测定,该菌株被鉴定为聚多拟盘多毛孢(Pestalotiopsis sydowiana)。对菌株进行柯赫氏法则验证,证明聚多拟盘多毛孢是导致杨梅枝条枯死的病原菌。筛选4种杀菌剂对该病原菌进行室内毒力测定,结果 50%咪鲜胺可湿性粉剂的防效较好,EC50值为1.21 mg/L。
关键词：
杨梅 拟盘多毛孢 ITs序列 室内毒力
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
任晓凤 刘苗 周倩 杨华
2021年春季，从湖南省怀化市中方县正清制药青风藤基地和湖南农业大学试验基地分别采集青风藤叶枯病病叶，利用组织分离法获得病原菌，并进行柯赫氏法则验证。借助形态学鉴定和分子系统学分析，明确青风藤叶枯病病原为交链隔孢(Alternaria alternata)。利用菌丝生长速率法对5种药剂(95%苯醚甲环唑、98%咪鲜胺、96%己唑醇、96.5%丙硫菌唑、98%嘧菌酯)进行筛选，结果显示95%苯醚甲环唑抑菌效果最好，EC_(50)为0.043 6 mg/L;98%嘧菌酯抑菌效果最差，EC_(50)值为8.447 3 mg/L。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
任晓凤 刘苗 周倩 杨华
2021年春季，从湖南省怀化市中方县正清制药青风藤基地和湖南农业大学试验基地分别采集青风藤叶枯病病叶，利用组织分离法获得病原菌，并进行柯赫氏法则验证。借助形态学鉴定和分子系统学分析，明确青风藤叶枯病病原为交链隔孢(Alternaria alternata)。利用菌丝生长速率法对5种药剂(95%苯醚甲环唑、98%咪鲜胺、96%己唑醇、96.5%丙硫菌唑、98%嘧菌酯)进行筛选，结果显示95%苯醚甲环唑抑菌效果最好，EC_(50)为0.043 6 mg/L;98%嘧菌酯抑菌效果最差，EC_(50)值为8.447 3 mg/L。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
曾晴 叶思思 谢世莹 陈姿伊 叶百慧 杨国 郭天荣 莫亿伟
从感染褐腐病的嵊州桃形李果实中分离得到1株病原菌TXLHFJ–2，利用内转录间隔区(ITS)、延伸因子(TEF–1α)基因、β–微管蛋白基因序列比对和形态学进行鉴定，发现该菌株为美澳型核果褐腐菌(Monilinia fructicola)，该菌株最适生长温度为22.5℃。在PDA培养基上，加入6种杀菌剂(戊唑醇、甲基硫菌灵、异菌脲、苯醚甲环唑、啶酰菌胺和代森锌)进行室内防效试验，发现5.0 mg/L戊唑醇、5.0 mg/L甲基硫菌灵、5.0 mg/L异菌脲、25.0 mg/L苯醚甲环唑、90.0 mg/L啶酰菌胺、100.0 mg/L代森锌均可完全抑制褐腐菌生长，经杀菌剂处理后，再用健那绿B和线粒体红色荧光探针染色发现，经杀菌剂处理的菌丝的绿色和红色荧光强度均显著低于对照组的；再经碘化丙锭(PI)染色发现，杀菌剂处理后的菌丝的红色荧光强度均比对照组的强，说明6种杀菌剂处理均可使褐腐病病原菌的细胞膜完整性受损，降低线粒体膜电位形成，从而抑制菌落生长。甲基硫菌灵、戊唑醇和苯醚甲环唑对病原菌表现出良好的田间防效，分别为81.63%、80.49%和79.98%，但三者无显著差异，基于农药管理办法，建议使用苯醚甲环唑防控桃形李果实褐腐病。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
周子骞 李敏 高兆银 王义 洪小雨 李春霞 胡美姣
