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[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
左涛 包海 陈慧 苏衍修 常聚普 郭利民 贺伟 王延伟
无色花色素还原酶基因（Ｌｅｕｃｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ ｒｅｄｕｃｔａｓｅ，Ｌａｒ）是类黄酮生物合成途径中的一个重要基因，为了验证杨树中Ｌａｒ的功能，明确Ｌａｒ基因对抗病物质儿茶素合成的影响，本实验以接种后第６ ｄ的一年生‘中林４６’杨树树干的树皮为材料，利用ｒｔ－Ｐｃｒ技术克隆了Ｌａｒ基因的ｏＦｒ序列，并构建Ｌａｒ的过表达载体Ｐ ｃａＭＢｉａ１３０１－Ｌａｒ。采用农杆菌介导的叶盘法转化烟草，获得了转Ｌａｒ基因的烟草６株。用ｑ ｒｔ－Ｐｃｒ检测转基因烟草的表达量，结果显示，在转基因植株中，Ｌａｒ基因的表达量均显著上调。用高效液相色谱法检测转基因植株中的儿茶素含量，结果显示，６株转Ｌａｒ的烟．．．
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘湘新 林亲录 施兆鹏 许建平 孙志良 谭超
为了发掘儿茶素在医学临床上的应用价值 ,对经不同途径进入小白鼠体内的儿茶素及经同一途径进入 ,但不同种类的儿茶素对高血脂小白鼠血清中各种脂质的影响进行了研究 .结果表明 ,无论是采用灌胃法 ,还是静脉注射法 ,经儿茶素和表儿茶素处理 ,每只小白鼠 1.5mg/d的各试验组均具有明显降低高血脂小白鼠血清TC ,TG ,LDL C ,升高HDL C的效果 ,且儿茶素效果优于表儿茶素 .
关键词：
儿茶素 表儿茶素 血脂 小白鼠
[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨方慧 夏丽飞 蒋会兵 孙云南 田易萍 梁名志 陈林波
【目的】探究YUCCA10基因在正常花和不育花中的表达规律,为深入探索YUCCA10基因和生长素合成对茶树花器官发育的调控机制提供理论基础。【方法】前期研究茶树正常花与不育花转录组差异时,获得一条与YUCCA10基因高度同源的基因序列,利用‘云茶1号’茶树全长转录组数据库以及PCR技术克隆验证茶树YUCCA10基因,并对其生物信息学特征进行分析,同时运用qRT-PCR技术研究其表达特征。【结果】经验证YUCCA10基因含有1个1137 bp的开放阅读框,编码379个氨基酸,分子量为42.63 kDa,等电点为8.88,茶树YUCCA10蛋白具有NADPH结合位点和FAD结合位点,与多种植物YUCCA10蛋白同源。qRT-PCR分析CsYUCCA10在正常花中随着花的生长发育表达量增加,而在不育花的花瓣、雄蕊、雌蕊以及不同发育期中的表达均低于正常花。【结论】茶树CsYUCCA10基因在不育花中不能正常合成,从而影响了花的发育导致不育。
关键词：
茶树 YUCCA10 生长素 不育花
[期刊] 中国农业科学
[作者]
夏涛 高丽萍 刘亚军 王云生 刘莉 赵磊 蒋晓岚 钱玉梅
茶树酯型儿茶素对于茶叶加工产品品质的影响及人类健康的药理功效均高于非酯型儿茶素。酯型儿茶素合成及水解途径及分子调控机理,既是长期困扰茶业界的重点难题,也是富含原花青素(PAs)或缩合单宁(CAs)植物如葡萄、柿子的未解科学问题之一。作者在文中介绍了茶树酯型儿茶素合成及水解途径研究上取得的进展,儿茶素的没食子酰基化过程与水解单宁合成具有相似性;没食子酰基葡糖糖(βG)是它们合成的酰基供体,与葡萄糖基转移酶(UGGT)和没食子酰基转移酶(ECGT)等有关;在茶树中酯型儿茶素很容易被水解酶(GCH)水解为没食子酸和非酯型儿茶素。此外,还综述了国际上有关flavan-3-ols的合成、聚合、糖苷化和甲...
