【目的】探究晒田环境胁迫下克氏原螯虾卵巢发育相关生化指标和激素的变化及对卵巢发育的影响，为晒田环境胁迫促进克氏原螯虾卵巢成熟这一生产操作的改良和标准化提供理论依据，促进克氏原螯虾产业可持续发展。【方法】将2个面积为1300m~(2)的池塘中投放的克氏原螯虾分别作为晒田组和对照组，以晒田组排干水为试验起点，晒田组排水晒田10d，对照组正常养殖。分别在晒田环境胁迫0、3、7、10 d采集2组中的雌性克氏原螯虾，每次采样数量为30只，测量、称重后取卵巢、肝胰腺和血清，检测卵巢发育相关的生化指标[碱性磷酸酶（AKP/ALP）、酸性磷酸酶（ACP）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、前列腺素F2α（PGF2α）、前列腺素E2（PGE2）]、性类固醇激素[雌酮（Estrone）、17β-雌二醇（17β-E2）、睾酮（T）、孕酮（PROG）]、高血糖家族激素[高血糖激素（CHH）、性腺抑制激素（GIH）、蜕皮抑制激素（MIH）、大颚器抑制激素（MOIH）]和卵巢发育相关激素[蜕皮激素（Ecdysone）、甲基法尼酯（MF）、皮质醇（Cortisol）]，并进行对比分析。【结果】随着时间增加，晒田组雌性克氏原螯虾卵巢成熟率高于对照组，卵巢发育分期主要分布在IV期。生化指标试验结果表明，晒田胁迫0 d时，晒田组雌性克氏原螯虾不同组织中AKP/ALP、ACP、GSH-Px、PGF2α和PGE2含量均显著低于对照组（P<0.05，下同）或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异（P>0.05，下同）；晒田胁迫3和7 d时，晒田组雌性克氏原螯虾不同组织中生化指标含量均显著高于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异；晒田胁迫10 d时，晒田组雌性克氏原螯虾不同组织中生化指标含量均显著高于对照组雌性克氏原螯虾。性类固醇激素试验结果表明，晒田胁迫0和3 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中Estrone、17β-E2、T和PROG含量显著高于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异；晒田胁迫7和10 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中性类固醇激素均显著高于对照组雌性克氏原螯虾。高血糖家族激素试验结果表明，晒田胁迫0 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中CHH、GIH、MIH和MOIH含量均显著高于对照组雌性克氏原螯虾；晒田胁迫3和7 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中高血糖家族激素含量显著高于、低于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异；晒田胁迫10 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中高血糖家族激素显著低于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异。卵巢发育相关激素试验结果表明，晒田胁迫0 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中Ecdyone、MF和Cortisol含量均显著高于、低于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异；晒田胁迫3 d时，晒田组雌性克氏原螯虾血清中卵巢发育相关激素显著高于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异；晒田胁迫7和10 d时，晒田组中卵巢发育相关激素均显著高于对照组。【结论】晒田环境胁迫能促进克氏原螯虾卵巢成熟，加快卵巢发育相关生化指标和激素的变化。晒田胁迫7～10 d时，促进卵巢发育成熟的效果达峰值。

