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[期刊] 西南农业学报  [作者] 闫海霞  陶大燕  何荆洲  黄昌艳  关世凯  蒋月喜  卜朝阳  
【目的】研究月季和野蔷薇的试管嫁接技术,为月季繁殖的有效途径提供参考。【方法】以野蔷薇带芽茎段为外植体,通过比较不同灭菌方法、不同激素种类和浓度的培养基对组培快繁的影响,筛选出适宜的灭菌方法以及培养基,从而建立野蔷薇的无菌快繁体系,并以不同品种月季无菌苗的茎尖为接穗,野蔷薇为砧木进行远缘嫁接。【结果】野蔷薇的外植体灭菌宜采用75%酒精溶液拭擦茎段表面后浸泡10 s,再用0.1%的升汞溶液浸泡10 min,继代增殖培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L,生根培养基为WPM+NA
[期刊] 中国农业科学  [作者] 覃语祺   苏健馨   曹雪敏   朱婉   程文翰   张蔚  
【背景】U6启动子是CRISPR/Cas9基因编辑系统中驱动sgRNA转录的重要元件,而不同物种的U6启动子转录活性可能存在差异,且物种内源U6启动子相比物种外源U6启动子可能具有更高效的启动效率。迄今对蔷薇属(Rosa)植物的U6启动子少有报道,且尚未获得转录活性强于拟南芥U6的启动子。【目的】筛选转录活性更高的蔷薇属植物U6启动子,为后续月季和野蔷薇等蔷薇属植物CRISPR/Cas9基因编辑系统的优化和分子育种奠定基础。【方法】利用拟南芥保守的102 bp U6 snRNA序列,从中国古老月季‘月月粉’(Rosa chinensis Old Blush,OB)基因组中克隆相似性最高的6个OBU6启动子,从野蔷薇(R. multiflora)基因组中克隆相似性最高的7个RmU6启动子,并构建OBU6启动子和RmU6启动子分别驱动LUC和GUS报告基因的融合表达载体,利用农杆菌介导的瞬时转化法转染本氏烟草(Nicotiana benthamiana)叶片和月季‘萨曼莎’(R. Samantha)组培苗,通过双荧光素酶活性检测和GUS组织化学染色对月季和野蔷薇的启动子转录活性分别进行比较。【结果】‘月月粉’6个OBU6启动子和野蔷薇7个RmU6启动子均具有影响U6启动子转录活性的两个必要元件USE和TATA box。双荧光素酶活性检测和GUS组织化学染色结果显示,月季‘月月粉’OBU6启动子和野蔷薇RmU6启动子均具有转录活性,但OBU6启动子的转录活性均弱于拟南芥AtU6-1启动子。考虑到过长的U6启动子可能会削弱其转录活性,于是选取其中转录活性相对较高的OBU6-4进行5′端截短(1 507、1 076、574和187 bp),但截短后的启动子未能提高转录活性;而在野蔷薇中,成功筛选到一个长度为630 bp的RmU6-2启动子,其转录活性显著高于拟南芥AtU6-1启动子。【结论】从月季‘月月粉’中克隆得到6条U6启动子,从野蔷薇中克隆得到7条U6启动子,并筛选出一条转录活性显著高于拟南芥AtU6-1启动子的野蔷薇U6启动子RmU6-2,为构建蔷薇属植物CRISPR/Cas9基因组编辑系统提供了极具应用潜力的启动子。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 侯哲   李昂   黄长兵  
月季、蔷薇和玫瑰是隶属于蔷薇科蔷薇属的姊妹树种,由于长时间的杂交和人工栽培,三者的形态很难区分,急需开发一套分子标记对三者进行鉴定。据此,本研究获取了月季、蔷薇和玫瑰的叶绿体基因组序列,对其基因组序列的特点、简单重复序列(SSR)分子标记、核苷酸多态性及月季、蔷薇和玫瑰在蔷薇属内的系统发育关系进行了分析。结果表明:月季、蔷薇和玫瑰的叶绿体基因组全长分别为156 591、156 592、157 110 bp,均具有非常典型的四分体结构;月季、蔷薇和玫瑰叶绿体基因组分别含有131、137、136个基因,总GC含量均为37.00%;月季、蔷薇和玫瑰叶绿体基因组的结构高度相似,共线性关系良好,蛋白编码区域保守度与相似度最高;在月季、蔷薇和玫瑰的叶绿体基因组中分别鉴定出57、59、46个SSR,且绝大多数是单核苷酸重复序列;以筛选到的matK基因作为分子标记构建的系统发育树显示,蔷薇科蔷薇属植物聚为一个单系类群,可以区分月季、蔷薇和玫瑰,且月季与蔷薇的亲缘关系最近。本研究结果可为后续蔷薇属植物的遗传多样性、遗传结构及系统发育研究提供参考。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 吴钰滢  周璇  徐庭亮  常征  易星湾  高华北  赵红霞  王佳  程堂仁  张启翔  潘会堂  
