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[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 刘娜  范纯新  宋佳坤  
本研究旨在揭示斑马鱼下颌再生中神经和肌肉的关系。通过HE染色技术、免疫荧光组织化学等实验技术分别观察斑马鱼下颌神经和肌肉的再生过程,考察神经和肌肉的关系。研究结果显示,截面附近的神经纤维在剪切后5 H降解,剪切后2 d时完全消失。剪切后3 d,整个芽基所在位置已出现新生的神经纤维。剪切5 d时,芽基上布满大量的神经纤维。肌纤维在剪切后12 H已发生断裂,剪切后5 d形成芽基细胞并分化成各种前体细胞如肌肉前体细胞,剪切后9 d出现新生的肌细胞,剪切后14 d新生的肌细胞与新生的神经纤维建立神经肌肉接头联系,30 d后成为成熟的肌肉组织。结果表明:如果斑马鱼1/3的下颌被人为切除,下颌肌肉可以实现...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 杨建  佟广香  郑先虎  孙志鹏  吕伟华  孙效文  匡友谊  
为阐明肌间刺缺失对斑马鱼(Danio rerio)胚胎发育时期肌肉发育的影响,采用qRT-PCR的方法,检测分析了斑马鱼不同肌间刺表型间5个肌肉特异性基因(mef2、myf5、myod、myog和sox6)在囊胚期(3hpf,hourspost fertilization)、原肠胚期(6 hpf)、体节期(12 hpf)、咽囊期(24 hpf)和孵化期(72 hpf)5个发育时期的表达情况,对比分析了肌间刺缺失对斑马鱼胚胎发育过程中肌肉发育特异性基因的时序表达差异和肌肉发育的影响,以及对受精率、孵化率和畸形率的影响。结果显示, 5个特异性基因在肌间刺缺失突变型与野生型斑马鱼各发育时期的表达量无显著性差异(P>0.05)。其中,myf5、myod基因在原肠胚期表达量升高,在体节期和咽囊期开始逐步下降;mef2、myog和sox6基因在囊胚期和原肠胚期表达量很低,在体节期和咽囊期表达量迅速升高,并在孵化期开始下降。此外,受精率、孵化率和畸形率的统计结果显示,肌间刺突变型与野生型间亦无显著性差异(P>0.05)。综上,推测肌间刺的缺失对斑马鱼胚胎发育及胚胎发育过程中肌肉的发育没有影响。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 周婷婷  范纯新  邹莎  宋佳坤  
机械感觉毛细胞对于脊椎动物的听力和平衡能力至关重要,低等脊椎动物毛细胞在遭受损伤后具有很强的再生能力。鱼类侧线神经丘毛细胞与内耳毛细胞具有相似的结构、功能、发育和再生过程。我们将受精后5~6 d的斑马鱼仔鱼置于400μmol/L新霉素溶液中处理1 h破坏神经丘毛细胞。分别对处理后2、4、8、12及24 h的斑马鱼仔鱼进行组织学切片及功能基因eya1和six1b的整体原位杂交。组织学切片结果显示:对照组神经丘毛细胞与支持细胞形态及排布都很规则,毛细胞和支持细胞分别位于上层和下层;处理后2~4 h,上层毛细胞数量显著下降;处理后8~12h,支持细胞和毛细胞之间界限模糊,部分支持细胞变长,且与基膜脱...
[期刊] 水产学报  [作者] 庄平  宋超  章龙珍  张涛  冯广朋  赵峰  黄晓荣  
测定分析了10尾黄斑篮子鱼的肌肉营养成分。结果表明,黄斑篮子鱼肌肉(鲜样)中水分、粗灰分、粗蛋白和粗脂肪的质量分数分别为74.52%、1.09%、19.64%和4.71%。肌肉中含有18种氨基酸,总量为68.33%(质量分数,干样),其中8种人体必需氨基酸(EAA)总量是30.40%,占氨基酸总量的44.48%;其必需氨基酸的构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)的标准。黄斑篮子鱼的限制性氨基酸为(蛋氨酸+胱氨酸)和色氨酸,必需氨基酸指数(EAAI)为61.07,4种鲜味氨基酸(DAA)总量为24.36%(质量分数,干样)。脂肪酸中EPA与DHA质量分数分别为3.13%和1...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 杨笑星  佟广香  闫婷  董乐  孙志鹏  徐欢  唐国盘  匡友谊  
为阐明cilp基因在斑马鱼椎骨和肌间骨发育中的作用,利用CRISPR/Cas9建立了斑马鱼cilp基因敲除纯合突变系(cilp~(-/-)),对其进行了骨骼表型的观察,并进一步采用qRT-PCR分析了14个骨骼发育相关基因在突变体胚胎发育阶段和成鱼骨骼中的表达水平变化。结果显示,与野生型斑马鱼相比,90 dph(days post hatched)cilp~(-/-)斑马鱼的肌间骨数量显著减少了10.27%(P<0.05),而肌间骨的长度无明显变化;同时突变体斑马鱼中椎骨发生异常融合及髓棘缺失。qRT-PCR结果显示,与野生型相比,col1a1a、sp7、smad4a和smad5基因在胚胎发育的整个时期都存在显著的差异(P<0.01);在突变体成鱼尾部骨骼组织中bmp2a、bmp2b、smad5、sp7、runx2a、runx2b和bglap基因的表达量均显著低于野生型,表明cilp基因敲除导致了BMPs和SMADs家族基因的表达水平下降,并下调了下游的成骨细胞发育相关基因的表达量,推测cilp功能缺失可能通过抑制BMPs信号通路,影响成骨细胞分化和骨形成,从而导致了肌间骨数量的减少和脊椎骨异常融合。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 李心雨  刘亚平  杜新路  严继舟  
