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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
熊兴耀 李炎林
超低温保存是目前木本植物长期保存的理想方法。综述国内外超低温保存技术在木本植物种质资源保存方面的应用现状和超低温条件下的低温伤害及细胞超微结构改变,阐述超低温保存技术的发展及各类超低温保存技术的优缺点和影响因素,指出广谱适用性问题、保存方法的可重复性问题和可操作性问题、投入产出问题是影响超低温保存技术推广应用的主要问题,认为扩大超低温保存木本植物资源的种类、根据植物种类和外植体类型发展相应的超低温保存技术、根据保存目的合理选取保存材料及其保存方法、优先发展经济优势物种的保存技术、增加财政投入以研发新型超低温保存技术是解决上述问题的重要途径。
关键词：
木本植物 种质资源 超低温保存 低温伤害
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
张亚利 尚晓倩 刘燕
为满足种质资源保存和交换以及杂交育种工作的需求,花粉超低温保存研究日渐兴起并逐步深入,保存材料从农作物、果树逐渐扩展到药用植物、园林植物等各类植物花粉.花粉超低温保存研究最初主要集中在保存技术方面,随着研究工作的深入和完善,花粉超低温保存机理的研究也逐渐展开,超低温保存花粉效果的评价,也从花粉染色法、离体萌发法,逐渐发展到田间杂交育种的实际应用.该文对20世纪80年代以来成功进行了花粉超低温保存研究的植物材料进行了总结,重点介绍了花粉超低温保存技术程序,同时对保存效果的评价及超低温保存机理的研究进展进行了综述.
关键词：
花粉 超低温保存 种质资源
[期刊] 西南农业学报
[作者]
周旭红 何艳 欧阳德爱 桂敏 李绅崇 曹桦 杨春梅 卢珍红 莫锡君
以香石竹"云恋蝶"离体茎尖为试材,研究玻璃化法对香石竹茎尖的离体超低温保存。通过正交设计试验对影响存活率的主要因素(预培养培养基中蔗糖浓度、预培养时间、装载时间和PVS2处理时间)进行分析,结果表明,预培养1 d,预培养基中蔗糖浓度为0.5 mol/L,装载40 min,PVS2液处理40 min,液氮处理1 d,在40℃水浴化冻后的香石竹茎尖,成活率达44.13%,且超低温再生苗与其常温苗的生理生化指标无显著差异。本试验成功地建立了香石竹种质资源玻璃化法超低温保存的技术,为香石竹种质资源的长期保存提供了一条有效途径。
关键词：
香石竹 茎尖 玻璃化法 超低温保存
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
刘燕 周慧 方标
为了探讨超低温保存技术广泛应用于园林花卉种子保存的可能性 ,对 18个科 47种花卉种子进行了超低温保存研究 .除了 2种花卉种子进入液氮后炸裂外 ,其余 45种花卉种子保存后都有一定发芽率 ,有些花卉种子保存后种子发芽率还高于保存前 .结果表明 ,①超低温保存技术可以广泛应用于园林花卉的种子保存 ;②花卉种子在自然含水量状态即可存于液氮中 ;③从液氮中取出后 ,采用 35～ 40℃温水浴化冻有较高的发芽率 ;④超低温保存对一些花卉种子萌发表现出促进作用
关键词：
超低温保存 种子 园林花卉 种质保存
[期刊] 林业科学
[作者]
郑郁善 陈礼光 李庆荣 林镇斌 吴擢溪
The quality character, the dehydrogenase activities and the α amylase activity of Castanea mollissima conserved materials, including the seeds and the excised embryos, were analyzed for purpose of the feasibility of long term storage associated with cryopreservation. The results showed that mo...
关键词：
板栗 含水量 超低温保存 种子活力
[期刊] 林业科学
[作者]
乌凤章 王贺新 徐国辉 张自川
低温胁迫限制了许多野生植物和作物的地理分布,降低了生产率。植物在低温胁迫下生存能力差别很大,来源于热带和亚热带的冷敏感植物在温度高于冰点的低温条件下会发生不可逆的伤害,而温带地区的植物能够承受极端的冰冻条件。近年来有关冷敏感植物和温带植物低温胁迫下生理生化响应特征,转录组学、蛋白质组学和代谢组学分析取得了较快进展,从不同层次阐明了木本植物调节低温反应和抗冷(冻)性的生理和分子机制,为利用抗冷(冻)相关基因进行林木抗(冷)冻分子育种提供了重要参考。冷敏感树木在1~10℃的低温胁迫下,会出现水分状况、矿质营养、光合作用、呼吸作用和新陈代谢等生理过程的紊乱,造成冷害甚至死亡。钙信号途径是低温应答过程...