【目的】研究克氏原螯虾在晒田环境胁迫条件下卵巢组织学特点、卵黄蛋白原浓度及营养物质代谢水平的变化，探索其性成熟过程中体内营养物质变化相关机制，为晒田环境胁迫促进克氏原螯虾卵巢成熟这一生产操作的改良和标准化提供参考依据。【方法】试验对象分为晒田组与对照组克氏原螯虾，在晒田胁迫0、3、7、10 d时分别采集30只雌性克氏原螯虾，取卵巢进行石蜡切片和HE染色，并采集试验组的卵巢、肝胰腺和血清，检测卵黄蛋白原mRNA表达水平和浓度及营养物质代谢水平。【结果】雌性克氏原螯虾在晒田胁迫期间共鉴定出4个卵巢发育阶段，包括卵黄发生前阶段(I期，卵巢为黄色，卵母细胞直径150～250 μm)、初级卵黄发生阶段(II期，卵巢为橙色，卵母细胞直径250～600 μm)、次级卵黄发生阶段(III期，卵巢为棕色，卵母细胞直径高于600 μm)、成熟阶段(IV期，卵巢为黑褐色，卵母细胞直径高于1000 μm)。晒田胁迫0 d时，晒田组与对照组雌性克氏原螯虾卵巢成熟率相似；晒田胁迫10 d时，晒田组雌性克氏原螯虾卵巢成熟率升至96.67%，而对照组仅升至60.00%。随着胁迫时间增加，晒田组和对照组雌性克氏原螯虾的卵巢与肝胰腺的卵黄蛋白原mRNA相对表达量均呈上升趋势，且卵黄蛋白原mRNA在肝胰腺的相对表达量大于卵巢；试验期间，晒田组和对照组雌性克氏原螯虾卵黄蛋白原在肝胰腺的表达总量均大于在卵巢的表达总量，且卵黄蛋白原在肝胰腺的贡献率均大于在卵巢的贡献率。晒田组与对照组雌性克氏原螯虾卵巢、肝胰腺和血液中的卵黄蛋白原浓度均随时间增加呈现上升趋势；晒田组浓度上升幅度大于对照组，肝胰腺卵黄蛋白原浓度与卵巢卵黄蛋白原浓度、肝胰腺卵黄蛋白原浓度与血清卵黄蛋白原浓度、卵巢卵黄蛋白原浓度与血清卵黄蛋白原浓度呈极显著正相关（P<0.01）。随着晒田胁迫时间增加，晒田组和对照组雌性克氏原螯虾血蓝蛋白（Hem）、总蛋白（TP）、乳酸（LA）和葡萄糖（Glu）含量均呈现下降趋势，晒田组的下降幅度大于对照组；晒田组和对照组雌性克氏原螯虾甘油三酯（TG）和胆固醇（TC）含量呈现上升趋势，晒田组的上升幅度大于对照组。【结论】晒田环境胁迫期间共鉴定出4个克氏原螯虾卵巢发育阶段。随胁迫时间增加，克氏原螯虾不同组织卵黄蛋白原mRNA相对表达量和浓度均呈上升趋势，卵黄蛋白原的肝胰腺贡献率大于卵巢贡献率。克氏原螯虾体内Hem、TP、LA和Glu含量降低，TG和TC含量升高，表明晒田环境胁迫对卵巢发育具有积极作用。

采用埋植和离体方法进行克氏原螯虾的大颚器（ＭＯ） 对卵巢发育作用的研究。埋植大颚器７ 次能显著提高成熟系数和促进卵径增大。处于不同卵巢发育时期的克氏原螯虾大颚器提取物（ ＭＯＥ） 的离体研究发现，卵黄发生期的ＭＯＥ对初级和次级卵黄发生期卵径增大均有极显著的作用，而对卵黄发生前期的卵径增大无作用。处于卵巢发育早期的ＭＯＥ对卵黄发生期卵巢小块总ＲＮＡ含量升高无显著作用；处于卵黄发生前期、卵黄发生期和恢复期卵巢的ＭＯＥ对卵黄发生期的卵巢小块总ＲＮＡ含量升高均有极显著作用。ＭＯＥ的作用基本与保幼激素类似物－ ＺＲ５１５ 相似。研究结果表明卵黄发生期卵巢对ＭＯＥ较敏感；卵黄发生期的ＭＯＥ 的生物效应最强...

为了研究5-HT与DA阳性物质在克氏原螯虾(Procambrus clarkii)不同发育时期的卵巢细胞和肝胰腺细胞中的分布特征,运用免疫组化法对卵巢发育4个不同时期的卵巢与肝胰腺进行观察。结果表明,各期卵巢卵细胞和肝胰腺细胞中均存在5-HT与DA阳性物质。Ⅰ期卵巢5-HT阳性物质分布于卵母细胞胞核,胞质未出现阳性;Ⅱ期～Ⅳ期5-HT阳性物质主要集中在卵母细胞胞质以及胞核。在发育各期的肝胰腺中5-HT的免疫物质均呈阳性。Ⅰ～Ⅳ期卵巢中,DA阳性物质主要分布于卵母细胞的胞核以及肝胰腺细胞,其强度呈递减趋势。结果提示5-HT具有促进卵巢发育作用,而DA则抑制卵巢发育。

为了研究组织脂肪含量及脂肪酸组成在克氏原螯虾(Procambrus clarkii)卵巢发育过程中的变化,采用粗脂抽提及气相色谱分析法对卵巢发育5个不同时期肝胰腺和卵巢组织中脂肪含量及脂肪酸组成进行测定和分析,结果表明:(1)随着卵巢发育,卵巢指数由0.12%显著(P≤0.05)增加到6.64%,而肝胰腺指数由7.95%降至5.31%。(2)卵巢干重百分含量从Ⅰ期的22.29%增至Ⅴ期的55.16%,而干物质中的脂肪含量仅在Ⅱ期(32.38%)到Ⅲ期(41.90%)有一个显著增加过程,后期没有增加。(3)肝胰腺和卵巢中主要脂肪酸都有C16:0、C16:1n7、C18:0、C18:1n9、C18...

