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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
曹军 徐建生 成大荣 孙怀昌 唐波
制备重组猪三十九肽胆囊收缩素(GST-CCK39),以其为抗原免疫28周龄的蛋鸡,用水稀释脱脂处理,聚乙二醇(PEG)一步法制备高效价卵黄抗体,并用免疫琼脂扩散试验、ELISA、Dot-ELISA检测其效价及特异性。结果表明,免疫琼脂扩散测得特异性抗体效价达1∶16以上,ELISA效价达1∶12 800以上;Dot-ELISA显示所获得卵黄抗体具有较强的特异性;高效价,特异性的卵黄抗体可维持50 d以上。表明用重组蛋白GST-CCK39免疫蛋鸡后能获得效价高、特异性强的卵黄抗体。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
胡青松 李吕木 张小飞 许发芝 丁小玲 徐延伟 丁维民
【目的】探讨猪流行性腹泻病毒(PEDV)3种不同抗原制备的卵黄抗体对PEDV的中和能力,为抗猪流行性腹泻卵黄抗体的制备提供新的方法和理论基础。【方法】根据PEDV S糖蛋白基因设计引物扩增PEDVS534基因(636~789位氨基酸)和PEDV COE基因(499~638位氨基酸),并构建原核表达质粒pET32a-PEDV S534和pET32a-COE,分别转化表达菌株BL21(DE3)进行诱导表达。以原核表达的PEDV S534蛋白、COE蛋白以及PEDV灭活病毒为抗原,分别免疫产蛋鸡并制备卵黄抗体,通过病毒中和试验评价各卵黄抗体的中和效力。【结果】成功表达了PEDV S534蛋白和COE...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
袁雪梅 吕孙建 施伟达 杭小英 刘莉 吴颖蕾
本研究从爆发性死亡的大口黑鲈(Micropterus salmoides)鱼苗病样中分离培养1株大口黑鲈弹状病毒(M. salmoides rhabdovirus, MSRV)毒株,采用甲醛灭活大口黑鲈弹状病毒,制备佐剂灭活疫苗,免疫产蛋鸡,收集高免蛋,制备MSRV卵黄抗体,测定其效价、中和效果及对病毒复制和宿主细胞内凝集素基因(intelectin)表达的影响。结果显示,成功利用草鱼(Ctenopharyngodon idellus)卵巢细胞株CO细胞分离培养大口黑鲈鱼弹状病毒,并用于佐剂灭活疫苗的制备;MSRV佐剂灭活疫苗免疫蛋鸡,成功获得MRSV的卵黄抗体,效价为1∶256,稀释度为1∶64时的中和病毒的作用最为明显,中和作用率达38.29%以上,病毒核酸拷贝数明显降低。同时,还可上调细胞内凝集素的表达。研究表明,特异性卵黄抗体对大口黑鲈弹状病毒具有明显的中和效果,为后续卵黄抗体作为免疫制剂的应用奠定了基础。
关键词：
大口黑鲈 弹状病毒 卵黄抗体 病毒中和
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
李国平 周伦江 姚金水 李沁光 李孟潮 黄沧海
用猪致病性大肠杆菌 K88、K99、987P、F4 1 标准菌株制成的灭活油佐剂作为免疫原 ,待产蛋鸡免疫后收集高免卵黄 ,然后提取、纯化 ,精制成鸡抗猪大肠杆菌特异性高免卵黄抗体并用于临床 .结果表明该制剂安全性好 ,每头仔猪注射或口服 2-4m L剂量预防仔猪大肠杆菌性腹泻 ,效果明显
关键词：
精制卵黄抗体 防治 仔猪大肠杆菌性腹泻
[期刊] 华北农学报
[作者]
徐福洲 王金洛 杨兵 宋维平 赖平安 秦泽荣 孟彦妮
利用产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC)标准菌株K88,K99,987P制备灭活苗,免疫待开产母鸡,应用琼脂扩散试验检测母鸡血清抗体和卵黄抗体(IgY)效价,在琼扩效价≥1∶64时收集卵黄,卵黄经氯仿去脂、硫酸胺沉淀后提纯出卵黄抗体,将提纯卵黄抗体对攻毒仔猪口服治疗,结果显示治疗仔猪腹泻状况明显减轻,与对照组相比有显著差异;治疗组未出现死亡而对照组仔猪有33%～67%的死亡率。试验结果表明,研制的IgY对ETEC所致的仔猪腹泻具有明显的效果。
关键词：
仔猪腹泻 产肠毒素大肠埃希氏菌 卵黄抗体
[期刊] 水产学报
[作者]
张林鹏 杨诗燚 白艳韩 刘沥涵 陶俊杰 林蠡 秦真东
