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[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘洋 姚艳丽 胡小文 徐磊 邢淑莲 张树珍
斑茅是栽培种甘蔗最重要的近缘物种之一，具有抗逆性强等特点。本文以高粱过氧化氢酶基因（ＮＣＢＩ登录号为ＸＭ００２４３７５８６．１）Ｃ ＤＮＡ序列为探针，对甘蔗属ＥＳＴ数据库进行同源检索、筛选和拼接，后经基因组ＰＣＲ、分子克隆、序列分析验证成功分离了１个斑茅过氧化氢酶基因ＤＮＡ序列（ＥＡ ＣＡＴ－１Ａ，ＧＥＮ ＢＡＮｋ登录号为ｋＦ８６４２２３）。该序列全长３８３１ ＢＰ，包含８个外显子和７个内含子，Ｃ ＤＮＡ序列长为１５３２ ＢＰ，包含１０ ＢＰ的５’非翻译区（ＵＴＲ）和４３ ＢＰ的３’ＵＴＲ，以及一个１４７９ ＢＰ的开放读码框，编码４９２个氨基酸，此蛋白序列具有过氧化氢酶保守结构域，属于ＣＡＴ家．．．
关键词：
斑茅 过氧化氢酶 基因克隆 同源进化分析
[期刊] 林业科学研究
[作者]
程华 李琳玲 许锋 王燕 程水源
利用RACE技术从银杏中克隆到过氧化氢酶基因(GbCAT1)的cDNA全长。进化树分析结果表明:GbCAT1和其他物种的CAT源自于相同的祖先。Southern杂交显示:GbCAT1属于1个小的多基因家族。实时定量RT-PCR分析表明:GbCAT1在银杏的根、茎、叶和果中都有表达,在叶中的相对表达量最高,其次为果、茎和根。GbCAT1的转录受到ABA、渗透压、紫外、低温和高温胁迫的诱导。水杨酸处理下,GbCAT1相对表达量迅速降低。CAT1基因在逆境条件下的相对表达变化与环境胁迫有关。
关键词：
银杏 CAT1基因 表达分析
[期刊] 水产学报
[作者]
乔晓静 张卫卫 邵铱娜 赵雪琳 李成华
过氧化氢酶(catalase， CAT)是抗氧化酶体系的主要成员，在维持机体氧化还原平衡、抵御病原感染过程中具有重要作用。为研究CAT基因在软体动物应答病原胁迫过程中的作用，本研究采用RACE技术通过克隆和序列拼接获得了缢蛏CAT基因的全长cDNA序列，并命名为ScCAT。ScCAT基因全长为2840 bp，编码508个氨基酸。序列分析表明ScCAT蛋白含有1个CAT核心结构域(25-410)，1个保守的酶活性位点(_(61)FNRERIPERVVHAKGAGA_(78))和1个亚铁血红素结合位点(_(351)RLFSYPDTH_(359))。多序列比对和系统进化树分析结果表明ScCAT属于CAT基因家族，且与无脊椎动物文蛤的亲缘关系最近。组织分布表明ScCAT在所有检测的组织中均能表达，其中在肝胰腺中表达量最高，鳃中次之，血细胞中的表达量最低，分别为闭壳肌的85.67倍(P < 0.01)、50.09倍(P < 0.01)和0.76倍。副溶血弧菌胁迫下，ScCAT在缢蛏肝胰腺中的表达明显上升，且在12 h达到最高值，为对照组的3.56倍(P < 0.01)；酶活测定表明副溶血弧菌胁迫显著诱导缢蛏肝胰腺和鳃组织中的CAT活性，为进一步探讨ScCAT的蛋白功能，构建ScCAT原核表达质粒，通过诱导、纯化后发现ScCAT重组蛋白具有显著的CAT酶活性。本研究结果表明ScCAT作为一类重要的抗氧化酶参与了缢蛏体内的免疫应答。
关键词：
缢蛏 过氧化氢酶 基因克隆 表达分析
[期刊] 水产学报
[作者]
黄永欢 刘志鸿 吴彪 周丽青 孙秀俊 杨爱国 李东明
采用ＲＴ－ＰＣＲ和Ｃ ＤＮＡ末端快速扩增技术（ＲＡＰｉＤ ＡｍＰｌｉｆｉＣＡＴｉｏＮ ｏｆ Ｃ ＤＮＡ ｅＮＤｓ，ＲＡＣｅ）克隆出魁蚶过氧化氢酶（ｓｂ ＣＡＴ）基因Ｃ ＤＮＡ全长序列，该基因全长为２１８１ ｂＰ，包括１４３１ ｂＰ的开放阅读框（ｏＰｅＮ ＲｅＡＤｉＮｇ ｆＲＡｍｅ，ｏＲｆ），９６ ｂＰ的５＇端非翻译区（ＵＴＲ）和６５４ ｂＰ的３＇－ＵＴＲ。其中ｏＲｆ编码４７７个氨基酸，预测分子量为５４ ｋＵ，理论等电点为８．０３。ｓｂ ＣＡＴ氨基酸序列与其他所选动物的氨基酸序列具有较高的相似性，其相似度为６８％～９６％，ｓｂ ＣＡＴ氨基酸具有ＣＡＴ基因家族的特征性序列，包括ＣＡＴ活性位点，１个．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
