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[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 王征  金晓玲  刘雪梅  伍江波  
为探索杜仲成熟配器官发生途径,通过组织培养的方法,以杜仲成熟胚为外植体,研究了愈伤组织的诱导和增殖、不定芽的诱导和增殖、小苗生根以及生根苗的炼苗移栽等过程。结果表明:杜仲成熟胚具有直接器官发生途径和间接器官发生两种途径。直接器官发生途径的不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L),诱导率最高80%;间接器官发生途径的愈伤组织诱导培养基为MS+BA(2.0 mg/L)+NAA(2.5mg/L),诱导率为70%,从愈伤组织诱导丛生芽的培养基为MS+BA(1.0 mg/L)+NAA(0.05 mg/L),诱导率80%;生根培养基为1/2MS,生根率80%;移栽基...
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 贾彩凤  李悦  张榕  
探索华山松的离体培养技术,对发展该树种的遗传调控技术和建立相关快繁体系等都具有一定的理论和实际意义.该试验以华山松的成熟胚为外植体,研究了培养基、生长调节剂和蔗糖等因子对其再生体系建立各阶段的影响.结果表明:①不定芽诱导培养基为DCR+BA3.0~5.0mgL+蔗糖30gL+琼脂5.0gL,最高诱导率可达到67.57%;②在相同浓度下,BA诱导不定芽的效果好于KT;③继代培养时必须降低培养基中的无机盐和生长调节剂含量;④添加0.1mgLIBA和2gL活性炭有利于丛生芽和茎段的伸长生长;⑤在附加4.0~5.0mgLIBA的12DCR培养基上,从诱导的愈伤组织内可以分化出较粗短的不定根,但植株移栽...
[期刊] 林业科学  [作者] 席梦利  施季森  
以杉木成熟合子胚为起始外植体,研究基本培养基、不同种类的细胞分裂素及生长素对杉木器官发生和体胚发生及不定芽生根的影响,并用石蜡切片法观察不定芽和体胚的发生和发育过程。结果表明:DCR+6_BA1·0mg·L-1+TDZ0·002 mg·L-1+NAA0·1 mg·L-1对成熟合子胚诱导不定芽最有效;DCR+6_BA1·0 mg·L-1+TDZ0·003mg·L-1+ NAA0·1 mg·L-1是成熟合子胚诱导体胚的最佳培养基;不定芽在DCR基本培养基中可有效伸长;1/4MS+IBA0·2 mg·L-1+NAA0·1 mg·L-1对不定芽生根最有效。石蜡切片观察表明:不定芽有2种发生方式,一种是...
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 刘慧敏  乌云塔娜  王淋  许靖诗  叶生晶  
以杜仲果实和叶片转录组为基础,研究了MEP途径系列基因的表达差异,为杜仲基因的克隆、功能鉴定及重要成分的分子积累机理研究提供重要的依据。结果表明,杜仲转录组中共42条Unigene被MEP途径注释。DXS的DXS2和DXS3在幼果和叶片中表达量具有显著差异,且DXS2在幼果和叶片中的表达量最高;该酶在幼果和成熟果实中有7条Unigene被注释,其中DXS6在成熟果实中特异表达,的表达量具有显著差异。DXR在幼果和叶片中有4条Unigene被注释,其中DXR1、DXR2、DXR3的表达量具有显著差异;该酶在幼果和成熟果实中有3条Unigene被注释,其中DXR3在成熟果实中特异表达,3条Unig...
[期刊] 林业科学  [作者] 朱丽华  吴小芹  
以湿地松成熟胚为外植体诱导不定芽发生,初步建立植株再生体系。先用含不同浓度6-BA的液体培养基处理湿地松成熟胚12~36h,吸干后转移到无激素的培养基上培养。6周后,经60mg·L-16-BA液体培养基预处理12h的胚不定芽诱导率最高达69%,预处理24h平均每个外植体产芽数达到最高(9~12个),但芽体较小,在继代培养基中伸长较慢;经30mg·L-16-BA液体培养基预处理的胚不定芽诱导频率较低,仅25%~38%,但芽体健壮,在继代培养基中伸长较快;6-BA浓度大于80mg·L-1时不利于不定芽分化。不定根诱导的研究结果表明,NAA对不定芽生根具有促进作用,在改良1/2GD+NAA0.05m...