对不同发育期的克氏原螯虾的肝胰腺和性腺指数进行了测定,并采用甲醇抽提的方法,利用电化学发光免疫分析仪测定了克氏原螯虾不同发育期的卵巢和肝胰腺中孕酮和雌二醇的含量变化。结果表明,随着卵巢发育,发育初期肝胰腺指数随着发育的进行逐步增加,到初级卵黄发声期到达最大值后随之下降。卵巢中孕酮和雌二醇含量随着卵巢发育的程度而逐步提高,在初级卵黄发生期到达峰值,随后逐渐下降,在肝胰腺中有着相似的趋势,但是峰值出现稍晚,在次级卵黄发生期。

中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)亲体初始体质量为(80.228±6.270)g。实验采用2×3因子设计,设置pH 6.5条件下的3个硫化物浓度组LS1(0.1 mg/L)、MS1(0.33 mg/L)和HS1(1.0 mg/L),以及pH 8.5下的3个硫化物浓度组LS2(0.1 mg/L)、MS2(0.33 mg/L)和HS2(1.0 mg/L),共6个处理组;另设一个不添加硫化物的对照组CTR(自然pH值为7.5),设2个平行处理,分别在实验后第10天、20天和30天取样,以性腺指数(GSI)、卵巢卵黄磷蛋白(Lv)含量、卵巢Lv总含量和卵巢蛋白质含量的变化为评判指标,研...

研究了17β-雌二醇(17β-E2)对中华绒螯蟹卵巢发育以及内源雌激素水平的影响,以期阐明中华绒螯蟹卵巢发育调控机理。给予性腺发育高峰期(Ⅲ～Ⅳ期)的中华绒螯蟹雌蟹注射不同浓度17β-E2(10-3mg/g、10-4mg/g和10-5mg/g),结果表明:在卵巢发育Ⅲ期～Ⅳ期间,17β-E2有呈剂量依赖性促进中华绒螯蟹卵巢发育的特点,表现为:性腺指数增大,卵母细胞发育快,卵母细胞直径增大。中华绒螯蟹血淋巴中17β-E2含量有随卵巢发育逐渐降低的趋势,尤其在实验30d后有明显的下降,外源17β-E2能明显增加血淋巴中17β-E2含量。中华绒螯蟹卵巢中17β-E2含量有随卵巢的发育而迅速降低的特点...

法尼酸甲基转移酶(farnesoic acid O-methyl transferase,FA-O-MeT)具有催化法尼酸(farnesoic acid,FA)转变成甲基法尼酯(methyl farnesoate,MF)的功能。运用放射化学法对克氏原螯虾不同发育期大颚器(mandibular organ,MO)FA-O-MeT的酶活进行了分析,并探讨了眼柄因子对FA-O-MeT酶活的调控。结果表明,克氏原螯虾MO中的FA-O-MeT酶活左、右侧对称,差异不显著(P>0.05);FA-O-MeT酶活随卵巢发育呈周期性变化,次级卵黄发生期的MO酶活最高,达到61.75 pmol/(p.h);镊烫法...

实验通过活体注射、养殖实验和荧光定量PCR等方法,研究了不同浓度TAM对三疣梭子蟹雌体成活率、卵巢指数、肝胰腺指数及卵巢发育相关基因表达的影响,旨在探讨雌激素对甲壳动物卵巢发育的作用机制。结果显示,不同浓度TAM对雌体存活率和肝胰腺指数均无显著影响,但在一定程度上抑制了卵巢指数。不同组织中的卵黄蛋白原(Vg)、雌激素相关受体(ERR)、维甲酸受体(RXR)和蜕皮激素受体(EcR)基因表达均受到了TAM的影响:Vg基因在卵巢和肝胰腺中的表达水平明显受到TAM的抑制;低浓度TAM组(6.7和13.4μg/g)