【目的】本研究通过对现代月季品种‘赞歌’(2n=4x=28)和野蔷薇变种粉团蔷薇(2n=2x=14)的杂交后代群体进行杂种鉴定和评价,为利用野蔷薇改良现代月季品种提供重要的理论依据和材料基础。【方法】以现代月季品种‘赞歌’×粉团蔷薇的91株杂交后代为材料,综合利用形态学观察、流式细胞仪倍性检测、核型分析和SSR标记对杂交后代进行杂种鉴定和评价,并分析了不同方法对蔷薇属杂交后代鉴定的效率。【结果】杂交后代的表型参数多介于两亲本之间,变异系数为19.71%~67.13%,变异广泛;流式细胞仪检测结果显示91个杂交后代中有70个三倍体(2n=3x=21),18个四倍体,1个六倍体(2n=6x=42),2个不能确定倍性;对21个流式细胞仪检测为非三倍体的后代和3个连续开花的三倍体后代进行染色体核型分析,发现18个后代的分析结果与细胞流式仪倍性检测结果一致,确定流式细胞仪测定倍性的准确率为93.41%;从26对SSR引物中筛选出7对多态性引物对2个四倍体和1个六倍体后代进行扩增,结果显示2个四倍体的杂交后代为假杂种,六倍体后代为真杂种。【结论】在鉴定不同倍性蔷薇属植物杂交后代时,核型分析和SSR标记法比形态学观察和流式细胞术更准确。本研究获得的三倍体杂交后代为利用野蔷薇改良现代月季品种提供了新的种质材料。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 邓建军  李芳东  乔杰  刘昌勇  夏辛  黄琳  
以白花泡桐优树‘白优2号’为试验材料,通过组织培养和试管嫁接方法,对白花泡桐优树材料的幼化技术进行了研究。结果表明:外植体初代培养萌发的嫩芽为最适合的接穗;‘建始桐3号’为试管嫁接较合适的砧木;采用劈接进行;MS+NAA 0.3 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1为试管嫁接培养基;继代增殖和生根培养基分别为1/2MS+6-BA 6.0 mg.L-1+NAA 0.3 mg.L-1+蔗糖20 g.L-1和1/2MS+NAA 0.1 mg.L-1。
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 邵果园  陆方方  
为了探明植物远缘嫁接的模式和分析嫁接后代的遗传特性,以大岩桐Sinningia speciosa,鸡冠花Celosia cristata,长寿花Kalanchoe blossfeldiana,黄色马蹄莲Zantedeschia elliottiana,百合Lilium longiflorum,苹果Malus domestica和阳桃Averrhoa carambola等7种植物为研究对象,采用试管嫁接的方法,进行了草本与木本植物、单子叶与双子叶植物、草本与草本植物的远缘嫁接,并对嫁接成活苗进行简单重复序列区间扩增多态性(inter-simple sequence repeat,ISSR)分析。...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 丁萌  申玉晓  傅小鹏  包满珠  宁国贵  
以华中地区分布的4种野蔷薇叶片为外植体,对其直接再生的影响因子进行研究,以筛选出不定芽诱导率最高的株系及最优的诱导条件。研究结果显示,4种野蔷薇的不定芽最高诱导率差异显著,野蔷薇2号为78.20%,3号为61.16%,4号为13.00%,1号仅5.93%;野蔷薇2号的田间叶片外植体的不定芽诱导率高于组培苗叶片;基因型、植物生长调节剂及叶片的状态对野蔷薇的直接再生影响显著,选择合适的基因型及培养条件极为重要。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 李增武  胡汉升  赵梁军  钟铃  
该试验用打破休眠的野蔷薇种子为试材 ,用遮荫时间和遮荫光强两种处理方法来研究遮荫对一批蔷薇实生苗根颈生长的影响 .结果表明 :遮荫时间主要影响蔷薇实生苗平均根颈长和根颈长整齐度 ;而遮荫强度影响根颈长众数、平均根颈长和根颈长整齐度 .同时根颈长整齐度也受种子发芽势的影响 .分析处理苗根颈长、粗和遮荫苗干重之间的相关性 ,结果表明 :遮荫使蔷薇实生苗根颈的伸长的同时也降低了根颈的粗度 ,从而影响了蔷薇苗后期的生长 .根据正态分布的概率密度函数分析 ,在遮光强度为 (4 6 2± 1 1 ) μmol (m2 ·s)、遮荫 1 4d时得到满足月季嫁接要求的实生砧木根颈长度 (2 5~ 3 5...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 梁根云  刘小俊  杨宏  倪国成  房超  刘独臣  蔡鹏  李跃建  
