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[期刊] 水产学报  [作者] 陆剑锋  孟昌伟  李进  宫子慧  林琳  叶应旺  姜绍通  
以斑点叉尾鱼骨酶解胶原多肽液和氯化钙为原料,螯合率为指标,在一定条件下制备胶原多肽螯合钙,并考察温度、pH、时间、多肽与钙的质量比对螯合率的影响。在单因素实验结果的基础上,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面分析法,确定最佳螯合工艺条件为温度60℃、pH 5.4、时间1.5 h、质量比2∶1,此条件下,螯合率达82.53%。紫外吸收和傅里叶变换红外光谱扫描的结果表明,骨胶原多肽与钙形成了螯合物,且其氨基酸组成符合典型的胶原样蛋白特征。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 洪惠  罗永康  吕元萌  刘栋  尤娟  
以鲽鱼骨为原料,采用酶法制备鲽鱼骨胶原多肽螯合钙,优化鲽鱼骨胶原多肽螯合钙合成工艺参数。分析pH与酶解时间对鲽鱼骨胶原多肽功能特性的影响,在单因素试验的基础上采用正交试验,以螯合率为指标,研究多肽液与骨粉酸解液体积比、pH、反应温度和反应时间对骨胶原多肽与鲽鱼骨粉酸解液螯合反应的影响。结果表明:采用碱性蛋白酶为酶制剂,pH为8,温度60℃条件下酶解1h所得的骨胶原多肽具有良好的溶解性、热稳定性和乳化性。采用体积比为3∶1的多肽液与骨粉酸解液为螯合反应液,pH 8,反应温度40℃,螯合40min得到的产品螯合率最高,为98.64%。
[期刊] 水产学报  [作者] 杨勤子   陈丽丽   张照森   吴思雨   汪冰涛   赵利  
为提高鳙鱼骨的高值化利用,实验以鳙鱼头骨粉为原料,胶原多肽得率为指标,筛选最佳水解蛋白酶,进行鳙鱼头骨胶原多肽的工艺优化,并对骨胶原多肽的氨基酸组成、相对分子质量、粒径、电位、显微结构等理化性质进行分析。结果显示,胰蛋白酶为最佳水解酶,骨胶原多肽的最佳酶解工艺为:初始pH 8,酶添加量2.5%,酶解时间5 h,酶解温度50°C,料液比1∶10 (g/mL),胶原多肽得率为52.19%。骨胶原多肽水解后含有17种氨基酸,总含量为76.15 g/100 g,其中酸性氨基酸含量较高。鳙鱼头骨胶原多肽相对分子质量主要在5 000 u以下,占比高达97.81%,表明主要为小分子肽,其平均Z-粒径为(399.90±2.70) nm,多分散指数(PDI)为0.40±0.01,表明物质分布较均匀,并且骨胶原多肽粒子表面呈负电荷状态,具有疏松多孔的结构。研究表明,鳙鱼头骨胶原多肽营养物质较丰富,其小分子肽易于人体吸收,疏松多孔的结构也有利于肽钙螯合物的制备。本研究不仅为鳙鱼骨类产品的精深加工提供理论依据,也为新型钙制剂的制备提供优良原料。
[期刊] 水产学报  [作者] 谭洪亮  郁迪  王斌  胡发远  马剑茵  
为制备金枪鱼鱼骨胶原肽,并对其抗氧化活性进行研究,利用酶解、超滤、凝胶色谱和反相高效液相色谱制备抗氧化胶原肽,采用氨基酸序列分析仪测定其氨基酸序列,利用质谱(ESIMS)确定其分子量,采用羟自由基、DPPH自由基、ABTS自由基和超氧阴离子自由基清除实验和脂质过氧化抑制实验对胶原肽抗氧化能力进行评价。结果显示,金枪鱼鱼骨胶原蛋白经胃蛋白酶和胰蛋白酶2步酶解和分离纯化得到1个十肽(TFCH-P2),经氨基酸序列分析和质谱(ESIMS)确定其氨基酸序列为Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Ala-Gly-Glu-Gln-Gly(GPAGPAGQEG),分子量为839.87 u([M+H]+84...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 冯瑞方  邹潇潇  王凯  刘怀高  洪惠  罗永康  谭雨青  