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 王淋  乌云塔娜  刘慧敏  叶生晶  杜红岩  
杜仲幼果和成熟果转录组测序的基础上,分离鉴定了幼果和成熟果MVA途径ACOT、HMGS、HMGR基因全长cDNA序列,并对基因的核苷酸序列及其相应氨基酸序列的组成成分、跨膜结构域、疏水性/亲水性、蛋白质二、三级结构、分子系统进化等进行分析。EuACOT基因全长cDNA为1 248 bp,编码416个氨基酸,属于稳定疏水性蛋白,无明显的跨膜区,在进化上分属于不同的分类群,与烟草和番茄的ACOT蛋白间的亲缘关系最为接近;EuHMGS基因全长cDNA为1 356 bp,编码452个氨基酸,属于不稳定的疏水性蛋白,无明显的跨膜区,在进化上分属于不同的分类群,与茶树的HMGS蛋白间的亲缘关系最为接近;E...
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 叶生晶  乌云塔娜  田大伦  许靖诗  
杜仲富含萜类物质,MVA途径是萜类物质合成的重要途径之一。从杜仲果实转录组数据KEGG中杜仲MVA途径共被注释30条Unigene,根据NCBI中的BLAST比较,分别鉴定了乙酰COA酰基转移酶,羟甲基戊二酰辅酶a合成酶,羟甲基戊二酰辅酶a还原酶,甲羟戊酸激酶,磷酸甲羟戊酸激酶,二磷酸甲羟戊酸脱羧酶基因,被注释7条,3条,11条,2条,2条,5条。表达差异分析表明,以上基因中分别为5条,3条,4条,1条,5条为幼果和成熟果实差异表达基因。对差异表达基因序列进行软件设计、引物特异性分析和实验验证,最终筛选出10对适合杜仲MVA途径SYBR GreenI荧光定量PCR的引物,为MVA途径基因表达差...
[期刊] 林业科学  [作者] 杜丽  叶要妹  包满珠  
以香樟的未成熟幼胚为外植体进行诱导体胚发生影响因素的研究。成功地从香樟幼胚中诱导出胚状体并获得再生植株,MS为基本培养基,蔗糖是最佳的碳源。经2年对初生胚的继代培养,获得胚性愈伤组织;胚性愈伤组织经体胚诱导、体胚成熟、体胚萌发3个过程的诱导后能够获得再生植株。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王淋  乌云塔娜  叶生晶  
【目的】杜仲橡胶是一种多萜类物质,而甲羟戊酸(MVA)途径是合成萜类物质的重要途径之一。分析杜仲MVA途径相关基因表达的差异,预测杜仲橡胶合成的主要上游途径。【方法】在杜仲幼果和叶片转录组测序的基础上,根据基因功能注释和表达分析,确定MVA途径的系列基因,并对其进行表达差异分析。【结果】杜仲橡胶合成的MVA途径共涉及23条Unigene,分别为3条eUACOT、3条eUHMgS、8条eUHMgR、2条eUMK、1条eUPMK和6条eUMDP基因。根据转录组RPKM(ReADS PeR KilO bASeS PeR MilliOn ReADS)数据对基因表达差异进行分析,结果表明杜仲MVA途径中...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 常新  梁晋军  刘振华  肖坤  王燕  崔海洋  胡建芳  
为探讨葡萄高效再生体系的优化,以黑香蕉葡萄品种叶片、叶柄、茎尖分生组织为外植体,对其再生体系进行了优化,同时比较了不同器官再生的效果。结果显示:适合叶片再生的培养基为:MS+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA,但再生率仅为4.88%;适合叶柄再生的培养基为:NN69+1.33mg/L6-BA+0.02mg/L NAA,再生率为16.92%。说明叶柄的再生率高于叶片但两者都没有超过20%。并且NAA对黑香蕉叶柄的再生效果好于IBA。NN69基本培养基要优于MS。以茎尖为外植体在起始培养基MS+6-BA 1.40mg/L+NAA 0.09mg/L和诱导培养基培养MS+2mg/L 6-BA+0.09mg/L NAA上通过反复损伤芽尖得到茎尖分生组织(Meristematic bulk,MB),其不定芽诱导率高达87.63%。说明利用茎尖分生组织建立的葡萄再生体系更适合葡萄的遗传转化。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 蒋细旺  张启翔  
