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[期刊] 中国农业科学
[作者]
郑明学 古少鹏 王丽霞 韩克光 李宝钧
【目的】探讨柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)入侵细胞与钙信号转导之间的关系,揭示鸡柔嫩艾美耳球虫病的发生机制。【方法】采用体外狗肾细胞(madin-darby canine kidney cell,MDCK细胞)培养技术,检测了细胞外缺钙、Ca2+内流阻断剂(硝苯地平)和钙调蛋白抑制剂(三氟拉嗪)对E.tenella子孢子入侵率的影响,并测定了培养细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和细胞活性。【结果】E.tenella子孢子入侵细胞的抑制率随着细胞外Ca2+浓度的降低而升高。钙离子浓度降低到600μmol.L-1时,入侵率(23.33%)均极显著低于对照组(P<0.01);细胞外...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
安健 汪明 孔繁瑶 殷佩云
为了观察马杜霉素对球虫超微结构的影响 ,探讨马杜霉素抑杀球虫的作用机理 ,将马杜霉素按0 .0 0 0 5%浓度混入鸡的育雏饲料中 ,1 2日龄时 ,用该饲料喂给药组的鸡 ,同时 ,另设定 1组不用药对照组 ,在1 4日龄时 ,参加实验的 2个组的每只实验鸡接种对马杜霉素敏感的孢子化的鸡柔嫩艾美尔球虫卵囊 2× 1 0 4个 ,感染后 84,96,1 0 8,1 2 0和 1 32 h每组分别捕杀 2只实验鸡 ,取鸡盲肠组织 ,制成超薄切片 ,通过透射电镜观察鸡体内的柔嫩艾美耳球虫敏感株在马杜霉素作用下超微结构的变化 ,与对照组比较 ,发现线粒体表现为数量增多和形态改变。形态改变表现在有的线粒...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李博 刘群 蒋金书
AA肉鸡雏鸡分别经口免疫柔嫩艾美耳球虫毒株早熟株 ,用免疫组化ABC法染色检测小肠、盲肠扁桃体、脾脏中CD4 +、CD8+T淋巴细胞动态变化 ;用淋巴细胞转化实验MTT法检测T淋巴细胞活性。结果表明 :球虫免疫鸡后 ,CD4 +T淋巴细胞在一次免疫后迅速增殖 ,第 6天达到第一峰 ,免疫柔嫩艾美耳球虫毒株的鸡盲肠与脾脏中CD4 +T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 38%和 4 4 % ,免疫早熟株的鸡盲肠与脾脏中CD4 +T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 36 %和 4 3% ,而二次免疫后和对照相比很少有显著差异。CD8+T淋巴细胞在一次免疫后比CD4 +增殖速度慢 ,第 9天达...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蒋金书 胡景辉
采用体外脱囊的方法,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和堆型艾美耳球虫(E.aceroulina)的子孢子分别接种于9日龄 SPF 鸡胚的尿囊腔和鸡肾原代细胞中,置40～41℃恒温箱中培养.E.tenella 子孢子接种 SPF 鸡胚尿囊腔后,24h 后发现早期的第一代裂殖体;34h 后可观察到成熟的第一代裂殖体和裂殖
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
翟少钦 闫志强 陈春林 朱买勋 唐红梅 付文贵
将60只健康罗曼粉鸡随机分为正常组和模型组，每组30只，模型组灌服1×10~(4)个孢子化卵囊进行人工复制鸡球虫病模型，正常组灌服等体积生理盐水，感染5 d，剖杀试验鸡，无菌采集鸡盲肠内容物，并通过Illumina PE250型高通量测序仪对肉鸡盲肠内菌群进行16S rDNA基因V3～V4可变区检测，对肠道菌群可操作分类单元(OTUs)数、α多样性、β多样性及差异菌门与菌属进行综合性分析与评价，探究柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群结构和多样性的影响。结果表明：与正常组相比，感染柔嫩艾美耳球虫后鸡肠道菌群的OTUs数、Chao1指数极显著降低，Shannon指数显著降低，Simpson指数显著升高；门水平上，模型组变形菌门的相对丰度极显著升高，而厚壁菌门的相对丰度显著降低，拟杆菌门和柔膜菌门的相对丰度显著降低；属水平上，正常组的优势菌属为拟杆菌属、瘤胃菌属–UCG014、副拟杆菌属，而模型组瘤胃球菌属–uncultured、球藻菌属、埃希菌–志贺菌属相对丰度极显著升高。可见，艾美耳球虫破坏了盲肠菌群的完整性，促进潜在致病菌的建立和生长，尤其使埃希菌–志贺菌属大量繁殖，快速生长。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
翟少钦 闫志强 陈春林 朱买勋 唐红梅 付文贵
