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[期刊] 林业科学研究  [作者] 李佳益   魏继华   宋娅婷   陈宁   张国昀   罗红梅   刘湘杰   何彩云  
[目的 ]研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(Trichostatin A, TSA)在20%聚乙二醇模拟干旱和干旱后复水条件下,对沙棘扦插苗叶片形态、光合指标、脯氨酸、丙二醛和脱落酸含量等生理特性和组蛋白去乙酰化酶、合成脱落酸和类黄酮相关基因表达的影响。[方法 ]测定沙棘扦插苗干旱相关生理指标,实时定量PCR检测基因表达量。[结果 ]1μmol·L-1TSA预处理的沙棘在同等干旱胁迫下耐旱性增强。与仅干旱处理相比,(1)叶片下垂和萎蔫程度降低,植株鲜质量下降程度更小,复水后植株恢复程度更大。(2)净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、PSII最大光化学效率Fv/Fm值、PSII有效光化学量子产量Y(Ⅱ)值和叶绿素相对含量(SPAD)值均显著上调,复水后均下调。(3)脯氨酸和类黄酮含量显著上调,丙二醛和脱落酸含量显著下调,复水后趋势相同。(4)组蛋白去乙酰化酶基因HrHDA6和HrHDA19、脱落酸合成相关基因ABF1和NAC2表达均显著下调,类黄酮合成相关基因C4H2和CHS4表达均显著上调,复水后趋势相同。[结论 ]TSA通过调控沙棘扦插苗生理和基因表达参与对干旱胁迫的响应,可以提高沙棘的抗旱性,该研究为深入解析组蛋白乙酰化影响沙棘抗旱的调控机制奠定重要基础。
[期刊] 林业科学  [作者] 刘文鑫  陈志成  代永欣  万贤崇  
【目的】通过比较转水通道蛋白基因Pt PIP1;3(Gen Bank登录号:MN795092 ptopip1.3)的84K杨与野生型植株的光合作用对干旱及复水的响应,分析该过程的限制因素,以期深入了解水通道蛋白PIP1在干旱胁迫及复水过程中对CO_2导度的调节作用及其对光合作用的影响。【方法】以杂交杨84K野生型及转Pt PIP1;3基因植株为研究对象,进行重度干旱胁迫(土壤含水量达到田间持水量的35%)及复水处理,测定气体交换及叶绿素荧光各个指标,计算叶肉导度(g_m)等参数,进而分析水通道蛋白在干旱条件及复水后对CO_2导度和光合作用的调节作用。【结果】转Pt PIP1;3基因84K杨在正常浇水下净光合速率(P_n)、气孔导度(g_s)和蒸腾速率(Tr)显著高于84K野生型。干旱胁迫至第6天,野生型和转基因植株光合作用都开始下降,且转基因植株光合作用下降速度更快,至第7天降到野生型同样的水平。干旱处理的第7~10天,转基因植株和野生型植株的g_s、g_m和P_n均显著低于各自对照(正常浇水植株),光化学淬灭(q_P)、光系统Ⅱ实际光化学效率(Ф_(PSⅡ))、电子传递速率(J_(flu))、最大羧化速率(V_(cmax))和最大电子传递速率(J_(max))也显著降低,此时2种植株的光合作用都主要受到叶肉导度的限制。在复水的3天过程中,转基因植株的光合作用恢复速度更快,而且叶绿素荧光参数能够恢复到正常水平,期间光合作用主要受到叶肉导度的限制;而野生型植株的光合参数以及叶绿素荧光参数都未完全恢复,其光合作用除了受到叶肉导度的限制外,还受到光合作用中生物化学过程的限制。【结论】叶肉导度是转水通道蛋白基因及野生型84K杨干旱胁迫和复水过程中光合作用的主要限制因素。在干旱胁迫后水通道蛋白基因过表达的转基因杨树光合作用恢复迅速,包括光系统Ⅱ性能的恢复,这有助于杨树适应自然界中经常发生的阶段性干旱胁迫。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 屈坤杰  李鹏  邓燕莉  王雨鑫  王济红  
