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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 梁雅旭  邓凯平  张真  高霄霄  王智博  王锋  樊懿萱  
[目的]本试验旨在探究日粮中添加富含多不饱和脂肪酸的15%紫苏籽(PFS)对湖羊肝脏自噬和凋亡的影响。[方法]选取30只体重相近且健康状况良好的2月龄湖羊公羔,随机分为2组,分别饲喂含0%(对照)和15%PFS的日粮。饲养84 d后,每组随机选择5只羊屠宰,采集肝脏组织。通过qPCR和Western blot等技术检测肝脏中自噬、凋亡及LKB1-AMPK-MTOR信号通路相关基因与蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比,15%PFS显著上调PPARGC1A、BECN1、ATG5、ATG7基因和PPARGC1A、BECN1蛋白表达水平(P0.05);15%PFS组肝脏组织中LKB1-AMPK-MTOR通路关键基因LKB1、AMPK和MTOR mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05)。[结论]紫苏籽可能通过调控LKB1-AMPK-MTOR信号通路和自噬相关基因与蛋白的表达水平,进而调控湖羊肝脏自噬进程。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 梁雅旭  邓凯平  张真  高霄霄  王智博  王锋  樊懿萱  
[目的]本试验旨在探究日粮中添加富含多不饱和脂肪酸(polyunsaturatedfatty acids, PUFA)的15%紫苏籽(perilla frutescens seed, PFS)对湖羊肝脏自噬和凋亡的影响。[方法]选取30只体重相近且健康状况良好的2月龄湖羊公羔,随机分为两组,分别饲喂含0%和15% PFS的日粮。饲养84 d后,每组随机选择5只羊屠宰,采集肝脏组织。通过qPCR和Western blot等技术检测肝脏中自噬、凋亡及LKB1-AMPK-MTOR信号通路相关基因与蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比,15% PFS显著上调PPARGC1A、BECN1、ATG5、ATG7基因和PPARGC1A、BECN1蛋白表达水平(P < 0.05),对凋亡相关基因的表达水平无显著影响(P > 0.05);15% PFS组肝脏组织中LKB1-AMPK-MTOR通路关键基因LKB1、AMPK和MTOR mRNA表达水平显著高于对照组(P < 0.05)。[结论]紫苏籽可能通过调控LKB1-AMPK-MTOR信号通路和自噬相关基因与蛋白的表达水平,进而调控湖羊肝脏自噬进程。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李英奇  梁雅旭  高霄霄  万珍  张国敏  王锋  
[目的]本试验旨在探讨高能饲粮对湖羊肝脏组织细胞增殖、能量代谢和脂代谢相关基因表达的影响。[方法]选取36只体况良好、体质量相近的3月龄湖羊公羔,随机分为正常日粮组(CON)和高能日粮组(HE),每组3个重复,每个重复6只。CON组和HE组个体饲喂日粮的能量水平分别为10和11 MJ·kg~(-1)。预饲14 d后正式饲喂60 d,试验结束后屠宰并采集肝脏组织,用于H&E染色、免疫组化检测和荧光定量PCR(qPCR)、Western blot检测。[结果]H&E染色显示HE组湖羊肝脏组织中出现轻度空泡样变性;免疫组化发现PCNA蛋白主要表达于肝细胞核中,mTOR和LXRα蛋白主要定位在肝细胞质中。高能饲粮饲喂显著提高肝脏组织PCNA和SREBP-1c的mRNA与蛋白表达水平(P<0.05),显著降低肝脏组织LKB1和AMPK的mRNA与蛋白的表达水平(P<0.05),显著降低肝脏组织PGC-1α和SIRT1的蛋白表达水平(P0.05)。[结论]提高湖羊的日粮能量水平能增强湖羊肝脏组织的细胞增殖及脂肪合成能力。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张国敏  程春雨  刘建玲  安世钰  张婷婷  王子玉  孟繁星  樊懿萱  雷治海  王锋  