筛选小分子化合物促进组织再生仍然是再生医学的一个巨大挑战。前期研究提示神经递质在斑马鱼(Danio rerio)下颌再生过程中发挥着重要作用。本实验分别剪切Flk-GFP转基因斑马鱼成体下颌组织和1月龄幼鱼尾鳍,然后将其置入四种神经递质(牛磺酸、谷氨酸、甘氨酸以及γ-氨基丁酸)的浓度梯度环境中,培养5d后取成鱼下颌制作冰冻切片进行观察检测新生血管荧光量,对幼鱼尾鳍再生进行长度测量。结果显示甘氨酸和γ-氨基丁酸对损伤组织的再生表现出促进作用,而牛磺酸和谷氨酸表现出在低浓度时促进与高浓度的抑制作用。胚胎培养和
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 顾叶丹  王冰琦  王宏杰  胡沛男  祖尧  
斑马鱼转录因子hoxb4a在心脏中的功能未见研究报道,为了阐明hoxb4a在心脏发育中的作用,本文利用基因沉默技术和mRNA基因过表达方法,分别在斑马鱼中敲降和过表达hoxb4a基因,发现抑制或过表达hoxb4a的胚胎在第3天出现心包腔肿大、心脏环化异常的表型。通过原位杂交技术对野生型及hoxb4a敲降胚胎进行心肌特异基因的原位杂交染色比较,测量结果显示hoxb4a敲降胚胎的心脏环化角度增大(P<0.05)。本研究表明斑马鱼hoxb4a沉默会导致心脏结构畸形、环化异常,并且调控了早期心脏发育基因的变化。本研究发现了hoxb4a在斑马鱼早期心脏发育中发挥作用,并通过原位杂交及qPCR结果初步探索了hoxb4a调控心脏腔室的分化及心脏环化过程,深化了人们对心脏发育调控网络的认识。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 程波  陈超  王印庚  李胜忠  于宏  张家松  杨志  于文松  曲江波  
对饲养的七带石斑鱼Epinephelus septem fasciatus Thunberg的含肉率、营养成分及鱼肉品质进行了研究,采用常规肌肉营养测定方法分析了4尾成鱼的肌肉营养成分。结果表明,七带石斑鱼的含肉率为76.73%,肌肉(鲜样)中粗蛋白含量为19.60%,粗脂肪为2.70%,氨基酸总含量为18.33%,其中7种必需氨基酸的总含量为7.59%,占氨基酸总含量的41.4%,其必需氨基酸的构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)的标准模式。必需氨基酸指数(EAAI)为82.38,5种鲜味氨基酸的总含量为8.22%。多不饱和脂肪酸含量为32.45%,其中EPA与DHA的...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 赵海翔   崔鸿武   黄桢铭   王磊   李皓   崔正国   曲克明  
利用计算机视觉技术识别斑马鱼在不同污染物暴露下的行为变化是水质毒性评价的常用方法之一,但传统方法存在效率低,面对遮挡和复杂环境时性能差等缺陷。针对这些问题,本研究使用基于Bytetrack的多目标跟踪算法追踪斑马鱼(Danio rerio)在4种污染物(Zn~(2+)、Pb~(2+)、铬和苯酚)暴露2 h后的行为变化,对在4种浓度梯度中的斑马鱼的平均速度、最大速度、最低速度、平均碰撞次和行为轨迹等指标进行分析。实验结果表明,算法的追踪精度、漏检率和检测时间(每300帧)分别能达到90.26%、16.33%和0.19 min,检测时间和精度相比于传统目标检测方法有较大提升。同时,根据污染物不同,该方法能够准确识别特定污染物环境中斑马鱼相应的运动状态及轨迹变化,可实现精确识别和实时响应,在鱼类毒性行为识别领域具有重要参考意义。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 吕世伟  周德庆  刘楠  于莹  宿小杰  
微塑料广泛存在于海洋中,是全球十大新兴环境问题之一。微塑料可以被鱼类、贝类、低栖动物等海洋生物摄入,危害海洋生命。为了更好的从海洋生物中分离和检测微塑料,本实验优化了一种新的方案。以斑马鱼(Danio rerio)为原料,对其中的微塑料进行分离提取。首先通过消化率、回收率、拉曼光谱分析、扫描电镜等方法对KOH、H_(2)O_(2)、HNO_(3)和胰蛋白酶4种消化液进行选择,选定KOH溶液为最适消化液。然后通过单因素试验和Box-Behnken响应面实验设计优化KOH溶液为消化液的最佳消解条件。研究表明,消解最适条件为:浓度4%、温度47℃、时间20 h,在此条件下的消化率为97.38%。采用KOH作为消化液显著提高了消解效率,为微塑料的进一步检测分析提供了技术支持。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 何雪  王雨果  郑奕  黄亚娟  鲍宝龙  
