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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
荣华 杨石坤 杜有家 豆腾飞 黄英 武祥伟 史庆超 王晓雯
[目的]探讨Hyp对浅色黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白沉积的影响及其作用机制,为优质鱼胶的生产提供营养调控策略。[方法]将300尾浅色黄姑鱼(体质量(11.621±0.154) g/尾)随机分为Hyp空白组、Hyp添加组、SIS3干扰组、氧化苦参碱干扰组,每组3个重复,每重复25尾鱼,Hyp空白组饲喂日粮中不添加Hyp,其他3组均饲喂添加9.70 g/kg(前期试验确定的最佳添加量)L-羟脯氨酸的日粮,进行为期8周的饲养试验,SIS3、氧化苦参碱干扰组试验鱼在1月后分别腹腔注射转化生长因子(TGF-β)/Smads通路抑制剂SIS3和氧化苦参碱注射液100μL/尾(SIS3和氧化苦参碱的计量分别为2和10 mg/kg)进行干扰试验,每周注射1次,直至试验结束。试验结束后,测定各处理组中浅色黄姑鱼生长指标(特定生长率、饲料系数、鳔体比、存活率、肥满度)、鱼鳔胶原蛋白含量,以及胶原蛋白代谢相关基因(COL1A1、COL1A2、P4Hα(Ⅰ)、P4Hα(Ⅱ)、P4Hα(Ⅲ))和TGF-β/Smads通路关键基因(TGF-β、TGF-βRT、Smad2、Smad3、Smad4、Smad7)的表达,分析鱼鳔中胶原蛋白差异化沉积是否受TGF-β/Smads通路的调控。[结果]Hyp能显著促进浅色黄姑鱼生长及鱼鳔中胶原蛋白沉积,能显著上调COL1A1、COL1A1基因的表达,显著下调P4Hα(Ⅲ)的表达;SIS3显著降低了鱼鳔胶原蛋白沉积;SIS3和氧化苦参碱对胶原蛋白代谢相关基因及TGF-β/Smads信号通路关键基因表达无显著影响。【结论】TGF-β/Smads信号通路可能不是调控Hyp促进鱼鳔胶原蛋白沉积的主要途径。Hyp作为胶原蛋白分解产物,其促进胶原蛋白沉积可能与其抑制胶原蛋白降解有关。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
卢黄华 李雨哲 刘友明 熊善柏
以酸-酶法提取的草鱼鱼鳞胶原蛋白为材料,采用倾注法制备胶原蛋白膜,研究成膜条件、多糖等对鱼鳞胶原蛋白膜(fish scale collagen film,FCF)特性的影响,考察鱼鳞胶原蛋白膜制备条件。结果表明:成膜条件、多糖等对鱼鳞胶原蛋白膜特性有显著影响,适宜的制备工艺条件为成膜温度45℃p、H 5、胶原蛋白与壳聚糖配比6∶4,该条件下胶原蛋白膜的抗张强度为61.27 MPa,断裂伸长率为5.17%。
关键词：
草鱼鱼鳞 胶原蛋白膜 机械性能
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
王哲平 刘淇 曹荣 殷邦忠
采用胃蛋白酶在酸性条件下酶解提取刺参体壁胶原蛋白并对其分离纯化,然后将胶原蛋白分别在不同温度下进行热处理,经SDS-PAGE电泳和傅立叶变换红外扫描等方法分析热处理前后胶原蛋白的生化特征。结果显示,提取的胶原蛋白具有较高的纯度,且存在完整的三股螺旋结构;胶原蛋白在40℃热处理条件下不仅二级结构被破坏,一级结构也被部分破坏,α链和β链条带消失,分子量降低(<100kDa);70℃达到了各种肽链叠加所表现出的热收缩温度,肽链发生聚集、收缩,分子量开始升高;80℃加热条件下,肽链进一步收缩,分子量达到120kDa左右,而且仍保持一定量的二级结构;当温度超过100℃时,胶原蛋白一级结构被严重破坏。
关键词：
刺参 胶原蛋白 温度 分子量 结构
[期刊] 水产学报
[作者]
汪海波 梁艳萍 李云雁 王敏 方成 汪海婴
为探讨不同交联方法对草鱼皮胶原蛋白海绵材料性能的影响,实验以草鱼鱼皮为原料,提取、纯化胶原蛋白并制备胶原海绵材料。在此基础上,分别用紫外交联、热交联、戊二醛交联以及EDC/NHS交联方法处理胶原海绵,通过测定材料的交联度、热变性温度、拉伸强度和体外抗酶降解性能,比较了不同方法的交联效果。结果发现,提取所得的草鱼皮胶原蛋白为典型的Ⅰ型胶原;经不同方法交联处理后,海绵材料交联度依次为戊二醛(72.0%)>EDC/NHS(32.5%)>热交联(29.9%)>紫外交联(15.6%);与对照胶原材料相比,戊二醛处理后,胶原材料的热变性峰值温度(67.4℃)、最大拉伸强度(125.6 kPa)和体外抗酶降...
