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[期刊] 林业科学
[作者]
李姝江 朱天辉
撑×绿杂交竹(Bambusa pervariabilis×Dendrocalamopsis grandis)梢枯病是长江中上游退耕还林毁灭性病害之一,可造成严重的生态和经济损失。由于该病是近年来四川栽培区新发现的病害,相关研究较少,目前仅对该病的病原及发生规律(朱天辉等,2009a)、症状特点及空间格局(朱天辉
关键词：
梢枯病菌 毒素 蛋白 致病活性 杂交竹
[期刊] 林业科学
[作者]
李姝江 谯天敏 韩珊 朱天辉 车冠男
采用不同检测技术(荧光偏振法、中性红法、氧电极法等)测定梢枯病菌蛋白毒素对不同杂交竹品种嫩枝离体线粒体膜的流动性、表面电位、肿胀度、聚集度及脂质过氧化物MDA、辅酶Q10(CoQ10)含量、线粒体呼吸功能的影响。结果表明:蛋白毒素胁迫使4个竹品种的线粒体膜流动性减弱、表面电位减低、肿胀度增大、聚集度降低;CoQ10含量下降,MDA含量增加,细胞色素C氧化酶(CCO)、ATPase活性亦下降,呼吸控制率(RCR)和磷氧比(P/O)明显降低。说明蛋白毒素对杂交竹嫩枝线粒体膜造成损伤,线粒体脂质过氧化程度增加,膜完整性被破坏,呼吸作用受抑制。以上各项指标中,抗病品种(3#和6#)受蛋白毒素的影响均显...
关键词：
蛋白毒素 线粒体 生物物理特性 呼吸作用
[期刊] 林业科学
[作者]
张丽娜 朱天辉 彭艳 郑磊 赵芳
从绛红褐链霉菌YSSPG3发酵物中纯化获得抗菌蛋白AMP,采用其稀释液喷雾或浸根诱导处理撑绿杂交竹苗,调查病情指数并测定杂交竹体内抗性相关酶活性的时序变化。结果表明:用抗菌蛋白AMP(母液浓度为360.56μg·mL-1)的10,20,50倍稀释液叶片喷雾或浸根处理后,撑绿杂交竹病情指数都显著低于发病对照。经不同浓度抗菌蛋白诱导,植株内超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)等抗性酶对杂交竹梢枯病菌有不同的响应。诱导并挑战接种处理的叶片内各抗性酶活性比只诱导不接种的处理上升幅度大。只诱导不接种及诱导后挑战接种,叶片内各...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
邵敏 陆徐忠 王金生
采用 (NH4) 2 SO4分步沉淀法 ,从水稻白叶枯病菌培养滤液中提取对水稻白叶枯病菌有机酸毒素具解毒作用的解毒蛋白粗提物 (crudedetoxificationprotein ,CDP) ,经滚动式等电聚焦电泳 (RPIE)和离子交换层析 (FPLC)分离 ,生物测定结果表明 ,第Ⅱ吸收峰具有生物活性 ;再经SDS PAGE电泳和考马斯亮蓝染色 ,第Ⅱ吸收峰收集物有明显的一条带 ,相对分子质量为 4 7 9× 10 3 。野生菌产生的CDP解毒活性明显低于其毒性基因突变体。CDP对热和蛋白酶K均不稳定 ,对毒素的解毒主要是通过脱羧起作用。用CDP处理水稻后 ,水稻体内与抗病性相关的酶活性...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨保军 杨怀文 杨秀芬 刘峥 邱德文 袁京京
【目的】分离和纯化嗜线虫致病杆菌北京变种(Xenorhabdus nematophila var.pekingensis)CB6菌株胞内和胞外杀虫蛋白,鉴定其蛋白种类。为进一步利用此类杀虫蛋白奠定基础。【方法】采用硫酸铵沉淀、DEAESepharoseFF离子交换柱层析、Butyl SepharoseFF疏水柱层析和SephacrylS-200HR凝胶过滤对该类蛋白进行分离和纯化,采用Native-PAGE和SDS-PAGE技术对所纯化蛋白进行组分分析。【结果】获得达电泳纯的胞内杀虫蛋白E1和胞外杀虫蛋白E2。以2.58μg·ml-1含量E1、以4.21μg·ml-1含量E2喂饲棉铃虫初孵幼虫...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
陈吉祥 刘霜 李筠 王祥红 杜宗军 于德华 纪伟尚 徐怀恕
从山东省莱州海区自然发病的花鲈 (Lateolobraxjapanicus)体内分离到 1株致病性鳗弧菌 ,经硫酸铵盐析、DEAE SepharoseFastFlow和Sephadex G10 0凝胶层析等方法从其培养液中分离纯化了 1种胞外蛋白酶。用SDS PAGE电泳测得蛋白质的分子量为 36 7kD ,酶的最适温度为 5 0℃ ,对热不稳定 ,70℃ 15min完全失去活力 ;最适pH为 7 0 ;1mmol/L的PMSF对酶活性无影响 ,部分金属离子如Cu2 + 、Fe2 + 、Fe3 + 、Zn2 + 对酶活力有抑制作用 ,而Ca2 + 对酶有一定程度的激活作用 ,1mmol/LE...