【目的】为了明确番木瓜炭疽病主要病原菌种类及适宜的防治药剂。【方法】从海南采集番木瓜炭疽病病果,采用柯赫氏法则对病原菌进行分离、纯化、致病性测定,根据病原菌的形态特征,结合其rDNA-ITS区域的序列分析对病原菌进行鉴定,并采用生长速率法测定17种杀菌剂对该病原菌生长的抑菌活性。【结果】从分离的炭疽菌中,得到2种强致病菌(代表菌株分别为C1和G1),其中C1菌株与辣椒炭疽菌(Colletotrichum capsici)形态特征相似,G1菌株和胶孢炭疽菌(C.gloeospcrides)形态特征相似。通过采用引物ITS1/ITS4对2个病原菌序列扩增并测序,将2个菌株rDNA-ITS序列与GenBank中相关菌株的ITS序列进行同源性比较,发现C1菌株与辣椒炭疽菌(C.capsici)同源性达到了99%,G1菌株与胶孢炭疽菌(C.gloeospcrides)的同源性同样达到99%。【结论】500 mg/mL咪鲜胺水分散粒剂对2菌株的抑菌效果最好,平均EC_(50)值仅为0.03μg/mL,其次为300 mg/mL咯菌腈悬浮剂和250 mg/mL丙环唑乳油,平均EC_(50)值分别为0.04和0.11μg/mL,确定番木瓜炭疽病主要由辣椒炭疽菌(C.capsici)和胶孢炭疽菌(C.gloeospcrides)引起,500 mg/mL咪鲜胺水分散粒剂、300 mg/mL咯菌腈悬浮剂和250 mg/mL丙环唑乳油对番木瓜炭疽菌抑菌效果好。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
曾晴 叶思思 谢世莹 陈姿伊 叶百慧 杨国 郭天荣 莫亿伟
从感染褐腐病的嵊州桃形李果实中分离得到1株病原菌TXLHFJ–2，利用内转录间隔区(ITS)、延伸因子(TEF–1α)基因、β–微管蛋白基因序列比对和形态学进行鉴定，发现该菌株为美澳型核果褐腐菌(Monilinia fructicola)，该菌株最适生长温度为22.5℃。在PDA培养基上，加入6种杀菌剂(戊唑醇、甲基硫菌灵、异菌脲、苯醚甲环唑、啶酰菌胺和代森锌)进行室内防效试验，发现5.0 mg/L戊唑醇、5.0 mg/L甲基硫菌灵、5.0 mg/L异菌脲、25.0 mg/L苯醚甲环唑、90.0 mg/L啶酰菌胺、100.0 mg/L代森锌均可完全抑制褐腐菌生长，经杀菌剂处理后，再用健那绿B和线粒体红色荧光探针染色发现，经杀菌剂处理的菌丝的绿色和红色荧光强度均显著低于对照组的；再经碘化丙锭(PI)染色发现，杀菌剂处理后的菌丝的红色荧光强度均比对照组的强，说明6种杀菌剂处理均可使褐腐病病原菌的细胞膜完整性受损，降低线粒体膜电位形成，从而抑制菌落生长。甲基硫菌灵、戊唑醇和苯醚甲环唑对病原菌表现出良好的田间防效，分别为81.63%、80.49%和79.98%，但三者无显著差异，基于农药管理办法，建议使用苯醚甲环唑防控桃形李果实褐腐病。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
宁平 黄艳花 黄微 邢政杰 陈婵 王小欣
【目的】明确喜树叶斑病病原菌，并探究不同杀菌剂对病原菌的室内抑菌活性，为防治大田喜树叶斑病提供科学依据。【方法】通过常规组织块分离法分离喜树叶斑病病原菌并进行致病性测定，结合形态特征观察及rDNA-ITS序列分析鉴定病原菌的分类地位；采用菌丝生长速率法测定12种常见杀菌剂对病原菌的室内毒力。【结果】从广西农业职业技术大学中草药园的喜树叶斑病上分离到一株真菌，菌株命名为XS-1，经致病性测定、形态学观察和分子鉴定，确定多主棒孢霉（Corynespora cassiicola）是引起喜树叶斑病的病原菌，为国内首次报道，将该病害命名为喜树棒孢霉叶斑病。杀菌剂室内毒力测定结果表明，12种杀菌剂对菌株XS-1菌丝生长均有较强的抑制作用，其中，20%苯甲咪鲜胺微乳剂的抑制作用最强，其EC_(50)为0.0980 mg/L，其次是20%戊菌唑水乳剂、50%多菌灵可湿性粉剂、20%抑霉唑水乳剂、250 g/L丙环唑乳油和10%苯醚甲环唑水分散粒剂，其EC_(50)分别为0.3737、0.4557、0.4878、0.5746和0.5956 mg/L。【结论】经致病性测定、形态特征观察及分子鉴定，确定引起喜树叶斑病病原菌为多主棒孢霉（C. cassiicola）；20%苯甲·咪鲜胺微乳剂、20%戊菌唑水乳剂、50%多菌灵可湿性粉剂、20%抑霉唑水乳剂、250 g/L丙环唑乳油和10%苯醚甲环唑水分散粒剂对喜树棒孢霉菌丝生长均具有较强的抑制作用，可作为喜树棒孢霉叶斑病田间防治参考用药。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王小慧 朱震 马雪莲 卢颖林 李奇伟 冉炜 沈其荣