为研究三联特异性卵黄抗体对哈维氏弧菌、溶藻弧菌与副溶血性弧菌的体外抑菌效果，通过制备哈维氏弧菌、溶藻弧菌与副溶血性弧菌三联灭活疫苗，免疫蛋鸡。收集鸡蛋制备卵黄抗体并检测其效价、纯度和特异性。通过免疫荧光、扫描电镜和体外抑菌实验初步探究其制备的三联特异性卵黄抗体对3种弧菌的体外抑菌效果。结果显示，ELISA检测特异性卵黄抗体效价高达1∶51 200，并维持5周；SDS-PAGE对分离纯化的卵黄抗体分析显示，随着纯化步骤的进行，卵黄抗体中的蛋白杂带逐渐减少，纯度变高。免疫荧光和免疫印迹实验表明，特异性卵黄抗体与抗原的结合具有较高的特异性。扫描电镜进一步观察发现，相比非特异性卵黄抗体，特异性卵黄抗体处理过的弧菌，菌体互相黏附在一起，菌体细胞表面粗糙，细胞壁破损。在体外抑菌实验中，特异性卵黄抗体对弧菌具有明显的抑制效果，且抑制作用呈现剂量依赖性。研究表明，三联特异性卵黄抗体能够与哈维氏弧菌、溶藻弧菌和副溶血性弧菌发生特异性结合，通过体外实验发现，卵黄抗体通过凝集和黏附，破坏菌体细胞的完整性，从而发挥抑菌作用。实验结果为研发绿色、安全、高效的抗哈维氏弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌三联特异性卵黄抗体提供理论和实验基础。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
赵茹茜 韩正康 张崇理
采用放射免疫分析法,测定鹅外周血液中八肽胆囊收缩素样免疫活性(CCK-8LT),观察禁食和抱窝期摄食抑制状态下血浆 CCK-8LI 水平的变化.结果如下:(1)刚饲喂混合精料后,鹅血浆中 CCK-8LI显著升高,为禁食时水平的2.6倍,揭示外周血液中 CCK-8LI 在鹅摄食活动的短期调节中起作用;(2)在持续4周的抱窝期内,母鹅血浆 CCK-8LI 显著低于醒抱后恢复期水平.血浆中 CCK-8LI 是否参与鹅抱窝期摄食抑制的调控,有侍进一步研究.
[期刊] 中国农业科学
[作者]
赵静 孙洋 谭永安 肖留斌 姜义平 柏立新
【目的】制备甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg)多克隆抗体,并检测甜菜夜蛾不同发育时期血淋巴中的Vg蛋白表达量变化,为进一步研究Vg转运与利用机制以及生物学功能打下基础。【方法】以羽化24 h的甜菜夜蛾雌成虫c DNA为模板,通过PCR扩增得到甜菜夜蛾Vg基因片段,其包含vitellogenin-N结构功能区。将Vg目的片段连入pMD-19T载体后进行测序,利用DNAMAN软件分析该基因序列的准确性及编码蛋白的特性。将测序正确的Vg基因片段通过Nde
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
石德时 王桂枝 毕丁仁 覃雅丽 殷斌烈
采用改进的混合酸酐法合成的免疫原氯霉素琥珀酸酯牛血清白蛋白 (CAP HS BSA) ,经红外波谱鉴定后 ,免疫 5只家兔 ,3个月后 ,产生合格氯霉素抗血清 ,用双向琼脂扩散方法测定效价为 1:16。此氯霉素 (CAP)抗血清与氯霉素半琥珀酸酯和琥珀酸钠氯霉素的交叉反应率分别为 85 0 .0 %、80 0 .0 % ,与磺胺二甲嘧啶、磺胺 5 甲氧嘧啶、水溶性氟哌酸、青霉素、链霉素的交叉反应率均小于 0 .0 1%。
关键词：
氯霉素 人工抗原 抗血清
[期刊] 华北农学报
[作者]
王金洛 杨兵 宋维平 秦泽荣 赖平安 徐福洲
采用 1日龄北京油鸡 90只 ,随机分为试验组 60只和对照组 30只。试验组自 7日龄起 ,每 10d自颈部皮下注射SS IgY制剂 1mL ;对照组做平行处理。生长试验的结果表明 ,试验组油鸡的周增重显著高于对照组 ,且其SS IgY的促生长效率最高为 88 32 %。屠宰试验也表现出与之相似的结果 ,即试验组油鸡屠宰体重、胴体重以及胸肌和腿肌重均比对照组高 ,但其屠宰率两组间无明显差异。上述结果显示 ,SS IgY可提高北京油鸡的生长速度
关键词：
SS-IgY 北京油鸡 生长
[期刊] 华北农学报
[作者]
宋维平 徐福洲 王金洛 杨兵 赖平安 孟彦妮
将猪流行性腹泻病毒(PEDV)免疫原免疫产蛋母鸡,收集卵黄提纯制备高效价卵黄抗体,作为治疗剂应用于试验感染腹泻仔猪,结果显示卵黄抗体具有显著的治疗效果,治疗组腹泻症状明显减轻,多数在5d后恢复正常,死亡率仅有16 7%;而对照组呈水样腹泻,最后脱水衰竭而死,死亡率为100%,两者差异极显著。
关键词：
猪流行性腹泻病毒 仔猪腹泻 卵黄抗体
[期刊] 西南农业学报
[作者]
曾礼华 马慧敏 王之盛 周安国
本试验选取168只45周龄未接种大肠杆菌疫苗且体重及产蛋率相近的商品代尼克珊瑚粉产蛋鸡,采用均匀试验设计方法,设7个处理(包含1个基础对照组,1个疫苗对照组。除基础对照组外,其他各组均接种大肠杆菌疫苗,所用抗原为大肠杆菌为K88、K99、987p标准菌株),每个处理4个重复,每个重复6只鸡。研究了在日粮中添加纳米硒、碘对鸡蛋中抗猪大肠杆菌卵黄抗体产量的影响。结果表明:蛋鸡日粮中添加纳米硒、碘能显著提高卵黄抗体产量(P<0.05),比疫苗对...