[期刊] 华北农学报
[作者]
赵喜亭 王苗 邵换娟 李翔 李海兵 李明军
为了验证前期建立的包埋玻璃化超低温保存技术是山药(Dioscorea opposita)种质资源离体保存的一种有效的方法,对包埋玻璃化超低温保存后的山药再生植株的形态、生理和同工酶酶谱进行了研究。结果表明:与常温保存的植株相比,供试的铁棍山药再生植株的平均株高、叶片数、芽数和茎节长,叶片中叶绿素、可溶性蛋白和可溶性糖含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活力在绝对值上虽有差异,但均未达到显著水平,且能移栽成活,保持了形态和生理的稳定性;供试的铁棍、太谷、怀庆和嘉祥细长毛4种山药再生植株的SOD和蛋白水解酶的同工酶条带数目及强度均未发生变化,保持了酶蛋白的稳定性。说明前期建立的包埋玻璃化法超低温保存技...
关键词：
山药 超低温保存 包埋玻璃化法 稳定性
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈霜莹 常永健 赵艳华 张浡 刘瑜 章德明
将苹果、梨、桃、李和樱桃等树种的39个品种的花粉干燥至含水量10%～20%,直接投入液氮中(-196℃),经过一段时间保存后,再以40℃水浴快速化冻1min,然后鉴定其生活力和萌发力.结果表明,花粉的生活力没有明显变化,其离体萌发率与新鲜花粉相近.新鲜花粉含水量在60%左右,不宜用于液氮保存.花粉含水量是影响保存效果的关键因子之一,只要花粉含水量适宜,可以多次反复冷冻—化冻,生活力不受影响.此项技术可用于果树花粉的长期保存.
关键词：
超低温保存种质 花粉 果树
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
常维霞 姚小华 龙伟
为实现普通油茶花粉周年保存,对普通油茶3个无性系品种的花粉进行超低温保存研究。结果表明:花粉投放液氮前的含水量、预冻及解冻方式对超低温保存效果具有明显影响。3个品种花粉烘干(30℃)脱水2~5 h,花粉含水量达11.65%~15.70%时,超低温保存效果最佳;-26℃预冻(1 h)具有明显的预冻效果,液氮保存后花粉萌发率显著高于其他处理;超低温保存后的花粉采用38℃温水浴(3 min)快速解冻及-80℃(1 h)→-20℃(1 h)→4℃(1 h)逐级解冻,均能较好保持花粉活力。4℃低温干燥保存油茶花粉,能满足短期内(30 d)授粉的需要;超低温技术可以实现油茶花粉的周年保存,且保存一年的花粉较初始活力差异不显著。
关键词：
普通油茶 花粉 超低温保存
[期刊] 华北农学报
[作者]
吴永杰 赵艳华 周明德
苹果金冠品种的休眠茎尖经３种不同方法（玻璃化法、包埋－干燥法和两步降温法）超低温保存后，均获得成功，存活率达到了８３％。休眠茎尖由于经受了冬季的深冷驯化和具有较低的含水量，因而成为超低温保存的良好试材。经过玻璃化液（ＰＶＳ３：５０％甘油＋５０％蔗糖）预处理８０ｍｉｎ（２５℃条件下）后或经蔗糖溶液预培养并于无菌空气中干燥脱水至含水量３０％左右后，休眠茎尖可直接投入液氮进行超低温保存。保存后的休眠茎尖经离体培养后可直接再生植株。试验进一步验证了试材生理状态的选择是超低温保存成功的一个关键因素，这不仅可以简化超低温保存的程序，而且可以提高此方法的实用性，为早日建立植物种质的超低温保存库奠定了基础。
关键词：
苹果,休眠茎尖,超低温
[期刊] 林业科学
[作者]
徐刚标 李美娥 郑从义 易文