为了开发牛骨胶原蛋白肽(BBP)的抗疲劳功能,对BBP的氨基酸组成和肽段序列进行表征;选取16只7周龄、SPF级的Balb/c小鼠并随机分为2组,包括对照组(生理盐水)和肽干预组(w(BBP)=200 mg/kg)),每日定时灌胃。BBP干预4周后,测定小鼠的负重游泳时间和运动后血清代谢积累物含量。BBP干预18周后,测定血清氧化因子、炎症因子含量和肠道菌群组成。结果表明:1)BBP疏水性氨基酸比例为61.37%,大部分肽段来源于蛋白P02453(I型胶原蛋白的α1链)。2)BBP干预后小鼠负重游泳时间显著提高,且运动后血氨浓度显著降低、谷胱甘肽浓度显著升高(P<0.05),表明了BBP潜在的抗疲劳能力。3)BBP干预后,在非运动状态下小鼠血清SOD和GSH-Px显著升高,MDA浓度显著降低(P<0.05),表明了BBP潜在的抗氧化能力;在免疫方面,BBP干预后小鼠血清抗炎因子IL-10和促炎因子IL-6、TNF-α浓度均显著下降(P<0.05),主要的免疫器官胸腺指数显著下降(P<0.01),脾指数显著上升(P<0.05);在粪便中,潜在的有益菌Akkermansia、Lactococcus在肽干预后上调。综上,BBP具有潜在的抗疲劳作用,这种作用可能是通过调节体内抗氧化能力以及肠道菌群结构实现的。
[期刊] 海洋渔业  [作者] 黄雯  袁春红  徐萌  王金梅  包建强  
选取淡水鱼斑点叉尾鮰(Ictalurus punctaus,以下简称鮰鱼)和海水鱼蓝点马鲛(scomberomorus nIphonIus,以下简称鲅鱼)鱼皮作为原料,进行胶原蛋白的提取研究。提取方法改良如下:在预处理阶段,鱼皮样品被尽可能切碎且调节溶液更换频率;在提取阶段,在盐析步骤前,添加三羟甲基氨基甲烷粉末将醋酸溶液的酸碱值调节至中性。结果表明,应用改良后的方法提取胶原蛋白,提取周期缩短为7 d。鮰鱼鱼皮胶原蛋白的变性温度是36.5℃,鲅鱼鱼皮胶原蛋白是30.5℃。水解电泳图谱显示,鲅鱼鱼皮胶原蛋白比鮰鱼鱼皮胶原蛋白更易被完全水解,鮰鱼鱼皮胶原蛋白比鲅鱼鱼皮胶原蛋白更稳定。
[期刊] 海洋渔业  [作者] 徐萌  包建强  黄雯  王金梅  
以斑点叉尾鮰(Ietalurus punetaus)鱼皮明胶、壳聚糖、甘油为原料制备可食膜,采用响应面法对可食膜的制备工艺进行优化。在单因素试验的基础上,使用Design-Expert软件对鱼皮明胶添加量、热处理温度与甘油添加量进行三因素响应面试验设计,以抗拉伸强度为响应值优化可食膜性能,并验证响应面预测值与实测值的一致性。结果表明,复合可食膜最佳制备工艺为:鮰鱼皮明胶添加量60%、热处理温度70℃、甘油添加量为10%时,制备得到的明胶-壳聚糖可食膜抗拉伸强度达最大值24.20 MPa,验证结果为23.4
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 吴兵  罗宇良  王敏  曹胜波  王卫民  陈龙  黄锋涛  刘学芹  
利用斑点叉尾鮰卵巢细胞增殖斑点叉尾鮰病毒,然后将经过超速离心纯化的病毒免疫4周龄BABL/C雌鼠。每2周免疫1次,第4次免疫2周后,经眼眶采血,分离血清,通过酶联免疫吸附试验检测其抗体效价,并利用间接免疫荧光试验和与病毒孵育试验检测所制备多克隆抗体的生物活性。结果表明,制备的多克隆抗体ELISA效价为1∶25 600,间接免疫荧光试验证明该多克隆抗体特异性良好,同时与病毒的孵育试验证明该多克隆抗体具备中和活性,能够有效阻断斑点叉尾鮰病毒对细胞的感染。
[期刊] 水产学报  [作者] 霍健聪  邓尚贵  童国忠  
为有效利用鳕鱼加工中产生的鱼骨下脚料,研究采用碱醇法制备了鳕鱼骨钙粉,探讨了鳕鱼骨钙片制备方法,同时以Wistar大鼠为模型研究鳕鱼骨钙片的生物学功效。结果表明,采用NaOH和乙醇浸泡制取鳕鱼骨钙粉的最佳工艺参数为1mol/L NaOH溶液,浸泡时间30h,乙醇浓度60%,浸泡时间15h,制取的鳕鱼骨粉钙含量为27.8%,磷含量12.2%,蛋白质含量3.67%,脂肪含量0.44%。骨粉色泽洁白,无任何异味;粘合剂选用浓度为4%的聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液,填充剂与奶粉的配比为1∶2;崩解时间实验显示鳕鱼骨钙片崩解时间小于12min,无须添加崩解剂。动物实验表明,鳕鱼骨钙片2g/(kg.d)和鳕鱼骨...
