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[期刊] 水产学报  [作者] 李钰  何夙旭  张震  徐俐  丁倩雯  郭小泽  易敢峰  徐树德  马徐发  周志刚  
近年来我国集约化水产养殖业发展势头强劲,而水产动物营养性疾病之鱼类脂肪肝的发病也逐渐迅猛起来,逐渐成为制约水产养殖业发展的因素之一,实验拟通过高脂饲料诱导建立斑马鱼营养性脂肪肝模型,为鱼类营养性脂肪肝相关研究工作的开展奠定基础。该实验分别以基础饲料和16%高脂饲料投喂1月龄斑马鱼,在投喂后第14、30、90天3个时间点取样,采用肝脏组织进行H.E染色、透射电镜、masson染色组织切片观察斑马鱼肝脏脂肪变性及纤维化程度;通过荧光定量PCR技术(q RT-PCR)检测斑马鱼肝脏脂合成及脂解相关基因:二酰甘油
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 张洪玉  夏磊  彭翔  刘晓勇  赵明军  齐茜  
选择规格相近[体重(8.41±0.82)g,体长(10.12±0.44)cm]的西伯利亚鲟鱼225尾,分为3组,每组3个平行,分别用8%(对照组)、12%(中脂组)、16%(高脂组)油脂含量的饲料投喂。养殖42 d后,测定体长、体重,尾静脉取血,解剖。通过生长指标、生理生化指标及肝脏组织切片观察等评价建模是否成功。结果表明,高脂组生长最快,终末体长、体重显著高于对照组和中脂组(P<0.05),肝指数显著高于对照组和中脂组(P0.05);高脂组血清AST、ALT及TC、TG显著高于对照组(P<0.05),肝脏TG显著高于中脂组和对照组;对照组肝脏呈暗红...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王新  曹玉珍  郭桂芳  李睿  张秀英  
【目的】通过检测非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠肝中脂肪酸的含量,分析肝脏中脂肪酸组成与NAFLD之间的关系。【方法】采用连续6周饲喂高脂饲料并结合每周皮下注射2次CCl4的方法诱导C57BL/6J小鼠的NAFLD。小鼠肝脏中脂肪酸经乙醚提取和BF3/甲醇溶液衍生化处理后,采用气相色谱-质谱(GC-MS)选择离子方式进行检测。样品中脂肪酸通过检索质谱数据库和脂肪酸标准品的保留时间进行定性分析,采用外标法进行定量分析。【结果】病理学检查表明成功诱导C57BL/6J小鼠的NAFLD。与对照组相比,试验组小鼠肝中C14:0、C16:0、C18:0和C20:3含量显著升高(P<0.01),C1...
[期刊] 水产学报  [作者] 柯福恩  王鸿泰  黄风翥  周京元  周瑞琼  刘志刚  
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王玉梅  任天应  高坚  
为探究延长酶5(elovl5)、延长酶2(elovl2)和去饱和酶2(fads2)基因在淡水鱼高度不饱和脂肪酸(HUFA)合成中的相互作用,利用CRISPR/Cas9技术,成功构建出斑马鱼elovl5~(-/-)(以下简称E5~(-/-)组)、elovl2~(-/-)×elovl5~(-/-)(以下简称E2~(-/-)×E5~(-/-)组)、elovl5~(-/-)×fads2~(-/-)(以下简称E5~(-/-)×F2~(-/-)组)、elovl2~(-/-)×elovl5~(-/-)×fads2~(-/-)(以下简称E2~(-/-)×E5~(-/-)×F2~(-/-)组)4种突变体模型,并对4种突变体进行大豆油饲料(SO)和亚麻芥油饲料(CO)的投喂试验,研究斑马鱼elovl5、elovl2和fads2在HUFA合成过程中对饲料不同脂肪源的响应。结果显示,在E5~(-/-)组和E2~(-/-)×E5~(-/-)组中,C18PUFA未出现明显累积,而E5~(-/-)×F2~(-/-)组和E2~(-/-)×E5~(-/-)×F2~(-/-)组中的C18:3n-3(ALA)和C18:2n-6(LNA)呈现显著的累积。elovl2、elovl5和fads2缺失后,肝脏elovl4a和elovl4b表达明显上升。不同脂肪源饲料投喂试验结果显示,SO饲料投喂后的E5~(-/-)组DHA含量与野生型(WT)无显著差异,E5~(-/-)×F2~(-/-)组较WT组DHA含量显著降低。