为了研究断根嫁接对冬瓜产量和品质的影响,本研究利用’川砧1号’南瓜砧木和彭州’青粉冬瓜’进行断根嫁接。结果表明,利用"川砧1号"南瓜作为嫁接砧木,断根嫁接后,增加了冬瓜叶片长和宽,增大了叶片叶面积,能显著增加植株茎粗和冬瓜产量,平均单瓜增产达24.25%。断根嫁接后冬瓜果肉的糖酸比提高,维生素C和硝酸盐含量降低,可溶性固形物、氨基酸、蛋白质和粗纤维含量变化不显著。因此,以"川砧1号"南瓜为砧木的断根嫁接,既能够防治冬瓜枯萎病等土传病害,增加产量,而且不会使冬瓜品质变差,可以在各冬瓜产区大力推广。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 姜玲  陈泽雄  徐象华  邓秀新  
研究了不同大小的瓯柑茎尖分生组织进行微芽嫁接脱除黄龙病病原的效果。在双目实体显微镜下,分别切取含有生长锥及1、2、3和4个叶原基的茎尖分生组织嫁接到黄化砧木上,以获得茎尖微芽嫁接苗,用PCR进行黄龙病分子检测。试验表明:用含1个和2个叶原基的茎尖嫁接获得的试管苗全部不带病毒;含有3个和4个叶原基的茎尖嫁接获得的试管苗其脱毒率分别为95.7%和73%,感病母株和长春花阳性对照可以扩增出535 bp的特异性片段;尽管在含2个叶原基条件下获得的STG成活率为47.7%,但可以达到理想的脱毒效果。试验还证明,瓯柑二次嫁接与茎尖嫁接直接移栽苗的生长量差异极显著。
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 周选滔  阮逸  李永海  戴本营  
春秋季节用4种嫁接方法进行板栗嫁接对比试验。结果表明:贴枝接适期从9月中旬到10月下旬,长达40d以上。春季以挖骨皮接较好。这两种方法平均嫁接成活率均达90%以上。夏季采用截顶留叶切枝接,嫁接成活率均达90%以上。嫁接适期为7月上旬到8月上旬。
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 黎章矩  钱莲芳  喻卫武  
6a试验和生产实践证明 ,长块削芽接和贴枝接是银杏最好的 2种嫁接方法 ,操作方便 ,接穗利用率高 ,嫁接时间长 ,接苗生长好 ,嫁接成活率达 90 %以上。普通枝接 1年生砧木基径要 0 5 0cm以上 ,而削芽接和贴枝接只需 0 35cm以上。接穗位置效应明显 ,以结实树树冠外围 1年生延长枝为宜 ,内膛枝、徒长枝和纤细枝不宜作接穗。翌年 4~ 6月科学施肥 ,延迟接苗顶芽形成 ,是培养壮苗的关键。 1年生砧木当年嫁接 ,以 8月下旬至 1 0月中旬为好 ,8月中旬前嫁接 ,接芽发育不良 ,抽梢差。接后不能立即断砧 ,否则接苗因饥饿死亡。用大树根蘖枝、幼树和幼苗枝嫁接的假苗 ,可从苗木...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 奚声珂  杨彬  
核桃微枝嫁接是以组培繁殖的无根小苗(微枝)作接穗,嫁接在核桃幼苗(子苗)砧上,获得无性系良种苗。连续3a对组培快速繁殖微枝、子苗培育及嫁接等技术环节的探索,已初见成效。微枝增殖率1a后为1:1 000以上;最适时期(3月初至4月上旬)的嫁接成活率可达80%;嫁接苗的田间移植保存率在90%以上。核桃微枝嫁接比常规嫁接方法成本低、成苗快,并能在短期内用离体快繁法获得大量新品种穗条。微体嫁接苗以实生砧为根系,比组培自根苗长势旺,易于移植。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 邓延安  张卫强  
该文以 1 986— 1 995年龙渠青海云杉无性系种子园嫁接生产实践为基础 ,对影响青海云杉嫁接效果的因素 ,如嫁接人员操作的熟练程度 ,嫁接时间 ,嫁接方法 ,嫁接时的天气状况 ,接穗的质量、年龄、来源、存储方法 ,砧木的年龄、所处环境等进行了综合分析 .结果表明 :通过严格培训嫁接人员 ,在川灌区选择 4月下旬、林区选择 5月中旬 ,无风、无雨的天气 ,用髓心形成层贴接法 ,将长 8~ 1 2cm、粗 5~ 1 0mm的 1年生接穗嫁接在 8~ 1 2年生的砧木上 ,可大大提高嫁接成活率、萌芽率 ,加快接穗生长
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 梁荣纳  
短枝嫁接技术是松类无性繁殖技术的突破,具有如下特点:与常规嫁接相比可提高繁殖系数40~60倍[6];成活率、荫条率及成苗率分别在90%、85%、70%以上;操作技术简易;适于繁殖成龄优树;嫁接苗生长正常,并可提前开花结实;生产成本低,为常规枝接苗的1/5.此技术已用于油松种子园建设,效果良好.介绍到国外在欧洲赤松上初试成功,受到国外同行好评.
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