关键词：
鳗弧菌 胞外蛋白酶 分离纯化 理化性质
[期刊] 华北农学报
[作者]
张双凤 张爱民 赵钢勇 张克宏
从棉花植株根部筛选的108株芽孢杆菌中,通过对棉花黄枯萎主要病原菌大丽轮枝菌拮抗效果的复筛,分离到一株LC-105菌株,其抑菌圈达到20 mm以上;本研究从该菌株的发酵代谢产物中,分离出活性拮抗物质,进一步通过DEAE-Sephadex A-50离子交换层析和Sephacryl-S100凝胶层析对其代谢产物进行了分离纯化,证明该拮抗物质为一种蛋白质,最后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳证实了所分离物质的纯度达到电泳纯。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
谯天敏 张静 朱天辉
铜绿假单胞菌和长枝木霉均对杂交竹梢枯病菌具有明显的拮抗作用。通过室内抗生素、紫外诱变和杀菌剂胁迫培养,获得铜绿假单胞菌和长枝木霉突变菌株,此突变体在形态特征、平板抑菌活性上与原始菌株差异不显著,且具有长期稳定的抗药性。田间喷施突变菌株菌悬液或孢子悬液可以使其成功定殖到杂交竹叶表面。铜绿假单胞菌和长枝木霉的亲和性研究显示,二者浓度低于108cfum L,均无明显抑制作用,具有高度亲和性,这有利于2菌株在杂交竹梢枯病生物防治中协同作用的发挥。利用铜绿假单胞菌悬液和长枝木霉孢悬液进行梢枯病菌田间协同防治试验,结果表明:预先接种拮抗菌防效最高,其次是同时接种,后施拮抗菌防效最低,说明铜绿假单胞菌和长...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
牛焕杰 李辉 王娜娜 张红 王惠 黄丽丽
【目的】从枯草芽孢杆菌Ｅ１Ｒ－ｊ菌株的发酵液中分离纯化抗菌蛋白，分析确其对苹果树腐烂病菌菌丝的抑制作用，为更好地利用该菌株防治植物病害和研制生物农药奠定基础。【方法】采用盐酸沉淀法从Ｅ１Ｒ－ｊ发酵液中提取粗蛋白，并筛选酸沉淀的最佳ｐＨ值，然后通过反相柱ＲＥＳＯＵＲＣＥＴＭＲｐＣ、凝胶柱ＳＵｐＥＲｄＥｘ－７５、阴离子交换柱ｄＥＡＥ－ＳＥｐＨＡＲＯＳＥ和脱盐柱层析技术，提取并分离纯化粗蛋白；在粗蛋白分离纯化过程中，以皿内对峙试验测定蛋白的抗菌活性；通过扫描电镜技术，观察抗菌蛋白对病原菌菌丝的抑制作用。【结果】以ｐＨ ４．０盐酸沉淀获得的粗蛋白活性最强，抑菌效果最佳。反相柱ＲＥＳＯＵＲＣＥＴＭＲｐＣ．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
何晨阳 王金生
笔者综述了分子植物病理学科组对水稻白叶枯病菌致病基因的研究结果和进展，介绍了病菌致病基因研究中分子遗传学分析方法，报道了病菌毒性基因、无毒基因和受寄主诱导基因的特征和功能，阐述了致病基因对致病性、致病生化因子可能的调控关系，讨论了该领域的研究现状和前景。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
成国英 于大胜 李桂菊 费甫华
对冰箱斜面保存的０、Ⅱ、Ⅳ致病型模式株与其后代单菌落子株致病力的比较，并测定０、Ⅱ、Ⅳ型模式株两两混配液的致病力和观察２２个菌株在中茬和晚茬的致病型鉴别品种上致病力的变异情况，结果表明：采取病叶段沙培，在切口取菌胶的方式分离所得菌株是含不同毒力细胞的混合体，其毒力差异是由各细胞间的组成比和互作关系决定的；用这样的菌株划分出的致病型，实际是病菌不同毒力细胞在一定生态条件下的组成比和互作关系的表型反应，即病菌自然群体毒力结构的反应；鉴于致病型代表菌株是不同毒性细胞的混合体，不同的生态条件，必然会导致其组成比的变异，所以菌株毒力的变异是绝对的，不变是相对的。
