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[期刊] 中国水产科学
[作者]
廖绍安 李筠 张晓华 纪伟尚 徐怀恕
日本对虾 (Penaeusjaponicus )亲虾体长 19～ 2 4 .5cm ,取其血清。 7种动物血液取自大白鼠、小白鼠、豚鼠、兔、鸡、羊、人。结果表明 :①虾血清分别在 2 8、37、5 6℃时热处理 30min ,其凝集活性不变 ,在 70℃和 80℃热处理 30min后凝集活性完全丧失。②血清在 pH为 5～ 7.5的TBS缓冲液中凝集活性稳定 ,在pH为 8～ 9之间凝集活性迅速下降。③凝集抑制实验表明半乳糖、甘露糖、L 阿拉伯糖、D 葡萄糖胺、N 乙酰 D 葡萄糖胺等 5种糖对血清凝集素都有较强的抑制作用 ,尤其D 葡萄糖胺和N 乙酰 D 葡萄糖胺的抑制作用更强。④交叉吸...
关键词：
日本对虾 血清凝集素 理化性质 凝集效价
[期刊] 中国水产科学
[作者]
廖绍安 李筠 张晓华 纪伟尚 徐怀恕
用日本对虾(Penaeusjaponicus)亲虾的血清与11株弧菌和7种脊椎动物的红细胞进行凝集反应实验,其中,溶藻弧菌HW283的凝集效价最高,达4096,而产气弧菌和海蛹弧菌的凝集效价最低,仅为8;与红细胞的凝集结果显示,对虾血清与大白鼠、小白鼠、豚鼠的红细胞反应较强,与鸡、人、山羊、兔的红细胞反应较弱。表明日本对虾血清中存在自然凝集素。养成期的日本对虾经弧菌菌苗免疫后,对该致病菌株的抵抗力获得提高。病原感染组、对照组和菌苗免疫组的对虾血清分别对豚鼠、大白鼠和小白鼠红细胞的凝集强度皆为感染组>对照组>免疫组。
关键词：
日本对虾 凝集素 免疫
[期刊] 中国水产科学
[作者]
彭其胜 郭文场 杨振国 王玉平
用饱和硫酸铵盐析、S 2 0 0 HR凝胶层析、DEAE sepharose离子交换层析从中国对虾 (Penaeuschi nensis)血淋巴液中分离出 1种凝集素 ,通过SDS PAGE测定 ,该凝集素由 2个亚基组成 ,分子量分别为80 0 0 0、750 0 0 ;此凝集素能凝集牛、马、鼠、兔、鸡、羊和人A、B、O型红细胞 ,其凝集活性不被D 甘露糖、D 果糖、D 乳糖、乙酰半乳糖、神经氨酸、D 葡萄糖、D 半乳糖和D 岩藻糖抑制 ;其最适血凝 pH为 6～ 8,Ca2 +不影响其凝集活性
关键词：
中国对虾 血淋巴液 凝集素 纯化
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
姚东瑞 盘赛昆 周鸣谦 葛荣荣
采用DEAE-SepharoseFF离子交换层析和Superdex20010/300GL凝胶过滤层析技术,从泥鳅血清中分离出两种天然凝集素MSL-I和MSL-Ⅱ。SDS-PAGE检测表明,MSL-I及MSL-Ⅱ均显示两条蛋白质着色带。采用凝胶过滤法测得MSL-I相对分子质量为25000,MSL-Ⅱ相对分子质量为82000。根据凝胶过滤测定及SDS-PAGE检测结果可知,MSL-Ⅱ由相对分子质量分别为29000和13600两种亚基组成,MSL-I的亚基组成有待进一步研究。MSL-Ⅱ能结合多种糖,其中对乳糖的亲和力最强。MSL-Ⅱ具有较强的热稳定性,在pH4～11范围内具有凝集活性,最适pH为6～...
