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[期刊] 西南农业学报
[作者]
周权男 谢黎黎 黄天带 华玉伟 戴雪梅 黄华孙
为了评估不同浓度抗生素对胚性悬浮细胞生长的影响,将橡胶树胚性悬浮细胞接种到不同浓度的替卡西林和卡那霉素的培养基上,结果表明,添加0~500 mg/L的替卡西林对胚性悬浮细胞生长影响较小;添加50 mg/L的卡那霉素能抑制胚性悬浮细胞生长,添加100 mg/L的卡那霉素导致部分胚性悬浮细胞死亡。将经共培养的胚性悬浮细胞接种到添加不同浓度替卡西林的培养基上,结果发现,300 mg/L的替卡西林能较好的抑制农杆菌的增殖。替卡西林和卡那霉素可分别作为农杆菌介导的转化橡胶树胚性悬浮细胞的抑菌和筛选抗生素,替卡西林浓度以300 mg/L较好;卡那霉素50~100 mg/L较好。
关键词：
巴西橡胶树 抗生素 胚性悬浮细胞
[期刊] 林业科学
[作者]
史敏晶 吴继林 郝秉中 谭海燕 田维敏
利用光学和电子显微镜技术,对巴西橡胶树树皮中单宁细胞的形态结构和发育过程进行研究。结果表明:除伴胞外,次生韧皮部中几乎所有的薄壁细胞都含有单宁类物质,乳管周围的薄壁细胞中尤其易积累单宁,石细胞和周皮中的木栓层以及栓内层细胞中也有大量单宁积累。电镜下,单宁细胞中央大液泡中积累的单宁可分为絮状、不规则状、颗粒状和板块状4种类型。在单宁细胞发育过程中,单宁首先在细胞质中产生,中央大液泡形成后则成为积累单宁的主要场所并最终被单宁类物质充满。机械伤害、强割、外施乙烯利以及茉莉酸(JA)都能大幅提升单宁类物质的积累,可见橡胶树对这些因子都能做出防御性应答。
[期刊] 林业科学
[作者]
罗明武 邓柳红
从产胶形态结构及生理学研究、分子生物学研究、排胶机制研究、割胶及乙烯刺激对产胶排胶的影响等方面对巴西橡胶树的产胶与排胶机制进行综述。
关键词：
巴西橡胶树 产胶 排胶 乙烯 割胶
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
聂智毅 黎瑜 康桂娟 蔡海滨 曾日中
依据橡胶树胶乳转录组数据,利用RT–PCR技术鉴定了一个快速碱化因子(rapid alkalinization factor,RALF)家族基因cDNA序列。该cDNA长度为767 bp,开放阅读框长度为411 bp,编码136个氨基酸。序列比对显示该RALF基因与AtRALF34有较高相似性,因而命名为HbRALF34。以热研7–33–97无性系橡胶树为材料,采用实时荧光定量PCR对不同组织及乙烯、茉莉酸、伤害、过氧化氢、高盐、低温、干旱等处理下HbRALF34的表达模式进行分析。结果表明:HbRALF
[期刊] 林业科学
[作者]
邓柳红 罗明武 曾会才 杨卫帆 张春发
采用巴西橡胶树常割树胶乳的Poly(A+)RNA为Tester,叶片Poly(A+)RNA为Driver,通过抑制消减杂交法(suppressivesubtractivehybridization,SSH)构建了一个胶乳特异表达基因差减文库,通过菌落PCR及反式NorthernDot-Blot筛选鉴定阳性差异片段,获得79个胶乳特异表达阳性克隆,部分阳性克隆还通过NorthernBlot杂交及RT-PCR进一步验证。随机挑选部分阳性克隆序列比较分析,结果表明有部分克隆与巴西橡胶树中已知的基因相同,而多数克隆在巴西橡胶树中是新发现,它们与橡胶生物合成、物质代谢运输、信号传导和形态建成等相关。
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘辉 韦永选 邓治 代龙军 杨洪 李德军
为阐明巴西橡胶树WRKY转录因子基因Hb WRKY41的分子特征及表达特性,利用RT-PCR方法从巴西橡胶树中克隆了该基因。Hb WRKY41开放阅读框1 020 bp,编码339个氨基酸,预测蛋白分子量为38.48 k Da,理论等电点为5.52。Hb WRKY41含有1个WRKY保守结构域和1个C_2HC型锌指结构,与蓖麻、棉花、大豆及拟南芥WRKY41蛋白聚为一类,属于Ⅲ类WRKY转录因子家族成员。实时荧光定量PCR检测结果表明,Hb WRKY41在巴西橡胶树根、树皮、胶乳、叶和花等组织中均有表达,
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王纪坤 王立丰
本文以中国热带农业科学院橡胶研究所的袋装实生苗(GT1)为材料,研究2种物候期叶片对干旱胁迫的生理响应规律。结果表明,随着干旱强度的增加,橡胶树淡绿期和绿熟期叶片相对含水量均呈下降趋势。干旱处理1 d橡胶树叶片色素含量上升,随着干旱程度的加强,叶片中色素含量降低。丙二醛和脯氨酸含量随着处理时间的延长升高,SOD酶活性表现出先增后降的趋势,POD酶活性表现下降的趋势,可溶性糖含量相对稳定。橡胶苗在抗旱初期的1~3 d自身表现出较强的抗旱调节能力,干旱后3~5 d是补水关键期。