关键词：
茶树 酯型儿茶素 生物合成
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王琼 曹支敏
【目的】克隆川杨几丁质酶基因cDNA全长序列,分析其在病原菌侵染过程中不同时段的表达特征。【方法】以受落叶松-杨栅锈菌(Melampsora larici-populina)单孢子堆菌系Sb052侵染后的川杨叶片为试材,采用RACE法克隆川杨几丁质酶基因cDNA序列,对其进行生物信息学和实时荧光定量表达分析。【结果】克隆到1条川杨几丁质酶基因序列,将其命名为PsChiⅠ(GenBank登录号:KC416180)。该序列全长1 145bp,包含1段960bp的开放阅读框(ORF),38bp的5′非编码区和147bp的3′非编码区。其编码蛋白含有319个氨基酸,具有2条糖苷水解酶19家族特征序列,...
[期刊] 林业科学
[作者]
陈英 邵志龙 王浩然 朱燕宇 朱嵊 黄敏仁
【目的】TIR1/AFB F-box作为生长素受体参与从生长素结合到Aux/IAA蛋白降解这一信号转导过程。通过克隆杨树AFB基因家族成员,并检测其在病原菌、激素和干旱胁迫下的表达模式,以期了解AFB基因在杨树生长发育及激素信号转导中的作用机制。【方法】以美洲黑杨杂种NL-895杨为材料,通过PCR与RACE技术,克隆NL-895杨AFB基因家族成员全长c DNA,进而利用在线分析软件和数据库对各成员编码蛋白质的理化参数、保守结构域、蛋白质三级结构进行分析和预测;根据氨基酸序列多重比对结果进行系统进化分析;采用实时定量PCR技术研究4个NL-895杨AFB基因家族成员在病原菌、激素和干旱胁迫下...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
郑华坤 黄志伟 颜霜飞 郑金贵
采用RACE技术,从茶树新品系"1005"的嫩芽中克隆出ANR基因的全长cDNA(1260 bp),其推导的氨基酸序列与茶树、葡萄花色素还原酶的一致性分别为99%和84%;并成功构建了ANR基因的原核表达载体pET-ANR,在大肠杆菌BL21中表达出预期大小(约45 ku)的融合蛋白.
关键词：
茶树 花色素还原酶 基因克隆 原核表达
[期刊] 华北农学报
[作者]
唐君 代祥 李贵飞 穆兵 王枫 杨亦扬
NPF转运蛋白家族在植物转运硝态氮过程中起重要作用。为明确茶树中NPF基因的序列特征，用PCR扩增的方法在茶树中分别扩增出一个茶树氮转蛋白基因CsNPF5的DNA和cDNA全长，为2 096,1 440 bp。序列分析指出，该基因含有3个外显子和2个内含子，开放阅读框(ORF)为1 440 bp。序列分析结果显示，该基因编码479个氨基酸，相对分子质量约为53.12 ku,等电点为7.13,其编码蛋白的N端含有一个PTR2 Pfam结构域；亚细胞定位分析指出该基因编码蛋白定位于细胞质内；CsNPF5蛋白与中华猕猴桃NPF蛋白具有较高的同源性，相似度为79.54%;聚类分析指出，CsNPF5及其同源蛋白分别聚类成3个进化分支，且与来自中华猕猴桃NPF18同源蛋白聚到同一进化支上。同时qRT-PCR分析结果表明，在0～48 h氮素处理下CsNPF5在叶中的表达存在不同程度的上调表达，且基因上调表达丰度随NO~-_3浓度升高，响应时间更快，且在2 mmol/L NO_3~-处理24 h后，CsNPF5在茶树叶片中表达量出现峰值，这表明该基因表达受氮素诱导。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
曹红利 岳川 郝心愿 王新超 杨亚军
【目的】从茶树中克隆甜菜碱(GB)合成途径中的关键酶——胆碱单加氧酶CsCMO,研究不同逆境胁迫和不同抗寒茶树品种间GB合成中关键基因的表达模式,并分析茶树体内GB的含量,为茶树抗性育种奠定基础。【方法】采用反转录PCR结合RACE技术,从茶树中克隆CsCMO的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析,结合前期克隆得到的茶树甜菜碱醛脱氢酶CsBADH,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析这2个基因的表达模式,紫外分光光度计测定GB含量。【结果】克隆得到茶树CsCMO(GenBank登录号:JX050146)的cDNA全长1 558 bp,包含1 305 bp的完整开放阅读框(ORF...