严林飞 安昕 包苗苗 何建瑜 吴常文 刘慧慧
为探究过氧化氢酶(catalase,CAT)对大黄鱼机体的保护作用,实验基于大黄鱼基因组序列数据库克隆获得CAT基因1584 bp的完整开放阅读框(GenBank登陆号:KKF-14425.1),该序列编码527个氨基酸残基,包含与其他动物高度保守的酶活性中心序列FDRERIPERVVHAKGA、亚铁血红素结合信号序列RLFSYPDTH、3个催化位点残基His75、Asn148和Tyr358,以及12个NADPH结合位点等,理论分子量为59.98 ku,等电点为8.37。多序列比对显示,大黄鱼CAT氨基酸
[期刊] 水产学报
[作者]
仵燕青 肖海东 许凯 徐燕 纪德华 陈昌生 谢潮添
过氧化氢酶（ＣＡＴ）是植物细胞抗氧化酶的主要成员，在逆境胁迫下的活性氧（ＲＯＳ）清除中发挥着重要的作用。本研究采用ＲＡＣＥ扩增技术克隆获得了坛紫菜ＣＡＴ基因的全长，被命名为ＰｈＣＡＴ（ＧＥｎｂＡｎｋ收录号：ｋＭ６５５３０３）。该基因全长１９８３ ｂＰ，可编码包含５４２个氨基酸的多肽，与条斑紫菜ＣＡＴ基因的序列相似性为８３．０８％。多序列比对和系统进化树分析结果确认ＰｈＣＡＴ属于ＣＡＴ基因家族。ＰｈＣＡＴ基因定量分析结果显示，失水胁迫条件下，ＰｈＣＡＴ的基因表达水平只在失水率≥６０％时才显著上调；不同时间水平的高温胁迫条件均可诱发ＰｈＣＡＴ基因的上调表达。而ＣＡＴ酶活测定结果却显示，各种水平的失．．．
关键词：
坛紫菜 过氧化氢酶 基因克隆 表达分析
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
王建勇 谭晓风 龙洪旭 陈鸿鹏 刘凯 朱凤云
以油茶近成熟种子为材料,根据油茶EST文库中已知的脂氢过氧化物裂解酶EST序列,利用3’RACE与5’RACE技术,克隆到脂氢过氧化物裂解酶的全长cDNA序列。该基因全长1648bp,,包含一个1476bp开放阅读框长,编码491个氨基酸,5’与3’非编码分别为52bp、121bp。预测该蛋白相对分子量为54.7779KDa,等电点为6.77,是个叶绿体转运肽,N端包含有22个疏水氨基酸残基组成的序列,不仅具有转运肽富含的丝氨酸,还含有大量转运肽中很少存在的脯氨酸。多序列比对发现油茶脂氢过氧化物裂解酶核苷酸序列与茶的相似性达到96%,因此将该基因命名coHPL。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
彭道林 谢达平 任文辉 汤剑峰
为了探索酶活性测定的新方法 ,降低酶活性常规测试中干扰因素的影响 ,提高酶活性测定的准确性 ,利用低电势电位差计及热电偶换能器检测过氧化氢酶活性 .结果表明 ,测定时的 H2 O2 质量分数以 9.6 %为好 ,可以用于酶活性从 0 .5 u至 3.5 u酶活力的检测 ;当 H2 O2 质量分数在 2 .4 %～ 7.2 %时 ,酶反应速率与底物浓度有线性关系 ;当底物质量分数超过 9.6 %时 ,酶反应速率显现底物抑制的动力学特征
关键词：
热电偶 过氧化氢酶 反应抑制
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张增祥 王伟 王芳 孙谧
为了提高气单胞菌属菌株CE-2-A的过氧化氢酶产量,对其发酵条件进行优化。首先运用了单因子试验筛选出了发酵培养基的麦芽糖含量、牛肉膏含量、CaCl2和MgCl2含量,在此基础上采用Plackett-Burman设计法,对8种影响产酶的因素进行评价。试验结果表明,牛肉膏含量、起始pH、摇瓶装液量对菌株产过氧化氢酶的活力具有显著的影响。通过Box-Behnken试验考察了牛肉膏含量、起始pH、摇瓶装液量这3个主要因素对菌株所产过氧化氢酶活力的影响。发酵条件优化结果为装液量42.6ml、牛肉膏含量3.69g/L、起始pH9.1,采用优化后发酵培养条件进行摇瓶发酵培养,过氧化氢酶的酶活力达到2532....