关键词：
巴西橡胶树 干旱 生理活性 GT1
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
康桂娟 黎瑜 曾日中
利用RT–PCR和实时荧光定量PCR技术,对巴西橡胶树膜结合转录因子Hb NTL2进行克隆和表达,并通过酵母试验进行转录激活功能分析。结果表明,Hb NTL2基因的开放阅读框为1 380 bp,编码一个由459个氨基酸组成的蛋白,该蛋白属于NAC转录因子家族中的ANAC001亚族;在第6~172位氨基酸之间含有典型的NAC结构域,第433~453位氨基酸具有跨膜结构域,是膜结合NAC转录因子;Hb NTL2具有转录激活功能,转录激活区在C–末端;Hb NTL2在叶片的表达高于在橡胶树的其他部位,受割胶、茉莉酸(JA)和乙烯(ET)处理以及低温胁迫诱导。综合分析结果表明,Hb NTL2可能参与调...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
代龙军 项秋兰 黎瑜 聂智毅 康桂娟 段翠芳 曾日中
【目的】分析巴西橡胶树(Hevea Brasiliensis Müll.Arg.)橡胶粒子的蛋白质构成,探索未知的橡胶粒子蛋白质。【方法】采用16-BAC/SDS PAGE双向电泳分离橡胶粒子蛋白质,采用MALDI/TOF-TOF质谱技术进行蛋白质鉴定;此外,利用磺基异硫氰酸苯酯(SPITC)化学辅助质谱测序法进行肽段的从头测序,获得未知蛋白质肽段的氨基酸序列。通过搜索橡胶树胶乳转录组测序获得的EST数据库,获取已知部分氨基酸序列蛋白质的全序列,或通过部分肽段获取为未知蛋白质编码的EST序列。【结果】获得了橡胶粒子蛋白质的16-BAC/SDS-PAGE双向电泳图谱,鉴定了17个橡胶粒子蛋白质;...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨凤美 王飞 张雯 酒立君 罗静 吴楠 吴恒
【目的】建立葡萄风信子体细胞胚再生体系,通过外部形态判断愈伤组织的类型,并探索胚性愈伤组织对头孢霉素和潮霉素的敏感性。【方法】以多年生葡萄风信子‘蓝穗’的盛花期叶片为试验材料,通过正交试验筛选胚性愈伤组织诱导时适宜的植物生长调节剂质量浓度及配比;石蜡切片法观察不同愈伤组织内部的细胞结构,诱导具有胚性的愈伤组织形成体细胞胚,进而获得再生植株;在培养基中加入头孢霉素或潮霉素,观察2种抗生素对胚性愈伤组织生长和体细胞胚发生的影响。【结果】葡萄风信子胚性愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+0.5mg/L 2,4-D+0.1mg/L TDZ,在该培养基上诱导率高达100%。石蜡切片观察发现,外观质地紧密、节...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
范正琪 李纪元 田敏
研究了卡那霉素、潮霉素对浙江红山茶、大花红花油茶愈伤组织的生长及对攸县油茶幼苗叶片诱导愈伤的影响,确定作为选择压力的卡那霉素质量浓度为50～60mg·L-1,潮霉素为25～30mg·L-1。在3种抑菌性抗生素中,羧苄青霉素促进愈伤组织诱导,对愈伤组织的生长没有影响,头孢霉素则有抑制作用,而羟氨苄青霉素轻微抑制愈伤组织的生长,但对愈伤组织的诱导影响不大。考虑到抑菌效果,适于在转基因研究中使用的羧苄青霉素的抑菌质量浓度为250mg·L-1,羟氨苄青霉素为125mg·L-1。
关键词：
抗生素 山茶 愈伤组织
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
张晓英 尹伟伦 朱祯 王华芳
由于不同植物不同外植体对抗生素的反应不同,在进行国槐农杆菌介导的遗传转化研究之前,必须对新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)有抗性的抗生素种类及其使用浓度进行探讨.结果表明,卡那霉素在浓度达到150mgL时仍然没有完全抑制国槐叶片和茎段的生长;而遗传霉素在低浓度下对国槐愈伤组织的诱导和生长的抑制作用较卡那霉素明显.随着遗传霉素浓度的增加,愈伤组织形成的频率降低,外植体的死亡率上升.当遗传霉素的浓度超过10mgL时,叶片和茎段愈伤组织的诱导和生长已完全受到抑制.另外,研究发现不同外植体对遗传霉素的敏感程度不同,茎段较强,叶片稍弱茎段的抗生素致死浓度在8～10mgL之间,叶片的抗生素致死浓度8mgL左...