[目的]本试验旨在探究早期能量限饲与后期能量补偿对湖羊生长性能、肝脏组织中Hippo信号通路核心基因和AMPK蛋白表达的影响。[方法]选择32只系谱背景清楚、体质量相近的3月龄雄性湖羊羔羊,随机均分为对照组和补偿生长组。试验分为能量限饲(60 d)和补偿(90 d)2个阶段,能量限饲阶段对照组和试验组饲喂日粮的代谢能分别为11.64和6.84 MJ·kg~(-1),在能量补偿阶段日粮的代谢能均为12.86 MJ·kg~(-1)。饲养结束后屠宰,测定,再通过RT-qPCR和Western blot检测肝脏组织中Hippo通路核心基因和AMPK蛋白的表达变化。[结果]在能量限饲阶段,与对照组相比,能量限饲显著降低了补偿组湖羊的肝脏质量和体质量(P<0.05),湖羊肝脏组织中Hippo通路核心基因和YAP1蛋白的表达量显著降低(P<0.05),而AMPK的mRNA和蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05)。在能量补偿阶段,补偿组湖羊的肝脏质量和体质量、湖羊肝脏组织中Hippo通路核心基因(除YAP1外)的表达量和AMPK蛋白的磷酸化水平均与对照组差异不显著。[结论]湖羊在适当水平的能量限饲后进行补偿处理具有补偿生长现象,Hippo通路和AMPK蛋白可能共同参与不同营养水平下对湖羊肝脏发育的调节。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 姜雪元  张树坤  张源淑  
采用双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)结合MAIDI-TOF/TOF质谱方法分析不同精粗比日粮条件下肝脏蛋白/酶表达谱的差异,探讨不同精粗比日粮条件下肝脏糖脂代谢与乳脂肪合成的关系及可能机制。8只健康的泌乳中期山羊随机分为2组,日粮精粗比分别为4∶6(低精料)和6∶4(高精料),采用2×2拉丁方设计,2次重复。取乳样,测定产奶量和乳中甘油三酯(TG)的含量,并进行活体肝脏穿刺取样,应用双向电泳技术对肝脏样品进行蛋白表达谱分析。试验结果表明:与低精料组相比,高精料组山羊日平均产奶量显著增高(P<0.05),而乳中TG含量显著降低(P<0.05)。...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 夏雨婷  万永杰  姜志洋  陈琪  茆达干  
[目的]本研究旨在探究夏季日粮添加酵母硒对湖羊血液指标和睾丸发育的影响,解析酵母硒影响睾丸功能的潜在分子机制。[方法]将96只4月龄雄性湖羊按体重相近原则分为对照组(Con,基础日粮)和酵母硒组(Se,基础日粮+酵母硒0.4 g·kg~(-1))。预试期1周,正试期4周,记录体重变化;收集血液检测生化、抗氧化与免疫相关指标;采集睾丸组织,测量质量和大小及其硒浓度,HE染色观察组织学形态(HE),转录组测序(RNA-seq)分析差异基因。[结果]Se组平均日增重显著高于Con组(P0.05),但Se组睾丸中硒浓度极显著高于Con组(P<0.01)。与Con组相比,Se组血清游离脂肪酸(NEFA)浓度显著升高(P<0.05),血浆IgA、IgG和IgM浓度极显著升高(P<0.01),血清和睾丸组织中GSH-Px活性均极显著升高(P<0.01)。HE结果显示生精小管中有精子出现,Se组生精细胞排列更紧密且生精上皮厚度极显著增加(P
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 贾慧娜  罗海玲  刘昆  左兆云  张玉伟  王朕朕  
为克隆滩羊肝脏α-生育酚转移蛋白(α-TTP)CDS区基因并构建其原核表达载体,通过Trizol法提取滩羊肝脏组织总RNA,将其反转录为cDNA后利用人工合成和PCR扩增相结合的方法得到α-TTP CDS区基因,并将其克隆至原核表达载体pET28a,命名为pET28a-TTPA。结果表明:扩增了滩羊肝脏α-TTP CDS区基因,同已公布的绵羊α-TTP序列同源性达99.76%,并且将其成功克隆至原核表达载体pET28a。结果为后续α-TTP基因原核表达及其抗体的制备奠定了基础。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 刘国庆  黄治国  刘振山  王新华  刘守仁  杨利国  
目的通过对羔羊IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因表达的发育性变化的研究,为羔羊生长发育规律提供理论依据。方法选择2、30、60、90和120日龄的雄性哈萨克羊和新疆细毛羊各6只(共54只,120日龄只有新疆细毛羊),测体重后屠宰,采取肝脏,用荧光实时定量PCR法,以GAPDH基因为内标,检测IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因的发育性变化,并进行品种之间比较。结果(1)肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量都呈先升后降的趋势,其中雄性哈萨克羊肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量从2日龄到60日龄持续上升,60日龄后开始下降,90日龄的表达量显著低于前三个时期(P<0.05);雄性新疆细毛羊肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量从2日龄到90...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘慧娟  张佳琦  庄苏  周斌斌  李健  张莉莉  王恬  王超  