【目的】探明干旱胁迫处理对豹皮樟扦插苗相关生物量及生理指标的影响,为制定其大田水分管理措施提供科学依据。【方法】采用盆栽控水,通过自然干旱的方法模拟干旱胁迫,以豹皮樟3年生扦插苗为研究对象,观察比较不同干旱胁迫处理扦插苗的相关生物量及生理指标的变化规律。【结果】土壤体积持水量与扦插苗的根系活力显著负相关,与春梢长度、春梢重量、根系干重和一级侧根数显著正相关,相关系数依次为-0.773、0.578、0.754、0.822和0.706。轻度干旱胁迫对豹皮樟春梢和根系生长无显著影响。处理组扦插苗的光合作用能力均较CK下降;中度和重度干旱胁迫的光合午休时间为11:00—13:00,较CK的光合午休时间提前;轻度干旱胁迫无明显午休现象,在13:00后光合作用能力增强。豹皮樟扦插苗通过降低氮代谢速率适应干旱逆境,扦插苗叶片中的可溶性糖和游离脯氨酸的含量与土壤体积含水量显著负相关,相关系数分别为-0.792和-0.832;可溶性糖含量在中度胁迫条件下最高(111.49%),Pro含量在重度胁迫条件下最高(0.249%),轻度胁迫条件下的可溶性糖含量和Pro含量与CK无显著差异。豹皮樟扦插苗叶片的SOD酶活性与叶绿素含量和MDA浓度显著正相关,相关系数分别为:0.697和0.712;POD酶活性与土壤体积持水量显著正相关,相关系数为0.778,Pro含量与土壤体积持水量显著负相关,相关系数为-0.832;豹皮樟扦插苗在轻度干旱胁迫条件下,光合和呼吸代谢变缓,SOD酶将O~(2-·)歧化成H_2O_2的能力下降,以降低叶片细胞中H_2O_2和MDA等有害物质的积累来适应逆境。【结论】豹皮樟扦插苗具有抗轻度干旱胁迫的能力。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 刘瑞  王晨兆  马玉花  
筛选中国沙棘全长转录组数据中差异表达的HrP5CS基因,对其进行生物信息学分析和不同胁迫下各部位表达模式的研究,同时测量叶中脯氨酸含量变化趋势。结果表明:HrP5CS基因全长为2 127 bp,编码708个氨基酸,不含信号肽、无跨膜结构的稳定疏水蛋白。与30个同源序列比对表明,氨基酸长度、理论等电点和分子质量相近;聚类分析表明,P5CS蛋白存在明显科属特性,在同科不同属内亲缘性较近;多重序列比较中中国沙棘HrP5CS与Ziziphus jujuba var. spinosa亲缘性最近且序列一致性最高。荧光定量结果表明,HrP5CS基因在中国沙棘各部位特异性表达,在中国沙棘根和叶中总体呈上升状态、在复水后下降至正常水平,在茎中第2天达到最高值后持续下降至最低值复水后回到正常水平。脯氨酸含量在随着干旱胁迫时间的持续呈阶梯式上升的趋势,SPSS皮尔森相关系数分析发现,根和茎中HrP5CS基因表达量与叶中脯氨酸呈正相关关系,而在叶中则呈负相关关系。以上结果说明HrP5CS基因表达和脯氨酸的积累对中国沙棘抗旱具有重要意义。
[期刊] 农业现代化研究  [作者] 贺再新  孟桂元  孙焕良  周清明  贺勇  
以中苎1号、湘苎3号、Tri-1和新品系R057共4个苎麻品种(系)为材料,研究了插条不同扦插深度对苎麻低位分枝扦插苗的成苗率、主茎高度增加量、单株干重及分枝特性的影响。结果表明:4个苎麻品种(系)低位分枝扦插苗的成苗率、主茎高度增加量、单株根系干重、叶干重和分枝干重都表现为扦插深度1.5cm>3.0cm>4.5cm处理,且处理间差异显著;分枝数、分枝长度、最低和最高分枝位长也表现出随插条深度增加而明显降低。综合考虑,苎麻低位分枝扦插苗培育时,扦插深度以1.5cm左右较为理想。
[期刊] 林业科学  [作者] 杨佳骏  吴永波  张燕红  
【目的】研究‘南林895杨’扦插苗生长与细胞超微结构对高温、干旱及其复合胁迫的响应,探讨胁迫下叶片形态、生长与细胞超微结构损伤程度之间的关联机制,以期从形态和细胞学角度研究对不同胁迫响应机制的差异。【方法】‘南林895杨’扦插苗,设置不同的温度和水分梯度,比较高温、干旱单因素胁迫及复合胁迫下的扦插苗生长形态指标,并通过透射电镜观察超微结构变化。【结果】1)在高温、干旱单一胁迫和复合胁迫下,杨树地径、株高、生物量、叶分配指数均有不同程度下降,叶缘分裂程度、根茎比和根分配指数增大,复合胁迫对生长形态指标的影响大于单一胁迫; 2)在高温、干旱单一和复合胁迫下,扦插苗叶片超微结构均受到不同程度的损伤,表现为叶绿体膨胀,膜系统紊乱,基粒片层扩张消融,嗜锇颗粒数量增多,淀粉颗粒减少以及重度胁迫下细胞排列松散。超微结构损伤程度与胁迫强度基本一致,重度高温胁迫比干旱胁迫对超微结构的影响更显著,复合胁迫对幼苗超微结构的影响大于单一胁迫。【结论】高温、干旱胁迫下叶片超微结构的损伤影响植物的光合作用和细胞内环境的稳定,正常的生理过程受到影响,并最终反映在植物生长形态变化上。‘南林895杨’扦插苗叶片超微结构的损伤程度与形态结构的变化基本一致,说明从形态和细胞学角度来揭示植物的胁迫响应机制是可行的。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 余丽娟  田又升  张成双  徐齐雯  慕自新  