本文对银杏子叶愈伤组织进行了超低温保存研究。结果表明 ,冰冻保护剂、冷冻速度对解冻后材料相对存活率影响较大 ,冻前预培养和预冻至某一温度停留一段时间也较为重要。在含高浓度山梨醇或甘露醇的培养基上预培养 2d的愈伤组织 ,用 10 %二甲基亚砜 +0 .5mol·L- 1 山梨醇作为冰冻保护剂 ,以 1℃·min- 1 速度降温 ,在 - 15℃、- 35℃分别停留 10min和 30min后 ,投入液氮中保存 1d ,细胞相对存活率可达 6 0 %以上。再培养时 ,细胞能恢复生长。
关键词：
银杏 子叶 愈伤组织 超低温保存
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
程利红 段旭昌 张宗勤 孙宝胜
【目的】探索中国红豆杉种质资源的超低温保存技术,为红豆杉种质资源的开发利用提供支持。【方法】采用多重单因素试验法,将中国红豆杉种子前处理后,采用9种不同的冷冻保护剂处理,之后分别进行0℃冷浴静置、25℃室温0.6MPa抽真空和冰浴250W超声波处理,处理时间分别为0,5,10和15min;然后按照4种不同的冷冻方式投入液氮中冷冻保存,保存结束后分别采用37℃水浴快速、20℃流动自来水、5℃慢速和25℃室温静置进行解冻,最后探讨了在较优的3种冷冻保护剂条件下保存时间对红豆杉种子活力的影响。以氯化三苯基四氮唑(TTC)还原法测定冷冻保存后种子的活力。【结果】冷冻保护剂、保护剂处理方式和处理时间、冷...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
陈晓艺 江帅菲 代剑峰 袁德水 Lisheng Kong 张金凤 赵健
【目的】超低温保存是植物优良种质长期保存的重要方法。本文为探究梯度预处理对超低温保存存活率的影响,以期有效保存华北落叶松胚性组织的发育潜能。【方法】本研究以华北落叶松胚性组织为材料,对超低温冷冻保存程序中预培养、冷冻处理方式、解冻方式和恢复培养等关键环节开展研究。预培养和冷冻保护共设计成4种处理,以不经过预培养和冷冻保护直接冷冻保存为对照,每个处理重复3次。【结果】结果表明:处理组合1、2、3之间虽无显著差异,但结合冷冻保护剂二甲基亚砜(DMSO)对细胞具有一定毒害作用,高浓度的DMSO会影响后续胚性组织的恢复甚至造成细胞死亡,因此选出效果较好的超低温保存方法为:0.2、0.4 mol/L山梨醇液体梯度预处理与0.4 mol/L山梨醇+5%DMSO为冷冻保护剂进行冷冻保护,最佳解冻方式为37℃水浴,解冻后的胚性愈伤组织细胞活性最高达78%;超低温保存后的胚性组织与正常增殖的胚性组织在外观及显微结构上无明显差异,且低温保存后的愈伤组织仍保持分化形成体细胞胚的能力。【结论】研究结果为华北落叶松乃至其他针叶树胚性组织的超低温保存提供了参考。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
刘燕 张亚利
该文对 2 6个不同类型梅花品种的花粉进行了超低温保存研究 ,检验了保存前后花粉的萌发率及授粉后的结实率 ,同时比较了花粉液氮罐 (- 1 96℃ )、冷冻室 (- 2 0℃ )及冷藏室 (5℃ ) 3种保存方法的保存效果。结果表明 :2 3个梅花品种的花粉都能实现超低温保存 ,但保存效果存在差异 ,有些品种花粉保存后离体萌发率降低 ,有些则升高。 5个品种的花粉保存 1年后 ,花粉萌发率仍保持在 34%到 73%。授粉实验表明 ,超低温保存后的花粉仍具有授粉结实能力 ,座果率高于新鲜花粉。花粉分别保存在液氮、冷藏室及冷冻室中 ,9个月后 ,冷藏室保存的花粉基本丧失萌发力 ,冷冻室保存的大部分...
关键词：
梅花 花粉 超低温 保存
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