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[期刊] 实验技术与管理
[作者]
章先 王继璇 丁伟勇 鲍建芳 李肖梁
为践行科教协同育人理念，在病原生物学与免疫学实验教学环节，该文设计了抗体芯片应用于真菌毒素多重检测的综合性实验。基于竞争反应模式，通过设计抗体芯片布局和配套装置，同时制备真菌毒素完全抗原辣根过氧化物酶标物，经优化相关反应条件，最终建立了可实现真菌毒素多重检测的抗体芯片技术。结果显示，该方法可实现对4种真菌毒素的同时定量检测，灵敏度高、稳定性好。此综合性实验将病原微生物中真菌毒素的防控需求与免疫检测技术研究热点相结合，可在加深学生对课堂知识理解和掌握的同时，提升学习的全面性和系统性。与传统验证性实验相比，融入科研成果的综合性实验的开展，将巩固学生理论知识和实验操作技能，培养和激发其创新思维和科研热情，助力综合素质提升。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
章先 王继璇 谢珲 时玉菲 李肖梁
该文将科研项目成果与医学专业实验教学相结合，在病原生物学与免疫学实验教学中设计了“纳米颗粒在金葡菌A型肠毒素检测中应用”的综合实验项目。基于酶联免疫原理，通过制备纳米磁珠-抗体复合物和纳米金-辣根过氧化物酶（HRP）双标记抗体，提高检测灵敏度。纳米磁珠-抗体可在外磁场的作用下实现目标物质的快速富集和分离，纳米金-辣根过氧化物酶形成的多聚HRP可提升催化效果。单克隆抗体分别标记后与待测的金葡菌A型肠毒素混合反应，形成夹心复合物，通过底物四甲基联苯胺（TMB）的显色进行定量分析。与常规夹心ELISA比，该方法方便快捷、灵敏度高，有助于加深学生对酶标记和免疫检测技术的掌握，激发其科研兴趣。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
章先 王继璇 丁伟勇 谢珲 时玉菲 李肖梁
结合临床实际检测需求和免疫标记领域研究热点，设计了基于量子点阳离子交换反应检测金葡菌A型肠毒素的综合性实验，用于医学专业病原生物学与免疫学实验教学。利用量子点修饰金葡菌A型肠毒素单克隆抗体，制备了单克隆抗体-量子点荧光标记物，并优化了基于阳离子交换反应的量子点信号检测体系，最终应用于金葡菌A型肠毒素免疫学检测方法的建立。实验结果显示，所建立的基于量子点阳离子交换反应的金葡菌A型肠毒素免疫学检测法灵敏度高、特异性好。该综合性实验将相关理论原理与技术创新相结合，加深了学生对免疫标记与检测技术教学内容的理解，提高了专业操作技能，激发了科研兴趣。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
叶宝宏 鲍长磊 付明哲 许信刚
【目的】建立产气荚膜梭菌β毒素抗体间接ＥＬＩＳＡ检测方法。【方法】将原核表达重组质粒ｐＥＴ－２８Ａ－β转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）感受态细胞，用ＩｐＴＧ进行诱导表达，表达产物经镍柱亲和层析纯化、尿素梯度透析复性后进行ＷＥＳＴＥｒｎ ＢＬｏＴ鉴定。用复性的β毒素重组蛋白作为包被抗原，通过优化间接ＥＬＩＳＡ试验条件，建立其抗体间接ＥＬＩＳＡ检测方法，对该方法的特异性、敏感性和重复性进行考察，并用其对５２１份临床样本进行检测。【结果】通过诱导、纯化和复性，获得了纯度较高且具有良好反应原性的β毒素重组蛋白。间接ＥＬＩＳＡ条件为：抗原最佳包被质量浓度为５．０μＧ／ｍＬ，阳／阴性血清最佳稀释度为１∶５０．．．
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
蒋兰兰 王思佳 刘庆斌 蒋成刚 宋永臣
