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[期刊] 海洋渔业
[作者]
黄雯 袁春红 徐萌 王金梅 包建强
选取淡水鱼斑点叉尾鮰（Ｉｃｔａｌｕｒｕｓ ｐｕｎｃｔａｕｓ，以下简称鮰鱼）和海水鱼蓝点马鲛（ｓｃｏｍｂｅｒｏｍｏｒｕｓ ｎＩｐｈｏｎＩｕｓ，以下简称鲅鱼）鱼皮作为原料，进行胶原蛋白的提取研究。提取方法改良如下：在预处理阶段，鱼皮样品被尽可能切碎且调节溶液更换频率；在提取阶段，在盐析步骤前，添加三羟甲基氨基甲烷粉末将醋酸溶液的酸碱值调节至中性。结果表明，应用改良后的方法提取胶原蛋白，提取周期缩短为７ ｄ。鮰鱼鱼皮胶原蛋白的变性温度是３６．５℃，鲅鱼鱼皮胶原蛋白是３０．５℃。水解电泳图谱显示，鲅鱼鱼皮胶原蛋白比鮰鱼鱼皮胶原蛋白更易被完全水解，鮰鱼鱼皮胶原蛋白比鲅鱼鱼皮胶原蛋白更稳定。
关键词：
斑点叉尾鮰 蓝点马鲛 胶原蛋白 提取方法
[期刊] 淡水渔业
[作者]
李华
为了开发和利用大鲵皮胶原蛋白,在低温4℃条件下使用酶解工艺提取养殖大鲵皮中的胶原蛋白,并研究了其组成和部分生化性质。结果表明:大鲵皮羟脯氨酸含量为22.3 mg/g,胶原蛋白提取率为26.7%(湿重),其中水分、粗灰分、粗脂肪和粗蛋白含量分别为6.75%、0.62%、0.38%和92.10%,含有成人六种必需氨基酸和儿童必需氨基酸两种,亚氨基酸含量为171残基/1 000残基数,脯氨酸羟基化比例为51.5%。紫外吸收显示大鲵皮胶原蛋白的强吸收峰在230 nm附近,根据SDS-PAGE分析,含有两种不同的α链(α1和α2),初步确认提取得到的大鲵皮胶原蛋白是Ⅰ型胶原蛋白。
[期刊] 水产学报
[作者]
黄小丽 汪开毓 耿毅 苏秀梅 陈德芳
采用硫酸铵盐析,DEAE Sephadex A-50凝胶层析等方法从嗜麦芽寡养单胞菌胞外产物中提纯了一种分子量为45.7ku的单一多肽蛋白酶。该酶对小鼠和斑点叉尾鮰具有明显的致死作用,其LD50分别为4.33μg.g-1体重和3.49μg.g-1体重。酶的最适温度为20℃,热稳定性差,100℃作用15min酶活完全丧失,最适pH为9.0,PMSF对酶活无影响,部分金属离子如Ca2+、Hg2+、Cu2+能使酶活性明显下降,而Co2+对酶有一定程度的激活作用,EDTA能完全抑制酶活性,表明该酶为一种金属蛋白酶。
[期刊] 水产学报
[作者]
彭新颜 孟婉静 周夕冉 张梦洁
为研究蓝点马鲛鱼皮多肽在肉体系中的抗氧化作用,以猪肉糜为材料,探讨了蓝点马鲛鱼皮抗氧化肽段对冷藏过程中熟肉糜脂肪和蛋白氧化的抑制效果。将实验肉糜分为6组,第1组为空白对照组,第2组加入2.0%的6 h蓝点马鲛鱼皮冻干水解物,第3~5组中分别加入1.0%、1.5%和2.0%的超滤肽段FractionⅡ(分子量1~4 ku;羟基清除率达55.1%)冻干粉,第6组中加0.02%的BHA。在4℃冷藏过程中测定熟肉糜的硫代巴比妥酸值(TBARS)、过氧化值(PV)、羰基含量、总巯基含量和p H值,并对感官指标进行了评定。结果表明,与空白对照比,添加蓝点马鲛鱼皮6 h水解物和抗氧化肽段(FractionⅡ...
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
傅燕凤 沈月新 杨承刚 张渊
研究了用有机酸(醋酸、柠檬酸、乳酸)对几种主要的淡水鱼,鲢(Hypophthalmichthys molitrix)、鳙(Aristichthys nobdis)、草鱼(Glenopharyngodon idellus)鱼皮胶原蛋白进行提取。研究发现,鲢、鳙、草鱼鱼皮的蛋白质含量分别约为25.9％、23.6％、29.8％,羟脯氨酸含量分别为1.8％、1.9％、2.3％。结果表明,鲢、鳙鱼皮经2.5％NaCI溶液(1:10),草鱼鱼皮经5％NaCl溶液(1:10),温度5℃左右,12h磁力搅拌处理两次,除去的可溶性杂蛋白分别占原总蛋白的5.9％、6.7％、9.1％。鱼皮再经加酸(1:30)溶胀、...