采用三步培养法建立了地被菊花品种‘玉人面’间接体细胞胚发生途径的转基因受体体系。试验以地被菊花品种‘玉人面’茎段(节间)为外植体,研究了生长调节剂、光照强度等因子对其间接体细胞胚诱导和分化的影响,同时进行了抗生素敏感性试验。结果表明:胚性愈伤组织诱导培养基为MS+KT2.0 mg.L-1+2,4-D 2.0 mg.L-1+NAA0.5 mg.L-1,诱导15 d后,将获得的黄绿色致密颗粒状胚性愈伤组织转入胚性愈伤组织分化培养基MS+KT2.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1+NAA0.5 mg.L-1中,诱导15 d后再转入MS+KT2.0 mg.L-1+NAA0.5 mg.L...
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 李铁柱  杜红岩  刘慧敏  乌云塔娜  王淋  叶生晶  
对杜仲幼果和成熟果实进行测序后,共获得了53 080 588个reads片段,包含了4 777 252 920个核苷酸序列信息,对reads进行拼接,共获得了921 902个Contig片段,序列信息达到了129 461 462 nt;在Contig数据的基础上,进一步采用over-lap的方法进行拼接,共获得了190 518个Scaffold片段,序列信息达到了67 868 367 nt;在Scaffold数据的基础上,进一步拼接,数据共获得了64 474个Unigene片段,序列信息达到了39 120 703 nt;Unigene和COG数据库进行比对表明,杜仲幼果和成熟果实转录组中的Un...
[期刊] 华北农学报  [作者] 宋英凯  张天星  崔国惠  王立新  
研究了向日葵未成熟胚培养中不定芽的发生情况,结果表明,向日葵子叶(?)未成熟胚再生不定芽的能力很强,下胚轴较子叶容易产生不定芽;基因型和培养基是影响不定芽再生频率的重要因子.基因型不同,其不定芽的再生频率差异很大.本实验中大多数基因型都能诱导出不定芽.再生频率在40%以上.最高的达91%.自交系、杂一代和保持系的再生频率高于普通品种.培养基中高含量蔗糖及适宜的6—BA含量有利于不定芽的发生.由不定芽培育出的绿苗在温室条件下,大部分可以正常开花结实.
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 杨洁  闻娟  晏晓兰  包满珠  张俊卫  
以‘雪梅’未成熟合子胚为外植体,探讨了不同采样时期和不同浓度2,4-D与6-BA组合对体胚发生的影响。结果表明:盛花后约59 d的‘雪梅’未成熟合子胚,暗培养60 d后,在12MS+2,4-D 1.0 mgL+6-BA 0.5 mgL上培养时体胚诱导率达最高(58.3%),在12MS+2,4-D 1.0 mgL+6-BA 0.2 mgL上培养时体胚诱导数最高(达3.6个);体胚在增殖培养基12MS+6-BA 0.1 mgL+NAA 0.05 mgL中产生次生体胚,在12MS+6-BA 1.0 mgL+NAA 0.1 mgL+GA30.5 mgL培养中萌发,再生出植株。
[期刊] 自然资源学报  [作者] 杨峻山  张聿梅  姜声虎  
本文概述了杜仲在资源、栽培、化学成分及药理活性和临床应用等方面的研究现状,并对其开发利用前景进行了展望。
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