为确定克氏原螯虾(Procambarus clarkii)胚胎和幼体发育的最佳温度,设置19、22、25、28℃4个温度,观察各温度条件下克氏原螯虾胚胎和幼体发育过程,记录不同温度下胚胎和幼体阶段的成活率、发育速率、生物学零度和有效积温。结果显示:温度对克氏原螯虾胚胎孵化率、孵化时间及幼体发育速率和成活率均有显著影响,在试验温度(19～28℃)范围内,胚胎发育进程随温度升高而加快,19℃和28℃条件下胚胎孵化时间分别为(622.67±6.02) h和(349.67±4.63) h;胚胎孵化率随温度升高呈现"先升后降"的趋势,在22℃时孵化率最高,为91.03%±2.97%,28℃时孵化率最低,仅为40.53%±4.97%;幼体发育时间随温度升高而缩短,19℃和28℃条件下幼体阶段发育所需时间分别为(304.00±10.73) h和(194.00±9.03) h;幼体成活率随温度升高呈现"先升后降"的趋势,水温22℃时,成活率最高(94.37%±1.60%),水温28℃时,成活率最低(82.67%±1.51%)。采用Sanderson-Pearis公式,计算得出克氏原螯虾胚胎和幼体发育的生物学零度分别为7.32、3.29℃。根据所建立的胚胎和幼体发育的温度依赖性发育模型推算出,克氏原螯虾胚胎和幼体发育的最适温度分别为22.06和22.78℃。综合各项指标,建议克氏原螯虾人工繁育过程中胚胎和幼体发育的温度范围设置为22～25℃。

采用石蜡切片技术，结合生物酶的测定，以体重（２５．８８±４．４０）ｇ的克氏原螯虾（Ｐｒｏｃａｍｂａｒｕｓ ｃｌａｒｋｉｉ）为研究对象，研究了低ＰＨ胁迫对克氏原螯虾鳃和肝胰腺生理代谢与组织结构的影响。在得出９６ Ｈ ｌｃ５０的基础上，将克氏原螯虾暴露于半致死浓度ＰＨ水体中９６ Ｈ，以ＰＨ７．６作为对照，并于胁迫后０ Ｈ、２ Ｈ、８ Ｈ、２４ Ｈ、９６ Ｈ采集鳃和肝胰腺样品，测定鳃部分代谢酶和肝胰腺主要抗氧化指标，并对鳃和肝胰腺组织进行切片观察。实验结果表明，ＰＨ ９６ Ｈ ｌｃ５０为３．６７５。低ＰＨ暴露后，实验组鳃Ｎａ～＋－ｋ～＋－ａＴＰ酶和乳酸脱氢酶（ｌａｃＴａＴｅ ｄｅＨｙｄｒｏｇｅＮａｓ．．．

利用RACE技术获得了UB-E2基因c DNA全长,通过RT-PCR技术研究UB-E2基因在不同组织、发育时期的表达量和17α-羟孕酮激素刺激后UB-E2表达量及性腺发育情况。结果表明:该基因序列全长3 943bp,开放阅读框675 bp,编码224个氨基酸,相对分子量23. 93 ku,等电点8. 61,82～219位氨基酸序列为泛素结合酶家族特有的结构域。氨基酸序列比对发现,克氏原螯虾UB-E2基因与节肢动物UB-E2基因有较高的同源性;系统进化分析表明,UB-E2基因与凡纳滨对虾和斑节对虾聚为一支。荧光定量结果显示,UB-E2基因在克氏原螯虾卵巢组织中的表达量显著高于其他组织(P

采用组织学方法、形态测量法、放射免疫法(RIA)等技术方法,研究了人工养殖条件下条斑星鲽雌性亲鱼卵巢发育成熟和性类固醇激素的年周期变化规律。结果表明,条斑星鲽属于非同步分批产卵类型。卵母细胞按其组织学特点可分为6个时相,卵巢发育依据其形态特征可划分为相应的6个时期。卵巢年周期发育过程中,性腺指数(GSI)、肝脏指数(HSI)和肥满度(CF)发生变化,表现出与性腺发育协同一致的变化规律。统计分析表明,卵巢年周期发育过程中,GSI和HSI值与CF值都存在显著的正相关关系,GSI值的变化与水温调控呈显著的负相关关系。亲鱼血浆中雌二醇(E2)在6月份开始升高,9月份达到年周期中的第1个小高峰,翌年2月...

采用多次肌肉注射黄体生成素释放激素(luteinizing hormone releasing hormone,LHRH-A2)和鲤脑垂体匀浆(carp pituitary extract,CPE)的方法诱导花鳗鲡卵巢发育成熟。在任意挑选的15尾实验组鱼中,5尾卵巢发育完全成熟,平均性腺系数(gonadosomatic index,GSI)为(20.9±5.04)%(最大达到27.3%);5尾卵巢发育至成熟期,平均GSI为(7.2±2.86)%;5尾卵巢发育至卵黄生成期,平均GSI为(2.32±1.5)%;而对照组的性腺停留在未发育的Ⅱ期[GSI为(1.18±0.39)%],这表明注射的激素能...