关键词：
纳米硒 碘 鸡 卵黄抗体
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王绿阳 康翠翠 丁立人 冯江银 洪秋霞 游美敬 保浩宇 杭苏琴
[目的]本文旨在探究苯丙氨酸(Phe)体外灌流对猪十二指肠组织胆囊收缩素(CCK)分泌的影响,以及钙敏感受体(CaSR)、鲜味受体(T1R1/T1R3)、下游磷脂酶C(PLC)和瞬时受体电位离子通道蛋白5(TRPM5)在该过程中的作用。[方法]以猪十二指肠为研究对象,利用免疫印迹技术检测CaSR在猪十二指肠上的表达;在此基础上,利用组织体外灌流系统探究Phe对猪十二指肠CCK分泌的影响,再通过抑制剂或激活剂揭示CaSR、T1R1/T1R3以及PLC和TRPM5对CCK分泌的作用。[结果]猪十二指肠表达CaSR;50 mmol·L~(-1)L-Phe而非D-Phe能够显著刺激CCK的分泌(P0.05);通路下游PLC抑制剂U-73122(10μmol·L~(-1))和TRPM5抑制剂氧化三苯基磷(TPPO,100μmol·L~(-1))均可显著抑制L-Phe诱导的CCK分泌(P
[期刊] 中国农业科学
[作者]
罗利 张静 刘媛 余向阳 马志卿 冯俊涛 刘贤进 张兴
【目的】获得抗川楝素的高灵敏度,高特异性多克隆抗体,建立川楝素的间接竞争酶免疫测定(IC-ELISA)方法。【方法】采用酯化反应合成川楝素的半抗原并经HRMS,NMR及IR鉴定;用混合酸酐法和活化酯法分别合成人工免疫抗原与包被抗原;通过免疫动物获得多克隆抗体。【结果】合成了琥珀酸单酰川楝素(TS)和戊二酸单酰川楝素(TG)2种半抗原,与载体蛋白BSA和OVA分别偶联制备了2种免疫原TS-BSA和TG-BSA,及2种包被原TS-OVA和TG-OVA。免疫后获得的2种抗体效价达6.4×104和3.2×105。经4种不同包被原-抗体组合优化,以(TS-Ab,TG-OVA)组合建立的川楝素IC-ELI...
关键词：
川楝素 半抗原 多克隆抗体 ELISA
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
兰海楠 李维 郑鑫
【目的】以鼠肝细胞为模型,在细胞水平上研究猪生长激素抗独特型抗体的作用机制。【方法】以猪生长激素单克隆抗体1A5-F(ab′)2部分免疫BALB/c鼠,采用杂交瘤细胞技术制备猪生长激素抗独特型单克隆抗体。分离Wistar大鼠肝脏细胞,以其为模型,采用流式分析、激光共聚焦显微镜观察、Western-blot等技术手段,研究猪生长激素抗独特型单克隆抗体的生物活性。【结果】成功制备了3株猪生长激素抗独特型单克隆抗体,分别命名为CG1、CG2、CG3。其中,CG1阳性信号最强,经鉴定,CG1为Ab2β类抗独特型抗体,属于IgG2a亚类。CG1能够以二聚体的形式激活鼠肝细胞表面的生长激素受体,并可激活信...
关键词：
猪生长激素 抗独特型抗体 信号转导
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