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[期刊] 林业科学
[作者]
张德强 赵树堂 卢孟柱 田林
Na+/H+反向运输蛋白基因(NHX)是在细菌、植物和动物体内普遍存在的一类膜蛋白基因家族。迄今已在模式植物拟南芥中分离出AtNHX1、AtNHX2、AtNHX3、AtNHX4、AtNHX5和AtNHX6共6个成员,并发现部分成员对盐胁迫有不同程度的响应。以AtNHX1和AtNHX6的cDNA核苷酸序列为信息探针,基于可利用的杨树EST数据库和毛果杨全基因组测序结果,通过电子杂交辅助的克隆技术,从毛白杨形成层cDNA中分离得到长度分别为1635bp和1709bp的2个cDNA,其分别含有编码544个和526个氨基酸残基的完整开放阅读框。由它们所推导的蛋白质序列与拟南芥、水稻、小麦和玉米的NHX...
[期刊] 林业科学
[作者]
边晨凯 龙定沛 刘雪琴 魏从进 龚加红 赵爱春
【目的】研究川桑液泡膜型Ｎａ＋／Ｈ＋逆向转运蛋白（ＮＨＸ）基因的功能，探究桑树耐盐机制，为植物抗逆基因工程筛选提供优良的候选基因。【方法】以川桑基因组数据库为基础，基于同源基因序列的保守性，以川桑叶片ｃＤＮａ为模板克隆川桑液泡膜型ＮＨＸ基因；利用生物学软件和在线公共平台，分析所得基因编码的蛋白质序列及功能结构域，并构建系统进化树，分析与其他物种的亲缘关系。采用荧光定量ＰｃＲ方法研究在Ｎａｃｌ胁迫条件下不同时间段‘湖桑３２号’根、茎、叶等不同组织中桑树ＮＨＸ１表达量的变化情况；通过构建超量表达载体，将其转化到拟南芥中，分析转基因拟南芥在Ｎａ ｃｌ胁迫环境中的种子发芽数，根长、侧根生长情况和幼苗成．．．
[期刊] 林业科学
[作者]
边晨凯 龙定沛 刘雪琴 魏从进 龚加红 赵爱春
【目的】研究川桑液泡膜型Na+/H+逆向转运蛋白(NHX)基因的功能,探究桑树耐盐机制,为植物抗逆基因工程筛选提供优良的候选基因。【方法】以川桑基因组数据库为基础,基于同源基因序列的保守性,以川桑叶片cDNA为模板克隆川桑液泡膜型NHX基因;利用生物学软件和在线公共平台,分析所得基因编码的蛋白质序列及功能结构域,并构建系统进化树,分析与其他物种的亲缘关系。采用荧光定量PCR方法研究在NaCl胁迫条件下不同时间段‘湖桑32号’根、茎、叶等不同组织中桑树NHX1表达量的变化情况;通过构建超量表达载体,将其转化到拟南芥中,分析转基因拟南芥在Na Cl胁迫环境中的种子发芽数,根长、侧根生长情况和幼苗成...
[期刊] 林业科学
[作者]
唐欣 王瑞辉 杨秀艳 朱建峰 刘正祥 倪建伟 张华新
植物液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白具有将胞质中过多的Na+区隔化在液泡内,从而减轻过量Na+对细胞质的伤害,同时维持细胞的渗透势,利于植物抵御盐胁迫。以2年生唐古特白刺嫩叶为试材,采用RT-PCR和RACE方法从叶片中获得1个NHX基因cDNA全长,命名为NtNHX1,GenBank登录号为KF751928。序列分析结果表明:NtNHX1全长2 134 bp,包含281 bp的5’非编码区、218 bp的3’非编码区和29 bp的poly(A)尾巴。该cDNA编码1个544个氨基酸的多肽,等电点为8.14,推测分子质量为59.9 kDa。通过与其他物种的NHX1氨基酸序列比对,NtNHX1基因...