关键词：
稻白叶枯病菌 致病型 毒力变异
[期刊] 华北农学报
[作者]
鄢洪海 张茹琴 迟玉成 林海洋 许曼琳 夏淑春
为了明确花生黑斑病菌的致病因子及致病机制，对该病菌分泌的毒素进行了提取和生物学特性测定。通过对花生黑斑病菌毒素产生条件筛选和优化，采用氯仿提取、硫酸铵和柱层析分离纯化病菌产生毒素。结果表明：花生黑斑病菌在Ｖ８培养液、光／暗交替、静止条件下培养２０ ｄ产毒活性最强，用等量的氯仿提取，再经过８０％饱和度的硫酸铵沉淀透析和柱层析纯化，可以获得较高活性的花生黑斑病菌毒素。初步分析显示，毒素由Ａ和Ｂ ２种成分构成，但仅Ａ成分对花生有致病性，Ｂ成分没有，Ａ成分是毒素的主要成分；另外，病菌毒素具有一定的热稳定性和较强的极性。
关键词：
花生黑斑病菌 毒素 培养条件 生物学特性
[期刊] 华北农学报
[作者]
闫芝芬 张红心 崔四平 王立安 魏建昆
稻瘟病菌９０－２菌株系是从大田水稻雄性不育细胞质（ＣＭＳ）上分离的对野败型（Ｗ）ＣＭＳ专化致病的生理小种。研究表明，该菌株产生的毒素在致病过程中起着一定作用。本试验测定了此菌株在不同ｐＨ培养基中培养对毒素产生的影响、毒素的热稳定性及ｐＨ值变化对毒素活性的影响等。离体叶片法测定毒素活性发现毒素使离体叶段褪绿和细胞坏死，珍汕９７Ａ褪绿程度大于珍汕９７Ｂ，进一步测定了毒素对Ｗ珍汕９７Ａ、９７Ｂ叶绿素总含量的影响和对Ｗ珍汕９７Ａ、９７Ｂ呼吸作用的影响，初步测定了粗毒素的致病作用。用根冠细胞法测定了９０－２菌株毒素对一套４种同核异质ＣＭＳ材料的致病力，表明稻瘟病菌９０－２菌株是ＣＭＳ野败型的专化生理小种...
关键词：
水稻,稻瘟病菌,毒素,雄性不育细胞质
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李成云 陈琼珠 陈宗麒 罗朝喜 林长生 内藤秀树
报道了5个稻瘟病菌杂交组合的后代菌株在4个水稻品种和4个龙爪稷品种上的致病性分离结果。其中水稻菌3514－R－24对龙爪稷品种EC3的非致病性，龙爪稷菌株G10－1对水稻品种Keneana的非致病性及水稻菌3472－R－12对龙爪稷品种EC3、EC21的非致病性，可能是受一对基因控制的，因为它们与致病性菌株杂交后，致病性后代与非致病性后代的分离比为1∶1。3472－R－12对两个龙爪稷品种的非致病性基因可能就是相同的，因为对EC3致病的后代菌株，对EC21也都是致病的，反之亦然。其他组合中的龙爪稷菌对水稻的非致病性和水稻菌对龙爪稷品种的非致病性，则可能受一对以上的基因控制。
关键词：
稻瘟病 后代 非致病性/致病性分离
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
龙菊英 张桂英 王金生
wxocA、wxocB、wxocD、wxocE和wzt是水稻条斑病菌(Xanthom onas oryzaepv.oryzicola,Xooc)的脂多糖(lipopo-lysaccharide,LPS)合成基因,avrXa3是水稻白叶枯病菌(Xanthom onas oryzaepv.oryzae,Xoo)的一个无毒基因。利用pBCSK(-)和pKNG101两个质粒的复制起点不被水稻黄单胞菌识别的特点,把wxocA、wxocD、wxocE和wzt的中心区域克隆在pBCSK(-)上,获得突变转化单元pBCSK∷ΔwxocA、pBCSK∷ΔwxocD、pBCSK∷ΔwxocE和pBCSK∷Δwzt...
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