然而,CO饲料投喂后的E5~(-/-)组DHA含量较WT组呈现显著升高,E5~(-/-)×F2~(-/-)组与WT无显著差异。fads2缺失斑马鱼去饱和作用受到显著影响,表明,fads2是HUFA合成过程中的必需酶。而elovl2和elovl5缺失的表型可能会被其他HUFA合成途径所弥补。以上结果表明,elovl2和elovl5在HUFA合成中存在基因间相互作用,fads2作为去饱和酶在HUFA合成中必不可少。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 黄姣  霍锦倩  刘姣  祖尧  张庆华  李伟明  任建峰  
建立肌型糖原磷酸化酶基因pygma和pygmb突变体斑马鱼疾病模型,对人类PYGM基因突变导致的糖原贮积症GSDⅤ(glycogen storage disease typeⅤ)的研究具有重要意义。利用CRISPR/Cas9技术成功地敲除了斑马鱼pygma和pygmb基因,分别获得pygma~((-11bp)-/-)和pygma~((+14bp)-/-)两种纯合突变体,以及pygmb~((+1bp)-/-)和pygmb~((-2bp)-/-)两种纯合突变体。过碘酸希夫糖原染色(periodic acidSchiff stain)实验显示pygma~(-/-)和pygmb~(-/-)纯合突变体心脏和肌肉组织出现明显的糖原累积。对野生型斑马鱼15个早期发育时间点以及12个成鱼组织中pygma和pygmb基因表达分析显示,pygma和pygmb早期发育阶段表达模式相似,从24hpf到125hpf,两基因表达量总体呈上升趋势;且pygmb的上升幅度大于pygma的上升幅度。在检测的12个组织中,pygma和pygmb只在少数几个组织中有明显表达。pygma在肌肉组织中表达最高,其次为心脏和皮肤组织;pygmb在心脏、脑、眼睛3个组织中高表达,在肌肉组织中也有表达,但表达量相对较低。斑马鱼pygma~(-/-)和pygmb~(-/-)突变体具有GSDⅤ病肌肉糖原累积的典型特征,该疾病模型的建立,为进一步研究糖原贮积症的发病进程、详细机制和药物筛选等治疗策略提供基础。
[期刊] 中国科学技术大学学报  [作者] 韦炜  邓克学  李君君  
脂肪肝与肝炎、肝纤维化、肝硬化及很多代谢性、传染性疾病均有密切关系,它包括一系列以肝细胞内三酰甘油过度沉积为特征的疾病.早期诊断脂肪肝并对其进行干预,可使发生脂肪变性的肝细胞恢复正常,因此应用无创性方法定量诊断脂肪肝,并随访观察治疗效果,在临床工作中具有非常重要的意义.本文就超声、CT、MRI等影像学检查方法在脂肪肝定性及定量诊断中的研究现状及进展予以综述.
[期刊] 水产学报  [作者] 杜震宇  
养殖鱼类脂肪肝病,是困扰水产养殖业多年的广发性病害,虽经多年研究和防治实践,至今尚不能得到根本遏制。本文回顾了近年来在养殖鱼类脂肪肝研究领域的重要研究成果,从营养和饲料、养殖环境、鱼类生理特性、物种差异和遗传变异等5个方面系统总结了导致养殖鱼类肝脏脂肪过量累积的原因。在综述已有成果的基础上,分析了当前鱼类脂肪肝研究和防治实践中存在的可能误区,并结合自身多年在鱼类、哺乳动物和人类脂肪肝研究中的成果和经验,探讨了养殖鱼类脂肪肝发生的生物学机制,提出了"营养型脂肪肝"与"氧化型脂肪肝"的区分标准,揭示了当前鱼类脂肪肝防治的复杂性和困难性,并对今后鱼类脂肪肝研究和防治实践提出了具体的研究方向和防治策略...
[期刊] 中国科学技术大学学报  [作者] 翁建平  毕艳  朱大龙  管又飞  
随着人们生活方式的改变,非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)已为我国最常见的肝脏疾病.作为代谢性疾病,NAFLD与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)发病密切相关.NAFLD患者的T2DM发病风险增加近5倍,被认为是T2DM发病的独立危险因素.因此,深入认识NAFLD与T2DM的关系有助于我们重新认识T2DM的发病机制,为制定T2DM防治措施提供依据.本文从肝脏脂代谢紊乱导致胰岛素抵抗、炎性因子释放增加、影响机体整体代谢、损失胰岛β细胞功能、影响肠促胰岛素分泌和降低脂肪组织胰岛素敏感性等几个方面,探讨NAFLD在促发T2DM中的始动作用.