电压门控钠离子通道对于脊椎动物脑神经起始、传播动作电位具有重要作用。为了解斑马鱼电压门控钠离子通道基因scn1Laa在脑神经中的作用,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,首次构建了可稳定遗传的生长没有受明显影响的scn1Laa缺陷型(scn1Laa~(-/-))斑马鱼家系。相比野生型,5dpf(dayspost-fertilization,受精后5天)scn1Laa缺陷型斑马鱼兴奋抑制性神经元(氨基丁酸类神经元)表达相对增加,兴奋类神经元(谷氨酸能类神经元)和成熟神经元显著减少,脑部细胞增殖也显著减少。受精后5d和90d的 scn1Laa缺陷型斑马鱼的运动较同时期野生型斑马鱼更为活跃,受精后90d的 scn1Laa缺陷型斑马鱼的运动具有明显的爆发性。以上结果表明,scn1laa缺失导致兴奋类神经元(谷氨酸能类神经元)以及神经细胞增殖减少,影响脑周围神经放电,导致运动神经调节障碍,出现运动行为异常活跃。即电压门控钠离子通道基因scn1Laa参与斑马鱼脑神经发育和生长,间接参与运动行为调节。同时本文也为进一步探究电压门控钠离子通道在脑神经中的作用奠定基础。
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 刘军  胡兵  李惠  陈爱敬  聂宁  戴邵虎  
对采自长江宜昌江段铜鱼肌肉的营养组成进行了分析与评价,以期为其人工养殖的开展和综合利用提供基础数据。结果表明:铜鱼含肉率为68.13%;肌肉中水分含量为69.58%;肌肉干物质中粗蛋白、粗脂肪、灰分、钙、磷的含量分别为72.98%、17.10%、5.14%、0.64%、1.14%;氨基酸含量为62.27 g/100 g干物质;必需氨基酸与总氨基酸的比值为42.90%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为75.12%,鲜味氨基酸与总氨基酸的比值为44.05%;必需氨基酸指数为71.32。
[期刊] 海洋渔业  [作者] 章龙珍  宋超  庄平  赵峰  闫文罡  
采用生化分析的方法,对长江口斑尾刺虾虎鱼(Acanthogobius ommaturus)和纹缟虾虎鱼(Tridentiger trigonocephalus)的肌肉营养成分进行了分析,并对两者的营养品质进行了比较。结果表明:斑尾刺虾虎鱼的水分含量显著高于纹缟虾虎鱼(P<0.05),而粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量显著低于纹缟虾虎鱼(P<0.05)。斑尾刺虾虎鱼和纹缟虾虎鱼的氨基酸组成一致,均检测到18种氨基酸,必需氨基酸指数(EAAI)分别为66.56和73.00。脂肪酸中二十碳五烯酸(EPA)与二十二碳六烯酸(DHA)的总量斑尾刺虾虎鱼显著高于纹缟虾虎鱼(P<0.05),分别为32.14%±1...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王文龙  王敬龙  杨晓雯  刘建枝  赵宝玉  路浩  陈基萍  马烽  王保海  
疯草是我国西部草原的主要毒害草,其毒性成分为苦马豆素。本实验以内蒙古阿拉善的一只变异黄芪自然中毒山羊为对象,采集其肌肉组织,运用不同处理方法对其进行处理后,气相色谱仪检测组织中苦马豆素的含量。结果显示,室温水浸泡、室温水浸泡+超声、水蒸煮和水蒸煮+超声,4种不同处理方法对疯草自然中毒羊肌肉组织中苦马豆素的清除明显不同,分别为81.7%、94.7%、100%和100%。结果表明,采用水蒸煮的方法即可完全清除中毒羊肌肉组织中的苦马豆素。
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 吴成福  江世贵  林黑着  李刘冬  周发林  
选用平均体重为(8.25±1.18)g的池塘养殖斑节对虾,随机分为4组,每组3个重复,每个水泥池(100 cm×100 cm×100 cm)养虾60尾,分别投喂添加0、50、100和200 mg/kg L-肉碱的配合饲料4周。在实验的第0、1、2、3、4周分别从每个重复中随机取样,测定肌肉中的肌苷酸含量,研究L-肉碱对斑节对虾肌肉风味的影响。结果显示,1周后,实验组对虾肌肉肌苷酸含量均有所提高,其中50 mg/kg的实验组肌苷酸含量比对照组高27.39%(P<0.05),随着肉碱添加浓度升高对虾肌肉中肌苷酸含量呈下降趋势;3...
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