关键词：
泥鳅 血清 凝集素 分离纯化
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张黎 袁媛 王娟 顾继锐 吴江 谢显连 徐恒
从南方鲇(Silurusmeridionalis)血清分离到一种天然的凝集素分子,能够凝集多种不同的抗原物质,其组成成分为糖蛋白,具有耐热和耐酸碱性,对β-巯基乙醇敏感。凝集反应受温度、离子强度以及时间等因素的影响。经糖的专一性抑制实验显示,蔗糖和半乳糖对凝集反应有抑制作用,说明这2种糖分子是凝集素在识别和凝集过程中起一定作用的糖分子。
[期刊] 水产学报
[作者]
彭其胜 郭文场 杨振国 王玉平 田相利
１９９９年８月，运用血凝活性测定法分别检测中国对虾血淋巴凝集素、血淋巴液、血细胞、肌肉、肠、肝胰腺和甲壳的血凝活力，并运用■啶橙血细胞吞噬测定法检测血细胞的吞噬活力，同时测定了经注射中国对虾副粘病毒提纯液后血淋巴凝集素血凝活力及血淋巴液抗菌活力、酚氧化酶活力、溶菌活力。结果表明，血淋巴凝集素主要分布在血淋巴液和血细胞中；该凝集素对人（Ａ、Ｂ、Ｏ型）、鸡和兔红细胞及其醛化红细胞的凝集具有一定专一性；对血细胞吞噬异物具有促进功能；注射副粘病毒提纯液后，血淋巴凝集素凝集活力变化和血淋巴液抗菌活力、酚氧化酶活力。溶菌活力变化相一致。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
高焕 赖晓芳 王伟继 孟宪红 孔杰
本研究探讨了7种细胞凝集素基因在中国对虾中应答白斑综合征病毒(WSSV)感染上的生物学功能差异。结果显示,LT1(DQ167572.1)、LT2(EU834289.1)、LT3(EU834292.1)和LT5(EU834290.1)是肝胰腺组织特异、受WSSV感染诱导表达的基因,其他3种基因主要在肌肉、肠和腮中表达,与WSSV感染诱导无明显相关;在应答WSSV感染不同时间段的表达特征上,7种凝集素基因各不相同;在各组织中的表达量上,方差分析表明7种凝集素基因除在肝胰腺中的表达上存在显著差异外,其他组织中不存在显著差异。这些结果显示这7个凝集素基因在应答WSSV侵染的表达特征上存在较大差异,推测...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘雪兰 余为一 李槿年
将中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)血清凝集素与动物(鳖、鲫鱼、鸡、鸽、兔、鼠、人A、B、O型)红细胞和细菌(八叠球菌、嗜水气单胞菌、短小芽孢杆菌、大肠杆菌、葡萄球菌、假单胞菌和拟态弧菌)进行凝集反应。结果表明,中华绒螯蟹血清凝集素有明显的选择性,与小白鼠红细胞和八叠球菌的凝集活性最高(P0.05)。10 mmol/L的CaCl2和300 mmol/L的NaCl不影响凝集素与小鼠红细胞和细菌的凝集活性,600 mmol/L的NaCl可降低其活性。pH 5~9不影响蟹凝集素活性,但400 mmol/L的ED...
关键词：
中华绒螯蟹 血清凝集素 凝集价
[期刊] 淡水渔业
[作者]
周春花 黎敏 吴小平 曾志恒
从军山湖中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)获得血清,用人A、B、AB、O型红细胞、鸡红细胞及部分细菌菌体检测了血清的凝集活力,同时进行了糖抑制、热稳定性及pH影响试验。结果显示血清能凝集人四种血型红细胞和鸡红细胞,其中对人A型红细胞凝集活力最高;能够和大肠杆菌发生凝集反应,但不能和枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌发生凝集反应;凝集条件为pH5.0~5.8、温度4~37℃;1.0%的D-葡萄糖、D-果糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖均能不同程度地抑制血清与人A型红细胞的凝集作用。
[期刊] 水产学报
[作者]
刘逸尘 刘丽静 张亦陈 耿绪云 孙妍 孙金生
研究拟通过分析对虾C型凝集素的活性特点,探讨其在对虾先天免疫应答过程中的潜在功能以及在养殖生产实践中的应用。实验利用原核表达系统对中国明对虾C-型凝集素基因的两个串联的糖识别结构域(carbohydrate recognition domain,CRD)进行了重组表达,并通过纯化复性获得了重组目的蛋白(rFclectin-CRD1和rFclectin-CRD2)。活性分析结果显示,重组目的蛋白对多种病原菌有凝集和抑制生长的作用,并且具有Ca2+依赖活性;其凝集活性可被半乳糖、肽聚糖、脂多糖等多种病原相关分子模式所抑制,研究结果证实,Fclectin是一种典型的C-型凝集素,它可能作为中国明对虾...
