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[期刊] 华北农学报  [作者] 金 红  杜胜利  陈 峥  张 力  程 奕  魏爱民  王 永  
黄瓜抗除草剂转基因T0植株经除草剂抗性筛选,连续2代自交获得T1和T2种子;分别对T1植株进行bar基因PCR检测和T2植株Southern杂交检测,证明bar基因已整合到黄瓜染色体上;以非转基因黄瓜为对照,摸索出田间抗性鉴定和室内种子抗性鉴定的除草剂临界浓度;从田间和室内筛选除草剂抗性纯合性转基因株系3个;以表现较好的2个抗性纯合转基因株系为父本,与非转基因母本杂交,获得F1种子,并在室内进行了杂交种纯度鉴定,鉴定效率达100%。建立了一套在种子发芽阶段或2片真叶期进行黄瓜杂交种纯度鉴定的新技术。
[期刊] 华北农学报  [作者] 张国裕  张帆  姜立纲  翟伟卜  李海真  
为利用SSR标记进行快速、准确的南瓜杂交种纯度分析,进行了南瓜EST-SSR标记的开发。从NCBI数据库下载1 457条南瓜属作物EST序列,去除冗余序列后进行SSR位点搜索,共得到215条含有SSR位点的EST序列。这些SSR位点包含111种重复基元,其中二核苷酸(62个,占28.84%)和三核苷酸(86个,占40.0%)重复类型占主导地位;重复基元中出现最多的是CT(21个,占9.77%),其次为TC(13个,占6.05%)和AAG(12个,占5.58%)。将215个SSR位点设计成EST-SSR引物后,随机合成了其中的43对引物。利用4份遗传背景差异较大的南瓜自交系对合成的43对引物进行...
[期刊] 华北农学报  [作者] 金红  杜胜利  陈峥  魏爱民  
从影响黄瓜转基因体系的外植体类型、农杆菌共浸染时间、是否加入乙酰丁香酮等因素摸索,建立了黄瓜遗传转化体系;将抗除草剂基因bar以农杆菌共浸染法导入到黄瓜父本品种M1子叶中,经历愈伤组织分化、芽诱导和生根等过程获得落地转化株系,通过特异性引物的PCR鉴定,13个株系扩增出bar基因片段。T0自交获得T1转基因植株,经1000倍除草剂巴士达喷施处理,其中84%表现为较高的抗性。
[期刊] 世界农业  [作者] 赵彬  
抗除草剂基因的研究和利用浙江农业大学农学系赵彬除草剂必须识别作物和杂草,才能在农田中安全有效地使用。然而,除草剂消灭杂草而不伤害作物的选择性是很难获得的特性,因为除草剂所影响的植物生理生化过程,如光合作用和氨基酸的生物合成,对作物和杂草是共同的。目前...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 籍贵苏  杜瑞恒  侯升林  程汝宏  王新玉  赵秀萍  
目的研究细胞质抗除草剂基因对谷子性状和发育的影响。方法利用细胞质抗除草剂谷子与敏感型谷子正反交和多代回交等方法,获得了同核异质杂交群体和近等基因系,比较其F1、F2、回交和复合杂交世代的群体差异和近等基因系的生长发育差异。结果具有抗除草剂细胞质的谷子苗期发育迟缓、抽穗晚,灌浆时间短;用其杂交获得的回交、复合杂交及F2的多数群体表现了生长弱势。但是具有细胞质除草剂抗性的谷子,在杂交F1代可产生较大的杂种优势;回交、复合交和F2代有较大的分离,并且个别组合表现了与敏感细胞质一样的丰产性。结论细胞质抗除草剂基因对谷子的生长和性状发育有影响,但利用杂交种可避免细胞质抗性产生的不利影响,获得丰产性;对抗...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 蒋莉莉  张高原  张建农  
【目的】研究有效的西瓜杂交组合种子纯度的SSR标记鉴定方法,为室内鉴定的实际应用提供理论依据。【方法】以西瓜杂交组合T-1及其亲本自交系P-1、M-13为材料,在子叶展平期采用CTAB法提取DNA,利用优化的西瓜SSR标记方法进行杂交种子的纯度鉴定,并与田间表型鉴定进行比较。【结果】从36对SSR引物中筛选出3对(MCPI-5、MCPI-16、MCPI-17)稳定性强、可重复性好、在杂交种及其母本之间具有多态性的引物。将这3对引物中的MCPI-5和MCPI-16用于267株T-1杂交种群体纯度鉴定,显示种子纯度为97.75%,与田间种植鉴定结果一致。【结论】3对SSR引物MCPI-5、MCPI...