天然气水合物安全高效开采是我国天然气水合物资源利用面临的重大课题。基于天然气水合物资源开发技术,设计了一套基于微流控芯片的水合物开采实验模拟系统,搭建了沉积层低温高压条件下水合物生成和分解的实验台,实现微尺度下孔隙内水合物生成形态和赋存特性的可视化研究,探究水合物分解过程中的气水渗流特性,探明水合物分解主导机制和二次生成影响机理。可为水合物的安全高效开采提供重要的研究手段和理论依据。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
梁华 戴可 田强 戴学志 李宗臣
该文设计了以新型螺吡喃分子NSP为化学传感器、用于重金属铜离子可视化检测的精细化工综合实验。研究了NSP的聚集诱导发光特性，采用荧光和紫外-可见光谱法测试了NSP对铜离子的识别能力，利用扫描电镜研究了NSP结合铜离子前后的形貌变化，并对传感器在各类真实水体中检测铜离子的能力进行了测试和评价。该实验综合性和应用性较强，既有助于学生综合能力提升，又能强化学生的环保意识和社会责任感。
关键词：
人才培养 实验教学 螺吡喃 铜离子
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张雪寒 张强 张碧成 汪伟 倪艳秀 温立斌 李彬 周俊明 何孔旺 周萍
本研究旨在研制一种以紧密素为检测靶标的间接ＥＬＩＳＡ技术，检测血清中产志贺毒素大肠杆菌（ＳｈＩｇＡ ｔｏｘＩｇＥｎＩｃ ＥＳｃｈＥｒＩｃｈＩＡ ｃｏＬＩ，ＳｔＥｃ）的抗体水平。根据紧密素２７个亚型的ｎ端保守序列，体外表达３９０～５４３ ＡＡ片段制备包被抗原，通过敏感性、特异性、重复性和稳定性实验，建立检测ＳｔＥｃ的抗体的间接ＥＩＩＳＡ方法。经优化筛选的间接ＥＬＩＳＡ最佳反应条件：抗原包被浓度３ ｎｇ／孔，待检血清稀释比例１∶２００，ｈｒＰ－兔抗羊Ｉｇ ｇ、ｈｒＰ－兔抗牛Ｉｇ ｇ的工作浓度均为１∶１５０００，５％脱脂奶封闭Ｌ ｈ，底物作用时间１０ｍＩｎ，用于牛、羊疫苗抗体检测或者ＳｔＥｃ大肠杆菌．．．
关键词：
致病性大肠杆菌 紧密素 间接ELISA
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
赵明伟 刘时春 李阳 宋旭光 闫若勤
该文利用核磁共振技术测定特低渗储层砂岩中原油的采出程度以及分析岩心孔隙中油的动态分布特征。通过核磁共振T_2测试技术得到岩心中原油的采出程度,核磁共振成像技术分析渗吸过程前后油在岩心中的动态分布特征。结果表明:利用核磁共振T_2测试技术,得到特低渗岩心渗吸采收率为54.9%,利用核磁共振成像技术可知饱和油岩心孔隙中的油经过渗吸后明显减少。该实验有助于学生了解核磁共振分析与成像技术在检测岩心孔隙中油的动态分布特征,激发学生对科研探索的热情,提高学生的实验操作能力和创造性思维能力。
[期刊] 华北农学报
[作者]
徐晓静 文思远 韩毅
采用基因芯片技术,对几种常见的肠道菌进行检测和鉴定,包括检测靶基因的扩增、基因芯片的制备、杂交反应和杂交结果的检测与分析4个步骤。结果表明:应用基因芯片对涉及4个菌属的23株肠道菌在相同的条件下进行了杂交检测,得到菌属特异性的杂交图谱,从而达到对细菌进行检测鉴定的目的。制备的基因芯片能够同时检测沙门菌属、志贺菌属、葡萄球菌属、耶尔森氏菌属的细菌。
关键词：
基因芯片 肠道菌 肠道菌检测
[期刊] 林业科学研究
[作者]
王凯英 高茜 严东辉
基因芯片技术因能对生物样本进行快速、高通量的定性和定量分析，而在植物病害诊断中也得到普遍的应用［１］。树木溃疡病是指引起木本植物树皮上出现溃疡腐烂等症状的病害［２］。引起杨树溃疡病的真菌种类较多，加之其无性型和有性型多样，所以，关于杨树溃疡病病原菌的报道多有不同。另外，受地理位置、寄主植物关系及分类体系的限制，迫切需要发展不依赖于常规分离培养的病原鉴定新技术。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