关键词：
鱼皮 胶原蛋白 提取
[期刊] 水产学报
[作者]
周瑞 李若男 周丽莎 邱婷婷 王静玉 谭啸 陈舜胜
为增加暗纹东方鲀附加值，考察不同处理方法对提取暗纹东方鲀鱼皮胶原蛋白的影响，本研究以暗纹东方鲀鱼皮为研究对象，通过热水法、酸法和胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶处理鱼皮提取 胶原蛋白。通过对不同胶原蛋白的提取率、氨基酸组成、傅里叶红外光谱（FTIR）、紫外光谱(UV)、扫描电镜、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的研究，对暗纹东方鲀鱼皮胶原蛋白特性进行表征和比较。结果显示，用胃蛋白酶得到的胶原蛋白提取率最高；氨基酸组成相似但含量不同；3种酶制备的胶原蛋白中脯氨酸含量显著低于酸和热水制备的胶原蛋白；FTIR扫描结果表明，5种处理方法得到的胶原蛋白都存在Amide A、Amide B、Amide Ⅰ、Amide Ⅱ和Ⅲ，均保持了胶原蛋白三螺旋结构；紫外光谱显示在235 nm左右有强吸收峰，结合FTIR确定其为典型的胶原蛋白，经过SDS-PAGE分析确定暗纹东方鲀皮中的胶原蛋白为Ⅰ型胶原蛋白，酸法和胃蛋白酶较好的保留了蛋白结构，木瓜蛋白酶作用化学键广泛，得到小分子量的胶原蛋白分子；扫描电镜结果显示，酸法提取的胶原蛋白最适合应用在生物医学材料上运载药物。由此可见，不同处理方法提取的胶原蛋白理化特性存在一定差异，不同的酶制备胶原蛋白分子量分布会产生明显差别，可根据研究需要选用不同处理方法开发胶原蛋白产品。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
徐萌 包建强 黄雯 王金梅
以斑点叉尾鮰(Ietalurus punetaus)鱼皮明胶、壳聚糖、甘油为原料制备可食膜,采用响应面法对可食膜的制备工艺进行优化。在单因素试验的基础上,使用Design-Expert软件对鱼皮明胶添加量、热处理温度与甘油添加量进行三因素响应面试验设计,以抗拉伸强度为响应值优化可食膜性能,并验证响应面预测值与实测值的一致性。结果表明,复合可食膜最佳制备工艺为:鮰鱼皮明胶添加量60%、热处理温度70℃、甘油添加量为10%时,制备得到的明胶-壳聚糖可食膜抗拉伸强度达最大值24.20 MPa,验证结果为23.4
关键词：
响应面 斑点叉尾鮰 鱼皮 明胶 可食膜
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
周探春 刘焱 邓放明
以蛋白质水解度为考察指标,从木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶中筛选水解斑点叉尾鮰下脚料的适宜蛋白酶,并通过单因素试验和正交试验优化工艺条件。结果表明:5种蛋白酶中复合蛋白酶的水解度最高;复合蛋白酶酶解斑点叉尾鮰下脚料的最佳酶解条件为温度55℃,时间4 h,pH 9.0,酶质量浓度2 500 U/g,料液比1∶3,在该条件下,蛋白质的水解度为53.26%。
关键词：
斑点叉尾鮰 蛋白质 蛋白酶 水解度
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王树云 陈孝煊 王敏 周金敏 于艳梅 岳刚毅 李莉娟
为获得斑点叉尾鮰疱疹病毒ORF6和ORF10基因,设计特异性引物进行PCR扩增,成功构建pET-32a-ORF6和pET-32a-ORF10原核表达载体,经IPTG诱导后目的蛋白在大肠杆菌中成功表达并制备多抗,通过Western blot证明ORF10的抗体具有特异性,且ORF10为病毒的结构蛋白。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李晓敏 杨晨宇 邓云 陶宁萍 李立 邱伟强 金银哲