采用室内分离和盆栽致病性试验相结合的方法,分别从田间大棚西瓜枯萎病病株的根部、茎部和叶片分离纯化获得34株疑似病原菌的菌株,并从中挑选出6株形态差异明显的菌株用于盆栽回接试验。结果表明:菌株LD和LB回接7 d后植株开始出现轻微萎焉症状,到第14天时发病率分别达到100%和72%,病情指数分别为2.00和1.14;菌株LA、LC和XB在回接30 d后西瓜植株发病率和病情指数均为14%和0.29;而菌株XA在回接30 d后植株未出现发病症状。对西瓜植株的生物量统计表明,在接种病原菌30 d后,接种菌株XA和XB的处理植株的株高和地上部干质量与对照差异不显著。接种菌株LA和LC的处理西瓜植株的株高...
[期刊] 林业科学
[作者]
刘艾涛 叶碧欢 陈友吾 宋其岩 李海波 沈建军 张昕
【目的】探明香榧藻斑病的病原种类及其生物学特性，筛选对香榧藻斑病具有良好防治效果的药剂，为香榧藻斑病防治提供科学依据。【方法】在浙江省香榧主产区采集藻斑病病叶，结合传统形态学方法与分子生物学手段对从病叶中分离获得的香榧绿藻进行鉴定，明确病原藻的生物学特性，通过室内毒力测定和林间防治试验筛选防治香榧藻斑病的优良药剂。【结果】1）从香榧藻斑病病叶中分离获得3种病原绿藻类群，结合藻株形态学特点以及SSU-ITS区间序列分析，3种绿藻类群分别被鉴定为链带藻、软克里藻和Tritostichococcus corticulus，均为香榧病原新记录种。3种香榧绿藻的培养条件相似，均适宜在初始pH 11、温度25℃、光照/黑暗为12 h/12 h光周期下的BG-11培养基中生长。2）以混合藻为靶标进行室内毒力测定试验显示，12%松脂酸铜悬浮剂灭藻效果最好，EC_(50)可达8.33 mg·L~(-1)，显著低于其他药剂（P<0.05），其后依次为33.5%喹啉铜悬浮剂、80%波尔多液、20%噻菌铜悬浮剂和45%石硫合剂。林间防治试验表明，施药30天后，12%松脂酸铜和33.5%喹啉铜悬浮剂的防治效果分别达78.11%和71.62%。【结论】从浙江省香榧上新发现3种病原绿藻类群，藻群生物学特性类似。室内毒力测定和林间防治试验表明，12%松脂酸铜和33.5%喹啉铜悬浮剂对香榧藻斑病有较好防治效果。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
潘汝浩 王继琛 王磊 凌宁 张楠 沈其荣 黄启为
从山东平度连作的生姜枯萎病病株中分离得到1株菌株,通过形态学鉴定、rDNA-ITS区序列分析和回接试验确认该菌株为生姜枯萎病病原菌。采用盆栽试验,在健康土壤中接种不同浓度的病原菌孢子悬液研究不同接种浓度对生姜枯萎病发生程度的影响。结果表明:每克土病原菌孢子数量103是导致生姜植株发病的临界浓度,当每克土接种数量不高于105时,病情指数随接种浓度增加而显著增加;当每克土接种数量高于105时,病情指数不再显著增加;随着每克土中接种的病原菌孢子数量的增加,各处理根际土壤中的尖孢镰刀菌数量也增加,且根际土壤中尖孢镰刀菌数量均显著高于土体土壤,根际土壤中尖孢镰刀菌数量是土体土壤的1.19~1.86倍。结...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
马万里 刘露 汤子萱 刘卓 钟继芝 尹福强 刘铭