关键词：
草鱼 鱼皮 胶原蛋白 交联
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
申锋 杨莉莉 熊善柏 赵思明
以草鱼鱼鳞为材料,研究蛋白酶种类、酶解条件对鱼鳞酶水解的水解度、氮收率和凝胶强度的影响,并采用正交试验对鱼鳞胶原肽制备工艺进行优化,以获得较高凝胶强度的鱼鳞胶原肽。结果表明:在胃蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶4种蛋白酶中,采用胃蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白时氮收率较高,且水解产物具有凝胶形成能力;酶解条件对鱼鳞胶原蛋白的水解度、氮收率和凝胶强度均有显著影响;胃蛋白酶在底物质量分数为5%、起始pH值为4.0、加酶量为140 U/g、水解温度为65℃条件下,水解鱼鳞120 min,鱼鳞水解产物的凝胶强度和氮收率都较好,其中水解度为1.46%、氮收率为64.38%、凝胶强度为2 051 g。
关键词：
鱼鳞 胃蛋白酶 酶解 凝胶强度
[期刊] 水产学报
[作者]
汪海波 梁艳萍 汪海婴 周坚 张寒俊
以草鱼鱼鳞为原料,分别提取鱼鳞中的酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),着重开展了其包括热稳定性、体外酶降解性以及胶原海绵材料特性在内的相关研究,并与哺乳动物来源的猪皮胶原(PC)相比较。实验结果表明,制备所得的3种胶原蛋白均为典型的Ⅰ型胶原并具有完整的三螺旋结构;PC的热变性温度(41.6℃)明显高于ASC(34.8℃)和PSC(35.2℃);3种胶原蛋白的体外酶降解性能受水解酶的种类、胶原蛋白提取方法、胶原蛋白来源、胶原蛋白受热历史以及蛋白的自组装程度影响。胶原蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶对淡水鱼胶原均具有不同程度的降解能力,但胶原蛋白酶的降解能力最强;相同条件下,3种胶原蛋...
关键词：
草鱼 鱼鳞 胶原蛋白 生物学性能
[期刊] 中国农业科学
[作者]
廖芳芳 苑嗣纯 张中文 吴国娟
【目的】构建泛素启动酶Arkadia和泛素羧基末端水解酶-5(亦称UCH37)的表达载体,并探讨Smad7蛋白的泛素化修饰对马兜铃酸肾病中TGF-β1/Smads信号通路的影响。【方法】通过观察绿色荧光的表达量及real-time PCR反应优化转染条件,转染Arkadia和UCH37 siRNA,real-time PCR检测mRNA表达抑制率。分别构建Arkadia和UCH37的表达载体pGPU6/GFP/Neo,经鉴定后转染细胞,real-time PCR和Western blotting检测Arkadia、UCH37和Smad7的表达变化。【结果】①30 pmol siRNA和1.5μ...
[期刊] 水产学报
[作者]
游银川 麻金花 段雪昆 章骞 沈建东 刘光明 曹敏杰
针对加工副产物鲍鱼外套膜利用率低的现象，对鲍鱼腹足和外套膜胶原蛋白相关性质进行比较研究，以期为鲍鱼的综合加工提供一定的理论依据。本研究以皱纹盘鲍为原料分别提取得到腹足酶促溶性胶原蛋白（ｐｅｐｓｉｎ－ｓｏｌｕｂｌｅ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｏｆ ａｂａｌｏｎｅ ａｄｄｕｃｔｏｒ，ｐｓｃ１）和外套膜酶促溶性胶原蛋白（ｐｅｐｓｉｎ－ｓｏｌｕｂｌｅ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｏｆ ａｂａｌｏｎｅ ｍａｎｔｌｅ，ｐｓｃ２），对ｐｓｃ１和ｐｓｃ２相关特性进行比较分析，并利用ｐｓｃ１制备得到兔抗鲍鱼胶原蛋白多克隆抗体。ｓｄｓ－ｐａｇｅ显示，ｐｓｃ１和ｐｓｃ２分子组成均为（α１）３，且α１的分子量为１４０ ｋｕ，与水产无脊．．．
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
胡杨 杨莉莉 熊善柏 刘友明 尤娟 尹涛
以草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎ ｉｄｅｌｌｕｓ）鳞为原料，采用３种常用工业蛋白酶酶解３种经不同预处理方法处理过的鱼鳞，经酶解、离心分离、冷冻干燥等工序制备胶原蛋白肽，比较不同预处理方法制得胶原蛋白肽的产率及产物特性。结果表明，预处理方法对鱼鳞酶解产物的氮收率、水解度和氨基氮生成量有显著影响（ｐ
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘晶晶 雷元华 李海鹏 谢鹏 万红兵 黄彩燕 孙宝忠 张松山
【目的】通过研究不同加热温度和加热时间来探究胶原蛋白特性对嫩度的影响,为中国高熟度牛肉嫩度特性研究提供参考。【方法】将牛半腱肌肉在60、70、80、90和100℃水浴温度下分别加热30、60、90、120和150 min,通过测定剪切力、蒸煮损失、水分含量、质构特性、结缔组织机械强度、胶原蛋白含量及热溶解性、胶原蛋白共价交联以及扫描电镜等指标探究嫩度的变化规律,通过相关性分析得出影响嫩度的关键因素。【结果】随着加热温度的升高和加热时间的延长,牛半腱肌肉剪切力降低,蒸煮损失增大,水分含量降低;总胶原蛋白和不
关键词：
牛肉 加热 嫩度 胶原蛋白 共价交联
[期刊] 中国水产科学
[作者]
张立强 谢海侠 李楠 聂品
利用PCR方法从柱状黄杆菌(Flavobacterium columnare)G4株中克隆了1个胶原蛋白酶基因(GenBank登录号EF501979)。同源性比对发现该基因与柱状黄杆菌的另外1种胶原酶基因(GenBank登录号EAZ95511.1)最为相近,有84%的一致性和93%的相似性。该属的另外2种细菌,约氏黄杆菌(Flavobacterium johnsoniae)和嗜冷黄杆菌(F.psychrophilum)都有与该胶原酶基因相似的基因,其相似性分别为92%和83%。该基因经KpnI和SalI酶切后连接到表达载体pET-32a上,转入大肠杆菌BL21(DE3)plysS内进行表达,经...