[期刊] 水产学报
[作者]
于金红 潘鲁青 张辉
为研究凡纳滨对虾C-型凝集素的免疫功能,实验利用原核表达系统对凡纳滨对虾C-型凝集素基因的开放阅读框进行了重组表达,并通过纯化分离获得重组目的蛋白,采用血细胞悬浮培养的方法,研究了重组C-型凝集素对凡纳滨对虾血细胞免疫作用的影响。实验梯度设置为对照组和重组C-型凝集素蛋白(1.0 mg/mL),分别在0、3、6、9、12、24 h取培养的血细胞和培养液进行免疫相关指标的测定。结果表明,重组C-型凝集素经SDS-PAGE分析显示在39 ku处有显著诱导条带,与预测的分子量大小基本一致,Western-blotting分析可以与anti-His抗体特异性结合,从而证明C-型凝集素重组蛋白在大肠杆菌...
[期刊] 水产学报
[作者]
李俊烨 宋巧珍 张亦陈 刘逸尘 耿绪云 孙金生
C型凝集素是一种依赖于Ca(2+)而发挥功能的糖蛋白,在一线的固有免疫防御过程中发挥着重要作用。围绕对虾C型凝集素开展深入研究,不仅可以丰富无脊椎动物固有免疫学内容,还有望将其开发为具有免疫增强效果的活性饵料,应用于对虾的健康养殖。本实验根据实验室前期转录组信息提示克隆获得了凡纳滨对虾一种新的C型凝集素基因(LvLc1,Gen Bank注册号:KY937940)。生物信息学分析显示LvLc1基因的开放阅读框全长891 bp,编码296个氨基酸,该基因编码的蛋白质含有一个保守的糖识别结构域(carbohyd
[期刊] 水产学报
[作者]
李丹彤 宋亮 钟莉 常亚青
为探寻刺参药用价值,探索其抑制肿瘤细胞增殖,促进淋巴细胞转化等生物功能。将刺参(Apotichopusjaponicus)经磷酸盐缓冲溶液抽提,20%~75%硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-200分子筛层析,得到刺参凝集素(AJL)。用Sephadex G-200分子筛层析测得其分子量为85 652Da。AJL的含糖量为20.9%。该凝集素可以凝集人的A、B、AB、O型红细胞,且对A型红细胞凝集作用最强,在对兔、鼠、鲤鱼、鸡和人的A、B、AB、O红细胞的凝集作用中,对鸡的凝集作用最强。该凝集素凝集兔红细胞的作用不被D-果糖、D-甘露糖、γ-球蛋白、葡萄糖、蔗糖、甘露聚糖所抑制,而被牛甲状...
关键词：
刺参 凝集素 纯化 性质
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李丹彤 崔铁军 马国庆 汤霞 李熙宜
角叉菜（ Ｃｈｏｎｄｒｕｓ ｏｃｅｌｌａｔｕｓ）经磷酸盐缓冲液抽提， ２０％～ ７５％硫酸锭分级沉淀，牛甲状腺球蛋白一Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和层析，可以从红藻角叉菜中纯化出角叉菜凝集素（ＣＯＬ），在 ＰＡＧＥ上显示单一蛋白染色带，在等电聚焦电泳上显示单一蛋白染色带，其ＰＩ为８．３０。纯化后的ＣＯＬ的最大紫外吸收峰在２８５ ｎｍ，用ＳｅＰｈａｄｅｘＧ－２００分子筛层析测得其分子量为 ４ ２５２。该凝集素可以凝集人的Ａ、Ｂ、ＡＢ、Ｏ型红细胞，且凝集活性相同，在对人、兔、鲤、鲫的红细胞的凝集作用中，对兔红细胞的凝集作用最强，且不被己测试的Ｄ－半乳糖、Ｄ－果糖、Ｄ－甘露糖、葡萄糖、蔗糖、甘露聚糖、...
关键词：
角叉菜 凝集素 纯化 理化性质
[期刊] 华北农学报
[作者]
于小清 陈段芬
为了探索植物凝集素在分子水平的作用机理,利用RT-PCR技术从中国水仙(Narcissus tazettavar.chinensis)金盏银台中克隆到一个新的编码凝集素的基因。序列分析与预测结果表明,该基因cDNA片段总长为609 bp,含有一个由25个氨基酸残基组成的信号肽和一个519 bp的完整开放阅读框;编码172个氨基酸,分子量为18 712.31 Da;前体蛋白在氨基酸水平上与杂种多花水仙凝集素、雪花莲凝集素、石蒜凝集素的一致性分别为83%,81%和77%;其二级结构以α-螺旋、不规则盘绕和延伸链为主;三级结构与雪花莲凝集素极其相似,是一种能与D-甘露糖特异性结合的B型凝集素。
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