[目的] 本试验旨在探讨日粮添加姜黄素对宫内发育迟缓(IUGR)猪肝脏抗氧化功能及脂代谢的影响。[方法] 择取分娩时间与遗传背景相似的妊娠母猪12头,分娩当日,从每窝新生仔猪(杜×长×大)分别选择1头正常出生重(NBW,1.51±0.02 kg)和2头IUGR(0.75±0.02 kg)仔猪,26 d断奶分为NBW,IUGR和IUGR+姜黄素(Curcumin,Cur)3组,每组6个重复,每个重复2头猪。NBW和IUGR组饲喂基础日粮,IUGR+ Cur组饲喂基础日粮+ 200 mg·kg~(-1)姜黄素,饲养至195 d后每组随机选择6头猪屠宰取样分析。[结果] 1)在NBW、IUGR及IUGR+ Cur组之间,猪肝脏相对重量无显著差异(P>0.05)。2)与NBW组相比,IUGR猪血清和肝脏中过氧化氢酶(CAT)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量显著降低(P<0.05),甘油三酯(TG)水平显著升高(P<0.05),并显著提高了总超氧化物歧化酶(T-SOD)和CAT活性(P0.05),但IUGR+ Cur组猪肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和GSH、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量均显著高于IUGR组(P<0.05)。3)与NBW组相比,IUGR组猪肝脏中CAT的mRNA相对表达量显著减少(P<0.05),脂滴包被蛋白(PLIN)的表达量增加(P<0.05),PLIN表达量显著降低(P<0.05)。4)与NBW组相比,IUGR猪肝脏油红O染色面积显著增加(P0.05)。[结论] 日粮添加200 mg·kg~(-1)姜黄素可能通过Nrf2信号通路增强IUGR猪肝脏抗氧化功能,缓解氧化应激;并通过抑制PLIN基因表达,上调ATGL表达有效促进脂质分解代谢缓解IUGR猪脂质沉积。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘慧娟  张佳琦  庄苏  周斌斌  李健  张莉莉  王恬  王超  
[目的]本试验旨在探讨日粮添加姜黄素对宫内发育迟缓(IUGR)猪肝脏抗氧化功能及脂代谢的影响。[方法]择取分娩时间与遗传背景相似的妊娠母猪12头,分娩当日,从每窝新生仔猪(杜长大)分别选择1头正常出生重(NBW,约1.51 kg)和2头IUGR(约0.75 kg)仔猪,26日龄断奶后将所有仔猪分为NBW、IUGR和IUGR+姜黄素(curcumin, Cur)3组,每组6个重复,每重复2头猪。NBW和IUGR组饲喂基础日粮,IUGR+Cur组饲喂基础日粮+200 mg·kg~(-1)姜黄素,饲养至195日龄后每组随机选择6头猪屠宰并取样分析。[结果]在NBW、IUGR及IUGR+Cur组之间,猪肝脏相对质量无显著差异(P>0.05)。与NBW组相比,IUGR猪血清和肝脏中过氧化氢酶(CAT)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量显著降低(P<0.05),甘油三酯(TG)水平显著升高(P<0.05),并显著提高总超氧化物歧化酶(T-SOD)和CAT活性(P0.05),但IUGR+Cur组猪肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和GSH、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量均显著高于IUGR组(P<0.05),脂滴包被蛋白(PLIN)mRNA表达量增加(P<0.05)。此外,IUGR+Cur组猪肝脏激素敏感性脂肪酶(HSL)和脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)mRNA的相对表达量显著高于IUGR组(P<0.05)。与NBW组相比,IUGR猪肝脏油红O染色面积显著增加(P0.05)。[结论]日粮添加200 mg·kg~(-1)姜黄素可能通过Nrf2信号通路增强IUGR猪肝脏抗氧化功能,缓解氧化应激;并通过抑制PLIN基因表达,上调ATGL表达而有效促进脂质分解代谢,缓解IUGR猪脂质沉积。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 宋洪新  任战军  杨雪娇  贺国瑞  韩营  常万波  颉宏兵  