【目的】研究干旱-复水的水分动态变化及品种遗传特性对小麦水孔蛋白基因PIP2表达的影响,揭示小麦生理抗旱性的分子机制。【方法】以抗旱性差异较大的2个小麦品种"陕合6号"(抗旱)和"郑引1号"(干旱敏感)为材料,于幼苗培养至8d时,采用渗透势为-0.4MPa的PEG-8000溶液模拟干旱胁迫处理,胁迫时间分别为0(对照),12,36,60h,胁迫60h后复水36h。运用半定量RT-PCR方法,研究从干旱胁迫到复水的整个过程中,水孔蛋白基因PIP2在2种小麦根系中的动态差异表达情况,以及根系水导、叶片相对含水量、游离脯氨酸含量和细胞膜相对透性的变化。【结果】正常水分条件下,"郑引1号"中PIP2的...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 吕中睿  刘宏  张国昀  于立洋  罗红梅  何彩云  
[目的 ]本研究通过系统检测沙棘UGT基因家族成员,探讨其结构特征及潜在功能,为解析沙棘类黄酮糖苷生物合成机制及其积累模式奠定基础。[方法 ]利用BLASTP和hmmsearch搜索沙棘基因组,并通过Pfam、CDD和SMART数据库验证保守结构域。使用Prot-Param、MUSCLE、MAGA7.0、MEME、MCScanX等工具分析蛋白理化性质、系统发育、蛋白基序和基因结构及基因复制事件。利用转录组数据和实时荧光定量PCR分析沙棘UGT基因在果实发育过程中的表达模式。[结果 ]本研究从沙棘基因组中鉴定出89个沙棘UGT基因,全部包含UGT基因家族保守结构域PSPG box。通过分析发现:沙棘UGT蛋白长度为266~533氨基酸,平均分子量50.00 KDa,平均等电点5.89。根据系统发育关系,可将89个沙棘UGT分为16个组,其中,A组包含最多的沙棘UGT基因家族成员。除7号染色体外,UGT基因共分布在11条沙棘染色体上。研究发现,串联重复是导致沙棘UGT基因家族扩张的主要复制事件。转录组分析和实时荧光定量PCR表明,大部分基因具有广泛的果实发育阶段特异性表达。[结论 ]本研究提供了沙棘UGT基因家族的完整信息,为进一步研究沙棘基因家族成员的生物学功能提供了数据参考和理论依据。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 吕中睿  刘宏  张国昀  于立洋  罗红梅  何彩云  
[目的 ]本研究通过系统检测沙棘UGT基因家族成员,探讨其结构特征及潜在功能,为解析沙棘类黄酮糖苷生物合成机制及其积累模式奠定基础。[方法 ]利用BLASTP和hmmsearch搜索沙棘基因组,并通过Pfam、CDD和SMART数据库验证保守结构域。使用Prot-Param、MUSCLE、MAGA7.0、MEME、MCScanX等工具分析蛋白理化性质、系统发育、蛋白基序和基因结构及基因复制事件。利用转录组数据和实时荧光定量PCR分析沙棘UGT基因在果实发育过程中的表达模式。[结果 ]本研究从沙棘基因组中鉴定出89个沙棘UGT基因,全部包含UGT基因家族保守结构域PSPG box。通过分析发现:沙棘UGT蛋白长度为266~533氨基酸,平均分子量50.00 KDa,平均等电点5.89。根据系统发育关系,可将89个沙棘UGT分为16个组,其中,A组包含最多的沙棘UGT基因家族成员。除7号染色体外,UGT基因共分布在11条沙棘染色体上。研究发现,串联重复是导致沙棘UGT基因家族扩张的主要复制事件。转录组分析和实时荧光定量PCR表明,大部分基因具有广泛的果实发育阶段特异性表达。[结论 ]本研究提供了沙棘UGT基因家族的完整信息,为进一步研究沙棘基因家族成员的生物学功能提供了数据参考和理论依据。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 贺再新  孟桂元  孙焕良  周清明  贺勇  
以4个苎麻品种为材料,研究苎麻低位分枝扦插苗的扦插密度与成苗率、单株根干重、主茎高度增加量、单株叶干重及分枝特性的相关性.结果表明,苎麻低位分枝扦插苗的扦插密度与单株根干重、主茎高度增加量、单株叶干重、分枝位长之间呈极显著负相关,与单株平均分枝数、单株分枝干重之间呈显著负相关,与最低分枝位之间呈极显著正相关,不同品种间有差异.综合考虑,苎麻低位分枝扦插苗的扦插密度以10cm×10cm较为理想.