[期刊] 华北农学报
[作者]
王力 张娜 张秀清 孙君社
自然条件下金丝桃素在植物中的含量较低且不稳定,提取工艺受其他物质的影响较大,在一定程度上限制了金丝桃素在医药、食品等领域的应用。为了研究金丝桃素合成途径并实现其体外转化,以贯叶连翘愈伤组织总RNA为模板,经RT-PCR扩增得到了编码金丝桃素合成酶的全长cDNA,即Hyp基因。将该基因克隆到原核表达载体pET30a中,成功构建金丝桃素合成酶表达载体pET30a-Hyp,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。含有重组质粒的克隆在IPTG诱导下,表达出金丝桃素合成酶融合蛋白,利用Ni柱纯化菌体裂解上清中表达的融合蛋白,对纯化产物进行SDS-PAGE分析,结果Hyp基因得到了高效表达,大小约为20 k...
关键词：
金丝桃素 贯叶连翘 金丝桃素合成酶
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
何小解 卢向阳 易著文 方俊 田云 党西强 莫双红
为研究模拟人体胃肠道环境对儿茶素稳定性的影响,利用高压液相色谱技术测定了不同时点儿茶素在不同pH溶液及人工模拟体胃液与肠液中的含量.结果表明,儿茶素在pH5.8时最稳定,人工模拟胃液对儿茶素具有较强的破坏力,而人工模拟肠液对儿茶素的稳定性影响相对较小;胃蛋白酶、胰蛋白酶以及缓冲溶液中盐类物质并不影响儿茶素的稳定性.
关键词：
儿茶素 人工模拟胃液 人工模拟肠液
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
王保明 谭晓风 胡孝义 石明旺 莫华
在构建油茶近成熟种子cDNA文库的基础上,分离鉴定了油茶钙调素基因CoCaM1、CoCaM2的cDNA序列(Gen Bank登录号:EU856536和FJ649316),它们的长度分别为953 bp和1024 bp,均含有447 bp的开放读码框,编码的149个氨基酸完全相同;它们编码区的核苷酸序列高度一致,仅有25个碱基替代,证实了"多个基因编码一种蛋白"的假设。该蛋白含有19种氨基酸,属于酸性亲水性蛋白,理论等电点4.10,相对分子量16.83 kDa;它含有EF-手臂、半胱氨酸等结构域。该蛋白的亲水性/疏水性、柔性、抗原性具有较好的一致性,并表现高度的柔性。Blast及遗传进化分析表明:该蛋白的氨基酸序列与其它植物钙调蛋白的氨酸序列同源性较高。油茶CoCaM1在花芽到子房形成中的表达量较高;而CoCaM2在果实形成、膨大、油脂积累过程中的表达量较多,而在叶片和成熟种子中较少。这表明它们在花芽发育、果实形成、种子油脂合成积累中发挥着不同的调控作用。
[期刊] 林业科学
[作者]
宿红艳 王磊 王仲礼 冯培勇 张晔
An R2R3 MYB gene,PeMYBL1,was isolated from male inflorescence of Populus?euramericana by homologous cloning combined with in silico cloning techniques.The full length of PeMYBL1 cDNA was 1 094 bp encoding 276 amino acids.The deduced amino acid sequence contained two conserved MYB domains near the N-...
关键词：
杨树 MYB基因 克隆 表达分析 雄花序
[期刊] 中国农业科学
[作者]
夏涛 高丽萍
类黄酮化合物是植物的次生代谢产物,广泛分布于植物界且具有较强的生物活性。儿茶素是主要的类黄酮化合物之一,其含量占茶树鲜叶干重的12%～25%。作为茶叶的主要风味物质,儿茶素还具有抗氧化、抗诱变与防癌、抗心血管疾病、抗紫外线辐射等功能。本文从类黄酮及茶儿茶素的生物合成途径、组织化学定位、合成调控措施等方面,综述有关茶树儿茶素的生物合成代谢及其调控的研究进展,旨在为茶儿茶素生物合成的基因调控、代谢工程提供新的思路。
关键词：
类黄酮 茶 儿茶素 生物合成途径 调控
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
范远景 小原章裕 松久次雄
对绿茶和儿茶素进行了焙制 (品烘焙和炒培 )以测定其抗突变效果 ,结果表明复火茶抑制Trp -P - 1诱导突变与 1-NP诱导突变的效果分别比原绿茶提高了 4 5 .35 %～ 70 .2 4 %和 4 5 .0 6 %～ 10 8.88% ;用同样的方法测定儿茶素异构体的抗突变效果 ,结果表明其抑制Trp -P - 1和 1-NP的效果都有所增强。
关键词：
茶 抗突变效果 复火茶 儿茶素
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