【目的】研究日粮能量水平对断奶至3月龄獭兔血液生化指标以及肝脏过氧化物酶体增殖剂激活受体γ基因(PPARγ)、胰岛素诱导基因2(INSIG-2)表达的影响。【方法】选用断奶的健康獭兔160只,随机分为4组,每组40只,4组试验兔的日粮能量水平分别为9.7,10.5,11.3和12.1MJ/kg,试验分断奶~2月龄、2~3月龄2个阶段。分别于试验开始的第30,60天早晨采血,测定血液中的葡萄糖、甘油三酯、总蛋白、总胆固醇、高密度胆固醇、低密度胆固醇含量及谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶活性;并取肝脏样品,采用实时荧光定量法测定PPARγ和INSIG-2基因的表达情况。【结果】在2月...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 龙萌  侯杰  苏玉晶  吴宁  李莉  张维然  孙博超  
酵母硒和茶多酚都是优质的天然抗氧化剂。酵母硒作为有机硒源,兼有抗氧化和免疫增强的双重功效。茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称,具有清除体内自由基、抗菌消炎和免疫调节等多种功效。为探讨酵母硒和茶多酚及其配伍对团头鲂(Megalobrama amblycephala)组织硒沉积量,肝中抗氧化酶活性及其基因m RNA表达的影响,本试验采用二因素三水平设计,在团头鲂幼鱼基础饲料中分别添加酵母硒(按硒计)3个水平(分别为0,0.25 mg/kg,0.50 mg/kg),茶多酚3个水平(分别为0,50 mg/kg,100 mg/kg),进行排列组合后得到9组日粮。选用体重为(1.75±0.01)g团头鲂1 3...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 刘海芳  王凡  姚卫云  
为探究三氯生(TCS)对于硬骨鱼类的凋亡相关基因表达的影响,以雄性斑马鱼(Danio Rerio)为试验动物,采用半静态水体接触染毒法,将斑马鱼分别置于质量浓度为17、34和68μg/L的TCS溶液中,并设计空白对照组,42 d后,对鳃组织进行采样,利用普通PCR和RT-qPCR技术分析雄性斑马鱼鳃组织凋亡基因Bcl-2、Bax、MDM2、p53的表达量。研究发现,与空白对照组相比,Bax和p53基因在TCS处理组中的表达量都出现了下调趋势,且在68μg/L的TCS处理组中表达水平显著下调;Bcl-2在各TCS处理组中无显著变化;MDM2基因在34μg/L和68μg/L TCS处理浓度组中表现为极显著上调。研究结果表明:高浓度TCS对雄性斑马鱼鳃组织凋亡相关基因的表达具有一定的影响。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张桂芳  石蕊  姜发彬  贾志新  沈向真  庄苏  
选择6只安装门静脉﹑肝静脉和股动脉慢性血管瘘的健康泌乳中期西农萨能奶山羊作为试验动物,采用2×2交叉试验设计,每组3只,试验日粮由精饲料和粗饲料组成,且精、粗饲料比例分别为4∶6(高粗料组,HF)和6∶4(高精料组,HC),研究不同精粗比日粮对泌乳中期奶山羊肝脏氨基酸代谢及乳产量、乳成分的影响。结果表明:门静脉血浆中高精料组异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、组氨酸、天冬氨酸、精氨酸、支链氨基酸(branched chain amino acid,BCAA)及总必需氨基酸(total essential amino acids,TEAA)浓度均高于高粗料组,且赖氨酸达到极显著水平(P<0.01)...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 曹洋  叶平生  荣超  李林  张瑜娟  张源淑  沈向真  
[目的]探究高精料日粮饲喂条件下,干奶期奶山羊肝脏中氨基酸的分配变化及其可能机制,为干奶期奶山羊的科学饲养管理提供理论基础。[方法]选用干奶期奶山羊12只,2×2拉丁方试验设计。前10 d为适应期,期间安装瘤胃瘘管并进行肝脏多血管瘘手术。适应期后,随机分为2组,分别饲喂精粗比为40∶60(对照组)和60∶40(高精料组)日粮,每期4周。每期试验结束,采集颈静脉、肝门静脉和肝静脉血液,采集饲喂后0、1、2、4、6、8和10 h的瘤胃液,采集肝脏组织。检测瘤胃液p h值,检测进出肝脏血液和肝脏组织匀浆液中FAA的含量及外周血液中脂多糖(LpS)和丙二醛(MdA)含量及超氧化物歧化酶(SOd)、肌酸...
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