[期刊] 华北农学报
[作者]
党振华 郑琳琳 冯智 王迎春
长叶红砂为内蒙古东阿拉善-西鄂尔多斯地区特有珍稀泌盐,强旱生小灌木,对盐渍荒漠环境具有极强适应性。利用RT-PCR和RACE技术从该植物中分离出质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(RtSOS1),该cDNA全长为3 829bp,开放阅读框为3 438 bp,编码一个含1 145个氨基酸的蛋白质,推测分子量为126.76 kDa。氨基酸序列的生物信息学分析推测,该蛋白N端含有11个跨膜结构域,C端为一个长约700个氨基酸的亲水性尾,具有磷酸化和自我抑制结构域。同源性比对和系统发育分析证实,RtSOS1与其他植物的质膜Na+/H+逆向转运蛋白亲缘关系较近。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
兰涛 段远霖 吴为人 汪斌 周元昌 李生平 刁志娟
根据大米草Na+/H+泵基因已克隆的一段基因组DNA序列的保守区设计引物,利用RACE技术,从大米草中分离并克隆出Na+/H+泵基因的一段cDNA片段,长度为793 bp.该cDNA片段编码区推导出的氨基酸序列在NCB I网站上BLAST,结果显示该氨基酸序列与多种植物的Na+/H+泵的C端氨基酸序列相似.该结果可以推断所克隆的cDNA片段为大米草Na+/H+泵基因的3′端.将该cDNA对应的氨基酸序列与以前克隆的大米草Na+/H+泵基因的一段DNA所对应的氨基酸序列拼接,然后与多种植物的Na+/H+泵进行对位排列.结果显示,该氨基酸序列与芦苇、水稻、小麦、大麦、玉米、拟南芥和滨藜等植物的Na...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王旭达 丰明 张高华 王鹤 李怀梅 李树英
为提高转基因植物的耐盐性,本研究利用农杆菌介导的方法将獐茅液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因AlNHX组成型表达在日本晴粳稻中。PCR鉴定结果表明,AlNHX基因已经整合到日本晴粳稻中,并在转录水平上表达。转AlNHX基因水稻的耐盐性明显提高。用NaCl经5d培养处理后,转基因水稻可以在含有0～200mmol/L NaCl的MS培养基中生长,而野生型水稻无法在含盐量超过150mmol/L NaCl的MS培养基中生长。
[期刊] 华北农学报
[作者]
杨大光 王新卫 王泽霖 周欣
利用RT-PCR技术克隆了10株涵盖不同分离年代和不同毒力的H9N2亚型AIV的NA基因,序列分析表明,10株AIV的NA基因的核苷酸和推导的氨基酸同源性高,进化稳定。系统进化树分析表明,其NA基因都属欧亚大陆禽分支,H9N2流感病毒的分布与地域有相关性。其NA蛋白氨基酸序列潜在的糖基化位点以及氨基酸红细胞吸附位点出现的变化尚不能解释这些毒株生物学特性上的差别。但这些研究结果从理论上丰富了H9N2亚型禽流感的分子流行病学,也为进一步研究该类毒株的进化提供了依据。
关键词：
H9N2AIV NA基因 克隆 序列分析
[期刊] 海洋渔业
[作者]
刁乐 张凤英 宋炜 马春艳 王伟 谌微 马凌波 赵明 乔振国 蒋科技
#N/A
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
张敏 黄利斌 季永华 方炎明
以构树幼苗根组织和叶组织为实验材料,研究了NaCl胁迫对质膜H+-ATPase活性和表达的影响。结果表明:盐胁迫促进了构树幼苗质膜H+-ATPase活性的提高。随着NaCl处理浓度的升高,根中质膜H+-ATPase的活性呈持续上升趋势,而叶片中表现为先升高后降低的趋势。激光共聚焦和Western blot分析结果显示:NaCl胁迫诱导了质膜H+-ATPase的表达,酶蛋白量的增加可能是NaCl胁迫后构树幼苗H+-ATPase活性升高的原因之一。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
钱骅 刘友良
通过检测喹吖咽荧光猝灭和恢复，测定了盐胁迫下不同耐盐性的大麦品种根系液泡膜微囊质子泵活性（ΔＰＨ）和Ｎａ＋／Ｈ＋逆向运输活性。液泡膜Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ在泵运质子中起主导作用；１００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ诱导大麦根系液泡膜Ｎａ＋／Ｈ＋逆向运输活性，且耐盐性强的品种高于耐盐性弱的品种；耐盐性不同的大麦品种Ｋ＋、Ｎａ＋在植物体内区域化分配很大程度上取决于根系液泡膜Ｎａ＋／Ｈ＋逆向运输活性。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
高雪 朱立麒 栗云云 吴海琴 朱怡蕾 庾庆华
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
陈雄伟 马艳萍 徐呈祥 徐锡增
研究了外源多胺及其代谢抑制剂灌根处理对盐胁迫下耐盐性不同的2年生‘冬枣’(耐盐性弱)、‘金丝小枣’(耐盐性强)嫁接苗叶片生长发育、光合作用、叶绿体内离子稳态、类囊体膜H+-ATP酶活性及结合态多胺水平的影响。结果表明:120 mmol.L-1NaCl胁迫30 d,0.75 mmol.L-1的3种外源多胺均可提高两个枣品种(特别是耐盐性弱的冬枣)的单叶重、叶绿素含量和叶片光合速率,Put、Spd效应均显著,Spm效应较小;枣叶叶绿体中不同种类多胺之间存在显著转化关系,Put对枣叶无毒害作用,且是其它多胺发挥效应的基础。应用多胺合成抑制剂DFMO和MGBG以及其降解抑制剂AG的试验结果进一步证实前...
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