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 何云芳  高立旦  施玲玲  郑国良  金佩英  高智慧  
使用果尔、禾纳斯、丁草胺和克芜踪等 1 0余种除草剂 ,对浙江省的圃地、草坪、地被及林地等的化学除草进行了应用研究。研究结果表明 :化学除草剂种类多 ,效用不同 ,应依不同目的有选择地合理运用。几种除草剂合用效果更好 ,如把果尔、禾纳斯和丁草胺分别加入克芜踪 ,除草效果均优于其单一使用 ,除草率都在 91 %以上。化学除草明显省工省成本 ,只是不同植物类型的区域 ,节省的成本多少不同。在实行化学除草时 ,各种植物对药物的敏感性不一样。绝大部分除草剂都能保护主体植物而杀灭杂草 ,但如果施用量不当 ,会产生药害。表 6参 8
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李海梅  沈佳  赵娟  娄群峰  李季  陈劲枫  
[目的]基于黄瓜线粒体父系遗传特性,研究线粒体基因组SSR(mitochondria genome simple sequence repeat,mt SSR)标记技术在黄瓜杂交种纯度鉴定上的可行性。[方法]根据黄瓜线粒体基因组序列开发特异性标记,选用不同生态型的黄瓜品种对标记进行筛选,利用多态性引物对人为掺假的黄瓜F1种子进行纯度检测。[结果]从72对标记中,共筛选出4对在30份黄瓜品种呈现出多态性的引物,其中mt SSR4引物扩增出102和107 bp的多态性片段;mt SSR10引物扩增出196、224和242 bp的多态性片段;mt SSR29引物扩增出226、239和280 bp的多...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 高海娜  张恩慧  李殿荣  王灏  马英夏  许忠民  
【目的】分析甘蓝杂交种纯度的SSR分子标记鉴定结果与田间形态学鉴定结果的一致性,寻找一种快速、准确鉴定甘蓝杂交种纯度的方法。【方法】选用SSR分子标记,筛选杂交种具有父母本互补带型的引物,用其鉴定"秦甘50"杂交种的纯度,并与田间常规鉴定结果的一致性进行比较。【结果】300对SSR分子标记引物中,有1对引物SQ1019对"秦甘50"杂交种表现为父母本互补带型;利用引物SQ1019标记鉴定"秦甘50"大田杂交种的纯度为96.3%;"秦甘50"大田杂交种经田间鉴定纯度为96.0%,2种鉴定结果的一致性高达99.7%。【结论】SQ1019是SSR分子标记"秦甘50"杂交种的特异引物,SSR分子标记是...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 孙越  刘秀霞  李丽莉  官赟赟  张举仁  
【目的】培育抗玉米螟、抗草甘膦、抗旱的转基因复合性状玉米种质。【方法】通过农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化法,把重组到同一植物表达载体的cry1Ac M、epsps、GAT和Zm PIS转入玉米骨干自交系9801和齐319(Q319),获得转基因植株。通过逐代除草剂筛选、分子检测和抗虫性鉴定,从大量转基因株系中优选出6个优良玉米株系。在此基础上,以非转基因自交系9801、Q319为对照,在严格控制条件下对6个转基因株系进行抗虫、抗除草剂和抗旱性检测。由于不同生长时期植株对玉米螟危害的敏感程度有差异,在抗虫性检测试验中,对不同生长阶段的转基因玉米的抗虫性,分别进行了田间和室内玉米螟接种试验,并以灌浆...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 段院生  刘平武  杨光圣  
通过对杂交组合H990 9两亲本的指纹图谱分析 ,初选出 4个引物S374、S1334、S136 5和UBC5 2 3用于杂种纯度鉴定。引物S1334和UBC5 2 3在两亲本中均扩增出特异带 ,引物S374和S136 5能扩增出父本标记带。以两亲本和手工杂种F1为模板对上述 4个引物再一次进行RAPD扩增 ,S1334并没有在F1的RAPD图谱产生理想的双亲型或偏父型标记带 ,UBC5 2 3在F1扩增得到的父本标记带和在母本中扩增的标记带大小相近 ,不易辨别 ;引物S374、S136 5均能使F1扩增出父本的特异带 ,进一步确定引物S374和S136 5可用于杂种鉴定。引物S374的RAP...
[期刊] 华北农学报  [作者] 韩毅科  杜胜利  张桂华  魏爱民  
用Oryzalin对黄瓜茎尖进行四倍体诱导试验,结果表明,浓度为100~200μmol/L Oryzalin处理24 h对黄瓜茎尖离体四倍体诱导较为合适,可以有效代替秋水仙素。和秋水仙素相比,Oryzalin使用的浓度低,效果好,且毒性小,对人和环境比较安全,为诱导黄瓜染色体加倍的理想诱导剂。并用流式细胞仪对黄瓜离体诱导的幼苗进行了倍性分析试验。
[期刊] 华北农学报  [作者] 任伟  王嘉莹  任华华  王英哲  王梦寒  徐安凯  
为了提高紫花苜蓿的抗盐碱能力,利用盐生植物碱茅的PuCAT基因成功构建了p3300-35S-PuCAT-NOS植物表达载体,以Bar基因为筛选标记基因,通过农杆菌介导转化公农5号紫花苜蓿子叶,并对其遗传转化体系进行了优化(预培养、菌液浓度、侵染时间、共培养、抗生素浓度),经草铵膦筛选获得72株抗性植株,用PCR检测和RT-PCR鉴定,最终获得30株RT-PCR阳性植株。结果表明,PuCAT基因已经整合在苜蓿基因组中,并且能够在RNA水平上表达。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王舟  宋小玲  皇甫超河  强胜  
采用人工授粉的方法,分别以转基因抗草丁膦和抗草甘膦油菜为母本,野芥菜为父本,研究野芥菜的基因流动到转基因油菜中的可能性。结果表明,野芥菜和抗草丁膦及抗草甘膦油菜的亲和性指数明显低于其自交授粉的亲和性指数,只有0.44和0.54。经除草剂筛选和PCR检测证明,所有F1都携带了相应的抗性基因并表现出对相应除草剂的抗性。对F1的适合度研究表明,两种F1种子萌发率及营养生长情况和野芥菜没有明显差异,但结实明显下降,携带抗草丁膦基因的F1和携带抗草甘膦基因的F1每个角果饱满种子粒数分别是0.50和0.61。分别以两种F1为母本,野芥菜为父本进行回交,结实仍然很低,携带抗草丁膦基因的F1和携带抗草甘膦基因...
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