关键词：
柱状黄杆菌 胶原蛋白酶 克隆 表达
[期刊] 水产学报
[作者]
刘光明 史千玉 蔡秋凤 潘冰青 翁武银 苏文金 曹敏杰
以日本鳗鲡皮与肌肉组织为研究对象,采用碱溶、酸溶、盐析、冻干等方法纯化得到胶原蛋白,采用加热、饱和硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析等方法纯化得到两种亚型的小清蛋白(PV-Ⅰ和PV-Ⅱ),纯化的目标蛋白经动物特异性抗体的免疫印迹实验确证。酶联免疫吸附测定和免疫印迹分析结果显示,纯化的胶原蛋白和小清蛋白分别与鱼类过敏患者阳性血清发生特异性反应,且二者之间无免疫交叉反应。体外模拟胃液消化实验和SDS-PAGE分析结果显示,胶原蛋白和小清蛋白均具有较高的消化稳定性。结果提示,日本鳗胶原蛋白和小清蛋白具有较高的消化稳定性和免疫原性,二者可引发不同患者的IgE介导特异性超敏反应。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
李华
为了开发和利用大鲵皮胶原蛋白,在低温4℃条件下使用酶解工艺提取养殖大鲵皮中的胶原蛋白,并研究了其组成和部分生化性质。结果表明:大鲵皮羟脯氨酸含量为22.3 mg/g,胶原蛋白提取率为26.7%(湿重),其中水分、粗灰分、粗脂肪和粗蛋白含量分别为6.75%、0.62%、0.38%和92.10%,含有成人六种必需氨基酸和儿童必需氨基酸两种,亚氨基酸含量为171残基/1 000残基数,脯氨酸羟基化比例为51.5%。紫外吸收显示大鲵皮胶原蛋白的强吸收峰在230 nm附近,根据SDS-PAGE分析,含有两种不同的α链(α1和α2),初步确认提取得到的大鲵皮胶原蛋白是Ⅰ型胶原蛋白。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
骆艳娥 范代娣 刘树文 马晓轩 王小刚
以凯氏定氮法为基准方法,采用考马斯亮蓝法、Folin-酚法、双缩脲法对从重组大肠杆菌发酵产物中提取的类人胶原蛋白含量进行了测定。结果表明,这种类人胶原蛋白和牛血清白蛋白与明胶的特性存在差异,在考马斯亮蓝法、Folin-酚法、双缩脲法3种比色分析方法中,采用双缩脲法得出的类人胶原蛋白与牛血清白蛋白的回归方程系数相差最小,并得出回归方程的校正系数α和β,其中α表示类人胶原蛋白与牛血清白蛋白的特性差异(α=0.6761),β为类人胶原蛋白样品中蛋白的百分含量(g/g)。
[期刊] 水产学报
[作者]
陆剑锋 万全 殷章敏 林琳 翁世兵 叶应旺 姜绍通
胶原蛋白是生物体内一种重要的蛋白质,也是结缔组织的主要蛋白成分。与陆生动物(如猪、牛等)比较,水生动物胶原蛋白具有优良的理化性质和生理活性功能,已引起人们的广泛关注。中华鳖是我国传统的名贵水产品,其裙边胶原蛋白含量丰富,具有极高的药用价值和营养价值。采用胃蛋白酶酶解法在酸性条件下提取中华鳖裙边胶原蛋白,研究酶添加量、底物浓度、提取时间对提取效果的影响,确定了制备裙边胶原蛋白的最适条件为:酶添加量4mg/mL,底物浓度4%,提取时间14h。粗提胶原蛋白通过盐析、透析等纯化步骤,再经SDS-PAGE电泳、热变性温度测定、紫外及傅立叶变换红外扫描等技术方法分析了胶原蛋白的生化特征,结果显示提取到的裙...
关键词：
中华鳖 裙边 胶原蛋白 提取 纯化
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