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 杨立学  王海南  范晶  
研究了母株年龄、植物生长调节剂与其浓度对俄罗斯大果沙棘嫩枝扦插生根效果的影响。结果表明:所有因素对插穗生根率、生根数与平均根长均影响极显著(P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 林凡云  胡银岗  宋国琦  何蓓如  
为探索在干旱后复水条件下糜子抗旱种质的基因表达特点,寻找与其复水后快速恢复生长相关的基因,利用抑制消减杂交(Suppressive subtraction hybridization,SSH)技术,以糜子干旱后复水处理叶片的cDNA为tester,干旱胁迫处理叶片的cDNA为driver,构建了一个抑制消减杂交文库。在文库中随机选取100个克隆(插入片段≥250 bp)测序,所获序列去除载体、引物及接头序列后,利用NCBI的BLAST序列比对分析软件分别对GenBank的dbEST数据库和非冗余蛋白数据库进行序列比对分析。序列同源性分析显示,文库中序列的同源基因主要以与新陈代谢、能量代谢、转录...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 贺再新  孙焕良  李必湖  曾晓珊  李罗先  贺勇  孟桂元  伍波  朱洁文  张海星  
以4个苎麻品种为材料,研究了苎麻低位分枝扦插苗的插条长度与成苗率、单株根干重、主茎高度增加量、单株叶干重及分枝特性的相关性.结果表明:苎麻低位分枝扦插苗的插条长度与单株叶干重、单株分枝数、最低分枝位、最高分枝位、分枝位长均呈极显著正相关,而与成苗率、单株根干重、主茎高度增加量均呈极显著负相关,但不同品种间有差异.综合考虑,苎麻低位分枝扦插苗的插条长度在5~10 cm较为理想.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王奇燕  张振文  宋晓菊  杜小刚  丁春晖  
【目的】研究AM菌剂接种对酿酒葡萄赤霞珠(Cabernet sauvignon)生长和耐旱性的影响,为AM菌剂在生产实践中的推广应用提供理论依据。【方法】在盆栽试验条件下,用摩西球囊霉(Glomus mosseae,简称Gm)、幼套球囊霉(Glomus etunicatum,简称Ge)和Gm+Ge混合菌剂接种处理赤霞珠葡萄扦插苗,以接种高温灭菌的等量菌剂为对照,于接种处理100 d后,测定菌剂接种处理对赤霞珠植株的侵染率和营养生长的影响。随后进行了30 d的干旱胁迫,对不同菌剂处理后葡萄扦插苗的抗旱性进行了比较。【结果】接种AM菌剂能显著提高赤霞珠葡萄的生长量,并且菌根依赖性与赤霞珠根系菌根侵...
[期刊] 华北农学报  [作者] 韩烨  周志江  王培培  张丽霞  
从乳酸片球菌中提取质粒DNA作为模板,根据GeneBank公布的细菌素结构基因,设计一对特异性引物,进行PCR扩增片段,将该片段定向克隆到pTA2载体,测序,与发表的基因序列比较,同源性为100%,然后克隆到表达载体Pet-28a,转化到Escherichia coli DH5α,经过卡那霉素平皿筛选,质粒酶切,PCR两步验证,获得阳性重组质粒,并转化表达宿主菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳,显示在4 600 Da处出现条带,与已报道的细菌素分子量大小符合。表达产物对单核细胞增多症李氏杆菌有抗...
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