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
栗杰 焦颖 依艳丽 张大庚 程希雷 刘孝义
探讨磁场处理棕壤后,土壤中过氧化氢酶和过氧化物酶活性的动态变化。以棕壤为供试土壤,研究不同磁场强度(0、100,300,500mT)磁处理土壤后,对土壤过氧化氢酶和过氧化物酶活性的影响。棕壤风干土经磁场处理后,100和300mT磁场强度促进了过氧化氢酶和过氧化物酶活性,磁致效应为正效应。磁处理后的28d内,500mT磁场处理抑制了棕壤过氧化氢酶的活性,仅在培养的第14天,500mT处理过氧化物酶活性高于对照,比对照增加34.50%;棕壤湿土经磁处理后第1天,100mT对过氧化氢酶活性表现出正效应,300mT和500mT处理对湿土的过氧化氢酶无明显影响,磁处理后的7～28d,磁处理后过氧化氢酶活...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
陈世建 王伟 孙谧
对来自青岛近海海域底泥的一株产过氧化氢酶菌株YS0810进行形态学观察、16S rDNA序列同源性分析及生理生化特性的鉴定,在250 ml摇瓶中进行发酵产酶条件优化。初步确定该菌属于不动杆菌属Acinetobacter。发酵培养的最佳碳、氮源分别为蔗糖20 g/L和蛋白胨15 g/L,无机盐MgSO4·7H2O、NaCl、KH2PO4最佳浓度分别为0.9、5.0和1.0 g/L;菌株在培养基起始pH=7.0、4%接种量、50 ml装液量和25℃的条件下发酵24 h获得较高的酶产量。在最佳培养条件下酶产量为2469 U/ml,是优化前的5倍。
[期刊] 水产学报
[作者]
施兆鸿 张晨捷 彭士明 王建钢 高权新
将银鲳幼鱼置于盐度14、25、36的海水中96 h,检测不同盐度下银鲳幼鱼血清渗透压、过氧化氢酶(CAT)以及鳃泡膜质子泵(VHA)、Ca2+-ATP酶、碳酸酐酶(CA)活力随着时间推移而变化的情况。结果显示,血清渗透压变化和盐度呈正相关,并出现波动变化,变化范围为271~379 mOsm/kg,96 h时各盐度组血清渗透压均有恢复正常的趋势。高盐度(36)和低盐度(14)组CAT活力都显著升高而后逐渐恢复(P
关键词：
银鲳 盐度 渗透压 ATP酶 碳酸酐酶
[期刊] 中国农业科学
[作者]
董书伟 高昭辉 申小云 薛慧文 荔霞
【目的】分离和鉴定纳米铜对大鼠肝脏毒性相关蛋白过氧化氢酶(catalase,CAT),探讨CAT在毒性发挥中的作用,为揭示纳米铜对肝脏毒性机制提供依据。【方法】应用2-DE技术和PDQuest 8.0软件在大鼠肝脏蛋白组中筛选纳米铜对肝脏毒性差异蛋白,经质谱鉴定后进行生物信息学分析。【结果】筛选到下调的差异蛋白点6602和7702与肝毒性相关,鉴定均为CAT蛋白;其性质稳定,有一定亲水性,无信号肽,定位于细胞质,可能属于非分泌性蛋白,含有过氧化氢酶活性位点64FDRERIPERVVHAKGAG80和过氧化氢酶亚铁血红素配合基位点354RLFAYPDTH362等功能位点;无规则卷曲、α螺旋和延伸...
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