[目的 ]鉴定引起万州区香樟叶斑病的病原菌，明确病原菌菌丝生长特性，筛选出有效抑制叶斑病病原菌的杀菌剂，为该病的防治提供理论基础。[方法 ]采用组织分离法分离和纯化病原菌，用柯赫氏法则进行致病性测定，通过形态特征及ITS、tub2、GAPDH、ApMat多基因联合分析鉴定其病原菌种类；用菌丝生长速率法研究其菌丝生长特性，并进行杀菌剂的筛选。[结果 ]分离菌株在PDA培养基上培养3 d呈现灰褐色，边缘灰白色，后期有橘红色孢子堆出现，分生孢子呈长椭圆形、两端钝圆、透明无色、为独立的单胞，测量其孢子大小为(9.8～18.6)μm×(4.2～6.0)μm；用两种方法对优势菌株ZT-1进行致病性检验，均能引起香樟叶片发病；代表菌株ZT-1和ZT-5与胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）聚在一支，支持率达100%；菌落的最适生长温度为28℃，最适pH值为6.0，马铃薯葡萄糖琼脂培养基利于菌丝生长，最适碳源和氮源分别为葡萄糖、甘氨酸，最适的光照条件是全黑暗；在化学和生物杀菌剂中，15%三唑酮可湿性粉剂、1%蛇床子素水乳剂的室内毒力较强，对C. gloeosporioides的抑制效果明显，其EC50值均小于10μg·mL~(-1)。[结论 ]C. gloeosporioides是万州区香樟炭疽病的病原菌，15%三唑酮可湿性粉剂可作为防治的杀菌剂。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李琬玥 刘正坪 何祥凤 王文和
百合枯萎病是危害百合生长的重要病害。从３种不同杂种系的４个百合品种（亚洲百合Ａｖｅｌｉｎｏ，东方百合ｌｉｍｐｏｐｏ和ＴｏｐｓＴＡｎ，ｏＴ系列百合ＢｏｎＢｉｎｉ）的病变鳞茎中分离纯化真菌，经柯赫氏法则证病后，对分离菌进行形态学及分子生物学双重鉴定，在４种不同品种的百合病变鳞茎中鉴定出尖孢镰刀菌（ＦｕｓＡｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）、三线镰刀菌（Ｆ．ＴｒｉｃｉｎｃＴｕｍ）、串珠镰刀菌（Ｆ．ｍｏｎｉｌｉＦｏｒｍｅ）和链格孢菌（ＡｌＴｅｒｎＡｒｉＡ ＡｌＴｅｒｎＡＴＡ）４种真菌均为病原菌。对亚洲百合ｒｅｄ ｙｕｎｊｉｎｇ和东方百合ｊｕｍｐｙ做致病性试验，结果表明：４种病原菌的致病程度强弱依次是尖孢镰．．．
关键词：
百合 枯萎病 病原菌 致病性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
崔萍 安慧 张楠 李芳慧
应用组织分离法从发病番茄根部分离番茄枯萎病病原菌并进行致病性测定,根据菌体形态特征、ITS序列同源性分析将病原菌鉴定为镰刀菌属尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。探讨了发病及健康番茄根际栽培基质、大田土及山地贫瘠土壤的微生物数量,采用平板对峙培养法初筛得到77个对番茄枯萎病病原菌有拮抗作用的分离物,进一步复筛得到24个拮抗性能较为稳定的分离物,其中来自山地土的真菌A6、A29、A9、A31、A44、A28拮抗作用较强。山地贫瘠土壤尽管微生物总量较少,但是分离获得的拮抗菌数量最多。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
岑贞陆 欧阳秋飞 谢玲 陈保善 朱方容 林强 覃丽萍 蒙姣荣 史国英 张雯龙
近年在广西的桑园中发现一种新细菌病害—桑树细菌性枯萎病,从病桑根部和茎部组织经组织分离法获得3个细菌菌株,选择1个典型菌株GXE001进行接种桑树,接种后发病症状与自然发病症状一致,并从接种病株上又重新分离到了此病原细菌,柯赫法则证明GXE001菌株为该病的致病菌。通过形态学观察、常规生理生化指标测定、16S rDNA序列测定和同源性分析,鉴定GXE001菌株为Enterobacter cloacae。
关键词：
桑树 细菌性枯萎病 分离 鉴定
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