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 孔丽丽  张金伟  
为充分利用白鲢鱼骨中的钙和胶原蛋白,采用盐酸溶液对鱼骨进行浸酸预处理,用胃蛋白酶酶解预处理过的鱼骨提取明胶,采用石灰乳中和浸酸废液制备磷酸氢钙。通过对浸酸废液中钙含量和蛋白质浓度的测定优化预处理工艺,以实现浸酸过程中钙尽量溶出而蛋白质溶出量较少的目的,最优的预处理条件为:在料液比1∶5时用质量浓度为2%的盐酸静置浸提鱼骨12 h。以预处理后的鱼骨为原料提取明胶的产率为19.6%,且各项指标符合食品级明胶的要求。将浸酸废液收集后可制备各项指标符合食用级要求的磷酸氢钙,钙回收率33.3%。可为白鲢鱼骨的资源化、高质化利用提供新的途径。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王树云  陈孝煊  王敏  周金敏  于艳梅  岳刚毅  李莉娟  
为获得斑点叉尾鮰疱疹病毒ORF6和ORF10基因,设计特异性引物进行PCR扩增,成功构建pET-32a-ORF6和pET-32a-ORF10原核表达载体,经IPTG诱导后目的蛋白在大肠杆菌中成功表达并制备多抗,通过Western blot证明ORF10的抗体具有特异性,且ORF10为病毒的结构蛋白。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 覃宇  鞠守勇  
【目的】探讨鱼鳞多肽亚铁螯合物的制备方法,为鱼鳞废弃物的利用提供新的途径和理论基础。【方法】以草鱼鱼鳞多肽为原料,氯化亚铁为铁源,通过优化螯合条件得到鱼鳞多肽亚铁螯合物;采用元素分析、紫外光谱、红外光谱、电镜扫描、X-射线粉末衍射分析技术对鱼鳞多肽和多肽亚铁螯合物的结构进行表征。【结果】选择抗坏血酸为抗氧化剂,抗氧化剂与氯化亚铁的质量比为0.15∶1,多肽与氯化亚铁质量比为2∶1,pH 5,反应时间40 min,反应温度30℃的条件下,亚铁螯合率为83.4%;红外光谱特征区-NH_2的吸收峰从3301.42 cm~(-1)移动至3362.61 cm~(-1)处,发生明显的位移;元素分析结果表明螯合物中含铁量为10.6%,N、C、H含量显著降低;扫描电镜观察到螯合后颗粒由圆球空心结构变为致密晶粒;X衍射图谱表明螯合物结晶度大幅提高。【结论】以草鱼鱼鳞和氯化亚铁为原料,按照上述条件得到的多肽亚铁螯合物产率高,亚铁离子与多肽配位明显。
[期刊] 水产学报  [作者] 余海霞  余娟  黄鹤勇  杨水兵  杨志坚  胡亚芹  胡庆兰  任西营  
为有效开发利用鮟鱇鱼骨下脚料,实验采用酶解和超微粉碎技术从鱼骨中制备鱼骨超微钙粉,并对鮟鱇鱼骨超微钙粉进行生物利用率研究。结果显示,采用碱性蛋白酶净化鱼骨的优化条件为酶解温度50℃,酶解时间2.5 h,pH 11.0,用酶量1 300 U/g,此时的净化脱除率为33.8%;经100 min粉碎后的超微钙粉粒度分布较窄,平均粒径达到最小,为626.9 nm;动物实验结果表明,鮟鱇鱼骨超微钙粉的生物利用率较高,经100 min粉碎后的超微钙粉组的钙吸收率为79.3%~83.5%,明显高于对照的碳酸钙组。最优条件下制备的鱼骨超微钙粉色泽洁白,颗粒均匀细腻,无异味,钙含量达29.5%。研究表明,鮟鱇鱼...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 钟立强  李冰  王明华  张世勇  姜虎成  陈校辉  朱健  边文冀  
微生物群落在水产养殖环境中起着重要作用,深入了解微生物群落组成及其构建机制对了解池塘生态功能具有重要意义。本研究通过高通量测序技术研究斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)养殖池塘底泥中细菌群落机构特征,并分析了细菌群落的主要影响因素。结果显示,斑点叉尾鮰养殖池塘底泥细菌群落结构呈现出季节性变化,冬春季样品相似性较高。斑点叉尾鮰养殖池塘底泥优势菌群主要为变形菌门(Proteobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)和酸杆菌门(Acidobacteria),与池塘水体细菌群落间有明显的差别。线性判别分析显示,冬、春和秋季的特异性优势菌群较为丰富,冬季和春季分布较为集中,分别集中于浮霉菌、拟杆菌门、绿弯菌门和厚壁菌门、拟杆菌门,秋季特异性优势菌群分布特别分散,而夏季优势细菌类群最少,只有绿弯菌门厌氧绳菌属1个属具有显著优势。环境因子中,透明度和总溶解性悬浮物与斑点叉尾鮰养殖池塘底泥细菌群落结构有显著相关(P<0.05),对细菌群落结构的影响也最大。本研究旨为斑点叉尾鮰池塘微生物群落的变化和调控提供借鉴。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 汪开毓  耿毅  黄小丽  陈德芳  
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