关键词：
卡那霉素 遗传霉素 国槐 愈伤组织
[期刊] 草业科学
[作者]
杜军利 武德功 王银 吕丽
为了明确不同抗生素对高粱蚜(Melanaphis sacchari)生长发育的影响,本研究选择了10种抗生素(盐酸土霉素、利福平、四环素、硫酸卡那霉素、阿莫西林、阿奇霉素、罗红霉素、庆大霉素、头孢霉素、盐酸林可霉素)采用浸根法处理高粱苗,然后将高粱蚜接至不同抗生素处理后的高粱叶片上进行生命表实验,记录高粱蚜的发育历期、产蚜量、生殖期、生殖力,并计算高粱蚜的各项生命参数。结果表明,经过盐酸土霉素、利福平、四环素、罗红霉素处理过的叶片上的高粱蚜的若蚜期与对照相比显著延长(P<0.05);经过硫酸卡那霉素、阿莫西林、阿奇霉素、庆大霉素、头孢霉素处理过的叶片上的高粱蚜的若蚜期显著短于对照(P<0.05);经盐酸土霉素、利福平、四环素、庆大霉素处理的叶片上的高粱蚜的生殖力显著低于对照(P<0.05)。盐酸土霉素、利福平、四环素处理高粱植株后,高粱蚜的内禀增长率显著低于对照(P<0.05)。以上结果说明盐酸土霉素、利福平、四环素的作用延长了高粱蚜的若蚜期,缩短了生殖期,降低了高粱蚜的生殖力,且高粱蚜内禀增长率和净增殖率也显著降低,因此盐酸土霉素、利福平、四环素能够抑制高粱蚜的生长发育。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
顾晓川 彭素娜 戴雪梅 周权男 孙小龙 桂明春 黄华孙 华玉伟 黄天带 张源源
[目的]探明不同基因型橡胶树的体胚发生能力差异，为优化橡胶树不同品种体胚发生体系提供理论基础。[方法]以国家橡胶树种质资源圃保存的32个橡胶树主栽品种及其亲本为材料，通过系谱分析明确品种间的遗传关系，并以花药作为外植体诱导愈伤组织并进一步诱导体胚发生，结合体胚诱导率和遗传关系分析不同基因型体胚发生能力的差异。[结果]对32个橡胶树品种进行系谱分析表明：PR107、GT1、PB86、Tjirl、海垦1、天任31-45、合口3-11这7个品种为初生代无性系，其余25个品种中的23个与以上7个初生代无性系中的1～3个存在亲缘关系，表明我国橡胶树主栽品种亲本来源狭窄。结合系谱和体胚发生结果分析表明：橡胶树品种的体胚发生能力与亲本来源密切相关，亲本体胚发生能力决定其子代品种体胚发生能力。父母本均为难诱导体胚发生品种时，其杂交后代多数难诱导体胚发生；父母本中含1个易诱导体胚发生品种，即使另1个亲本为难诱导体胚发生品种时，其杂交后代多数体胚发生效率高，但这些后代间体胚发生频率差异显著，且存在超亲现象，推测橡胶树体胚发生是由多基因参与控制的。GT1、天任31-45、93-114和RRIM513等为难诱导体胚发生品种，以其为亲本来源的杂交后代多数难以诱导体胚发生（如云研77-2、云研77-4、云研73-46、保亭1-285、湛试32713、热研217），而PB86、RRIM600、热研88-13和海垦1等为易于诱导体胚发生品种，以其为亲本之一的杂交后代多数体胚发生效率高（如大丰95、海垦2、热研917、热研73397、热研879、热研918、徐育3、徐育141-2）。[结论]本研究发现，橡胶树体胚发生能力存在明显的基因型差异，且这种差异可遗传。依据体胚诱导率和遗传关系，本文将橡胶树亲本的体胚形成率同子代的诱导率结合进行分析并分组，为利用基因型分组优化橡胶树栽培品种的体胚发生体系提供了依据。
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