闫丽 李晨 张庆利 戈蕾 黄倢
采用带正电的尼龙膜作为片基,利用手动芯片点样仪将鳗弧菌6个毒力基因的寡核苷酸探针点样于膜基底上,然后进行紫外交联,制备膜芯片。制备好的膜芯片与6个毒力基因的带有地高辛标记的PCR产物进行杂交,通过观察杂交信号来判断是否含有该基因。通过对膜芯片点样浓度、杂交时间及洗膜步骤进行优化,确定所设计膜芯片最适杂交时间为30min、点样探针最适浓度50μmol/L、洗膜过程只需要3步,时间缩短了45min。
关键词：
基因芯片 尼龙膜 鳗弧菌 毒力基因
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王印庚 谢建军 荣小军 廖梅杰 张正
以养殖刺参(Apostichopus japonicus)腐皮综合征的2种致病菌:灿烂弧菌(Vibrio splendidus)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)为抗原,分别制备兔抗血清。以载玻片为介质,建立了2种病原菌的间接荧光抗体检测技术(IFAT)。交叉反应、阻断试验和吸收试验结果均表明本方法特异性强。对人工感染实验中的养殖水体及发病刺参溃烂组织检测,可以检出水体和患病刺参溃烂组织中的相应病原菌,病原菌被染成明亮的黄绿色,检测灵敏度2.4×104cell/mL。冰冻切片检测结果显示,在刺参肿胀嘴部与溃烂肌肉处有大量染成黄绿色的细菌颗粒。结果表明...
[期刊] 高等教育研究(成都)
[作者]
黄代政 莫华 吴智辉 岳粮跃 袁建辉 陈妮 李文 陶陶
数字电路课程的强实践性要求该课程应多进行综合设计性实验，但是直接进行硬件测试实验，耗时、耗材，不利于综合设计性实验的有效进行。针对该问题，笔者提出了将ＭｕｌｔｉｓｉＭ软件应用于数字电路课程综合设计性实验的观点，并通过实际例子，阐述了应用ＭｕｌｔｉｓｉＭ软件进行数字电路综合设计性实验的步骤，分析了利用ＭｕｌｔｉｓｉＭ软件进行综合设计性实验的优势和需注意的问题。
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
许拉 黄倢 杨冰
基因芯片技术是近年来迅速发展起来的一项新技术,已成为国内外研究的热点。作为生物芯片技术发展中最完备的一个分支,基因芯片以其高通量、高灵敏性、高特异性的特点,在细菌、病毒、真菌等病原检测和鉴定方面发挥着越来越重要的作用。本文介绍了基因芯片的原理和作为检测手段的优越性,并综述了基因芯片技术在细菌和病毒检测方面的应用,分析了现有水产动物病原检测技术,提出了在现有水产动物病原生物信息学的基础上,研发水产养殖动物病害诊断基因芯片的策略。
关键词：
基因芯片 病原 检测 水产
[期刊] 中国农业科学
[作者]
石霖 王秀荣 杨忠苹 陶启蒙 蔡冬冬 武嘉男 王馥梅 田国彬 陈化兰
【目的】研制可同时鉴别检测AI、ND、IB、IBD等4种禽病血清抗体的可视化蛋白芯片。【方法】用超速离心法和蔗糖密度梯度法分别纯化了4种病毒蛋白抗原,调整到合适浓度后点于醛基修饰的片基上,制备蛋白芯片;分别用4种禽病阳性血清杂交,再与金标二抗杂交,银染显色后读取结果,建立4种禽病的可视化蛋白芯片工作平台;进一步对此芯片的特异性以及灰度值与抗体浓度的相关性进行了研究;最后对18个现地血清样品进行了初步应用检测。【结果】结果显示经过条件优化后,芯片检测探针可特异性的相应的抗体进行杂交,呈现较强的杂交信号,且无交叉杂交。信号灰度值在抗体浓度为50～300μg·ml-1范围内成线性关系。用芯片和其它传...
关键词：
可视化 蛋白芯片 禽病 鉴别
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