[期刊] 中国水产科学  [作者] 黄凯  杨鸿昆  甘晖  龚竹林  甘西  罗永巨  
采用胆碱添加量分别为0.0%、0.1%、0.2%、0.3%和0.4%的饲料进行奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.au-reus)养殖实验,实验周期为50 d。结果表明,当胆碱添加量为0.3%时,罗非鱼的肥满度[(4.00±0.20)%]和增重率[(699.51±31.32)%]达到峰值,饲料系数最低(2.00±0.12),血浆中胆固醇[(2.59±0.03)mmol/L]、甘油三酯[(2.24±0.99)mmol/L]、高密度脂蛋白[(0.94±0.17)mmol/L]和低密度脂蛋白[(0.32±0.01)mmol/L]含量较高;当胆碱添加量为0.2%时,肝体比[(2...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 夏成  王哲  张洪友  徐闯  张才  
【目的】旨在阐明患脂肪肝奶牛体内代谢、内分泌以及肝和脂肪中3个基因表达的变化。【方法】分别对10头患脂肪肝奶牛和10头健康奶牛进行血液指标和肝脂含量的检测,利用半定量RT-PCR检测奶牛肝PEPCK-CmRNA的丰度,应用实时荧光定量PCR检测脂肪LpmRNA和HSLmRNA的丰度。【结果】①脂肪肝奶牛血糖浓度显著降低(P<0.01),血浆NEFA和BHBA的浓度显著升高(P<0.01),肝脂(约41.98%左右)和血清AST活性显著增加(P<0.01),血清γ-GT、TBI、CHE显著升高(P<0.05),肝PEPCK-C和脂肪H...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 赵丽萍  邵宛芳  
研究普洱茶对高脂血症大鼠降脂和预防脂肪肝的作用。结果表明,高脂模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C比对空白照组明显升高,HDL-C下降,肝组织脂肪变性严重;普洱茶组大鼠血清TC、TG、LDL-C与高脂模型比较明显降低,HDL-C含量增加,差异有显著性(P<0.05,P<0.01),肝组织脂肪变性明显减轻。普洱茶对高脂饮食试验动物引起的高脂血症和脂肪肝有辅助治疗作用。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 杜金梁  曹丽萍  贾睿  王涛  顾郑琰  张春云  骆仁军  徐跑  殷国俊  
通过对油酸诱导时间及有效作用浓度的研究,建立油酸致建鲤肝细胞脂肪变性模型。本研究以胰蛋白酶消化法获得的原代肝细胞作为实验材料,加入不同浓度油酸(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L)与肝细胞共培养24–48 h,诱导肝细胞脂肪变性,分别收集不同时段的肝细胞及上清液,采用试剂盒测定肝细胞中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量,同时测定上清培养液中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,MTT法测
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 杨芳  
【目的】探究魔芋葡甘聚糖(Konjac glucomannan,KGM)对大鼠酒精性脂肪肝的预防作用。【方法】将雄性SD大鼠随机分成空白对照组、酒精肝模型组、饮用酒精+质量分数5%KGM组、饮用酒精+质量分数10%KGM组、饮用酒精+质量分数10%谷胱甘肽(GSH)组,进行为期12周的饲养试验,期间观察大鼠被毛、活动、饮食等一般情况,试验结束时称体质量,并采集血清及肝脏样品,测定其血清谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptida...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 张红娜  王静  刘敬博  周玉法  
为探讨解淀粉芽孢杆菌缓解非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)的作用机制,构建高脂饮食诱导的NAFLD小鼠模型,饲喂低、高剂量(10~6、10~8 CFU)解淀粉芽孢杆菌BLCC1-0238予以干预,通过检测血清生理生化指标和肝脏病理变化评估其益生作用,然后利用基因组学和转录组学分别分析其对肠道微生物菌群结构和肝脏脂质代谢的影响,并采用定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测小鼠肝脏转录组结果的可靠性。血清指标检测结果显示,解淀粉芽孢杆菌BLCC1-0238干预显著降低了血清中ALT、AST、TC和TG水平;肝组织病理学染色发现,解淀粉芽孢杆菌BLCC1-0238明显减少了肝细胞的脂质沉积。基因组学分析发现,解淀粉芽孢杆菌BLCC1-0238改变了肠道微生物菌群结构,在属水平显著增加了产短链脂肪酸的双歧杆菌相对丰度;肝脏转录组学结果显示,解淀粉芽孢杆菌BLCC1-0238主要抑制了脂肪酸和胆固醇合成等脂质代谢过程。qRT-PCR检测结果验证了转录组学结果的可靠性。综上所述,解淀粉芽孢杆菌BLCC1-0238能通过改变肠道微生物菌群结构,增加双歧杆菌相对丰度,调控肝脏脂质代谢来缓解NAFLD,可以作为预防和治疗NAFLD的候选益生菌加以开发和利用。
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