利用响应面法对日本鳗鱼皮胶原蛋白的提取工艺进行优化，并对其理化性质和致敏性进行研究。采用酸酶浸提法提取鱼皮胶原蛋白，基于单因素试验，以料液比、提取液浓度和提取时间作为考察因素，以胶原蛋白得率为指标，得到最佳提取工艺为：料液比1:30 g/mL，提取液浓度0.6 mol/L，提取时间48 h，胶原蛋白得率为32.89%。将优化后得到胶原蛋白进行理化性质表征分析，SDS-PAGE结果表明，胶原蛋白含有五个条带，属于Ⅰ型胶原蛋白；必需氨基酸和药用氨基酸占比分别为19.61%和11.04%；傅里叶红外光谱（FTIR）光谱显示其保留了完整的三螺旋结构；在230 nm处有最大的紫外吸收峰；由扫描电镜（SEM）显示胶原蛋白的微观结构呈现出纤维状结构；胶原蛋白的热转变温度和热变性温度分别为38.5 ℃和28.3 ℃；酶联免疫吸附反应（ELISA）和模拟胃肠液实验可知胶原蛋白具有一定的致敏原性，为鳗鱼皮胶原蛋白的进一步研究提供理论基础。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
夏露 汪成竹 陈昌福
利用从嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、柱状嗜纤维菌(Cytophaga columnaris)和叉尾鮰爱德华菌(Edwardsiella ictaluri)中提取的外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)作为免疫原,注射接种斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus Rafinsque)后,通过测定受免鱼的交叉凝集抗体效价、肾脏和血液中吞噬细胞的吞噬活性和采用A. hydrophila活菌攻毒方法,比较了3种致病菌OMP对斑点叉尾鮰的免疫原性。试验结果表明:从3种致病菌中提取的OMP对斑点叉尾鮰均具有较强的免疫原性,受免鱼的血清中存在对...
[期刊] 水产学报
[作者]
汪海波 梁艳萍 李云雁 王敏 方成 汪海婴
为探讨不同交联方法对草鱼皮胶原蛋白海绵材料性能的影响,实验以草鱼鱼皮为原料,提取、纯化胶原蛋白并制备胶原海绵材料。在此基础上,分别用紫外交联、热交联、戊二醛交联以及EDC/NHS交联方法处理胶原海绵,通过测定材料的交联度、热变性温度、拉伸强度和体外抗酶降解性能,比较了不同方法的交联效果。结果发现,提取所得的草鱼皮胶原蛋白为典型的Ⅰ型胶原;经不同方法交联处理后,海绵材料交联度依次为戊二醛(72.0%)>EDC/NHS(32.5%)>热交联(29.9%)>紫外交联(15.6%);与对照胶原材料相比,戊二醛处理后,胶原材料的热变性峰值温度(67.4℃)、最大拉伸强度(125.6 kPa)和体外抗酶降...
关键词：
草鱼 鱼皮 胶原蛋白 交联
[期刊] 水产学报
[作者]
曾庆祝 许庆陵 郭恒斌
测试了鱿鱼皮胶原蛋白的特征吸收光谱和分子量分布,比较了胶原蛋白的溶解性、保水性、湿润性、吸油性、乳化性及乳化稳定性、起泡性及泡沫稳定性等应用功能特性。结果表明:(1)3种方法(热水法、酸法和酶法)提取的鱿鱼皮胶原蛋白均在220 nm处有最大吸收,胶原蛋白的分子量为220 ku左右;(2)热水法和酶法提取的胶原蛋白的溶解性能要好于酸法胶原蛋白;(3)提取的3种胶原蛋白均具有一定的保水性,分别为0.54%、0.52%和0.55%;(4)热水法和酶法提取的胶原蛋白的润湿性较好;(5)3种胶原蛋白均具有良好的吸油性,分别为2.7、3.0和3.3 mL/g;(6)3种胶原蛋白拥有较好的乳化性和乳化稳定性...
关键词：
鱿鱼皮 胶原蛋白 酶解 功能特性
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
孟艳青 党广成 刘洋 王启龙 沙珍霞
本研究克隆了斑点叉尾中血浆铜蓝蛋白基因全长cDNA序列,其中5′非翻译区(5′-UTR)25bp、3′非翻译区(3′-UTR)860bp、开放阅读框(Open reading frame,ORF)3 225bp,编码一条含有1 074个氨基酸的多肽链。与其他真核生物血浆铜蓝蛋白成员进行同源性比较,表现出较高的保守性。本研究利用荧光实时定量PCR技术分析了斑点叉尾血浆铜蓝蛋白基因在正常组织和被不同病菌感染后的肝脏、肠、头肾及脾脏中的表达。结果发现,正常组织中血浆铜蓝蛋白基因在正常肝脏中表达最强烈。4种病原(迟钝爱德华氏菌、海豚链球菌、嗜水气单胞菌和斑点叉尾呼肠孤病毒)引起的血浆铜蓝蛋白基因...
关键词：
斑点叉尾 血浆铜蓝蛋白 感染 差异表达
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