将60只健康罗曼粉鸡随机分为正常组和模型组，每组30只，模型组灌服1×10~(4)个孢子化卵囊进行人工复制鸡球虫病模型，正常组灌服等体积生理盐水，感染5 d，剖杀试验鸡，无菌采集鸡盲肠内容物，并通过Illumina PE250型高通量测序仪对肉鸡盲肠内菌群进行16S rDNA基因V3～V4可变区检测，对肠道菌群可操作分类单元(OTUs)数、α多样性、β多样性及差异菌门与菌属进行综合性分析与评价，探究柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群结构和多样性的影响。结果表明：与正常组相比，感染柔嫩艾美耳球虫后鸡肠道菌群的OTUs数、Chao1指数极显著降低，Shannon指数显著降低，Simpson指数显著升高；门水平上，模型组变形菌门的相对丰度极显著升高，而厚壁菌门的相对丰度显著降低，拟杆菌门和柔膜菌门的相对丰度显著降低；属水平上，正常组的优势菌属为拟杆菌属、瘤胃菌属–UCG014、副拟杆菌属，而模型组瘤胃球菌属–uncultured、球藻菌属、埃希菌–志贺菌属相对丰度极显著升高。可见，艾美耳球虫破坏了盲肠菌群的完整性，促进潜在致病菌的建立和生长，尤其使埃希菌–志贺菌属大量繁殖，快速生长。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蒋建林 蒋金书
本文报道了改进的柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法。用胃蛋白酶消化盲肠道组织，铜筛过滤除去大颗粒杂质后，以1．1mol·mL－1蔗糖离心漂浮卵囊，然后用小于0．5mol·mL－1蔗糖溶液反复漂洗，最后以5％次氯酸钠消毒处理，获得了大量纯化柔嫩艾美耳球虫卵囊。孢子化卵囊经研磨，消化，游离出子孢子后，过DEAE-纤维素52层析柱，以0．05mol·mL-1，Tris－HCl，（pH＝80，0．15mol·mL1-NaCl）洗脱，层析往高5cm，洗脱液水柱高3cm，流速为2mL·min－1，纯化出了子孢子。取人工感染球虫鸡的120h后的盲肠，游离出第二代裂殖子，铜筛过滤后，过柱方法同前，纯化出了第二代...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
甘德培 汪明
将三对抗不同药物的 Eimeria tenella 虫株(氯嗪苯乙氰抗性株与盐霉素抗性株、氯嗪苯乙氰抗性株与氯羟吡啶抗性株、氯嗪苯乙氰抗性株与拉沙里菌素抗性株)分别等量混合感染不给药的鸡只,获得各自的杂交一代 F_1.再用 F_1感染饲喂双重药物的鸡只,通过双重药物的筛选,分别获得了各自的 E.tenella抗药性重组株 F_2~(ds),F_2~(de),F_2~(dl).这3株抗药性重组株在 F_2代中所占比例分别为:19.9%,36.5%,26.7%,重组株对相关的两种药产生了完全的抗药性.试验结果还显示,重组株的致病力与 E.tenella 敏感株无明显差异.
关键词：
柔嫩艾美耳球虫 抗药性 杂交
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
林青 窦永喜 闫鸿斌 田广孚 才学鹏 张彦明 景志忠 于三科 翟军军
用柔嫩艾美耳球虫甘肃株(E.tenella G S,E t G S)对15日龄雏鸡进行感染,以最适抗球虫活性百分率、抗球虫指数、相对卵囊产量和病变记分减少率为指标,进行综合评定,研究了该虫株对三九球痢灵、地克珠利、氯苯胍和地克珠利氯苯胍合剂等几种常用抗球虫药的敏感性。结果表明,该虫株对三九球痢灵有中度抗药性,对地克珠利和地克珠利氯苯胍合剂有轻度抗药性,对氯苯胍无抗药性。
关键词：
柔嫩艾美耳球虫 抗药性 抗球虫药 鸡
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
林青 张志敏 于三科 翟军军 段旭基
用杨凌地区鸡柔嫩艾美耳球虫早熟株和母株分别免疫鸡,对免疫前后鸡体的平均增重、饲料转化率、盲肠病变记分和卵囊抑制率等指标进行了分析。结果发现,早熟株免疫组对球虫再攻击时的卵囊减少率分别为77.3%和67.6%,高于母株免疫组的41.7%和57.1%,且对同种同株球虫攻虫时的保护力优于同种不同株球虫。经2次免疫后,早熟株免疫组的鸡平均增重、饲料转化率均高于母株免疫组和对照组,而盲肠病变记分小于后者;早熟株免疫组经球虫攻击后卵囊的繁殖量明显减少,且卵囊抑制率均在91%以上。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
秦泽荣 孔繁瑶 荒川皓 马场荣一郎
本研究揭示了柔嫩艾美耳球虫感染可以引起鸡肠炎沙门氏菌感染的复发。复发的主要表现为盲肠内容物的肠炎沙门氏菌阳性率和数量再次显著地升高;肠炎沙门氏菌在盲肠中的滞留时间显著延长。这种复发与肠炎沙门氏菌的初始感染量及球虫感染时间有关。肝脏和脾脏阳性率无显著变化。
关键词：
肠炎沙门氏菌 复发 柔嫩艾美耳球虫
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
甘德培 汪明 龙光宗 宋松林
作者检测了 Eimeria tenella 对4种抗球虫药的交叉抗药性情况。4种抗球虫药(拉沙里菌素、盐霉素、克球粉和地克珠利)对4株 E.tenella 抗药性虫株(拉沙里菌素抗性株、盐霉素抗性株克球粉抗性株和地克利抗性株)的药效结果显示,E.tenella 对以下三组药物不存在交抗药性:地克珠利与拉沙里菌素、地克珠利与盐霉素、地克珠利与克球粉.另外,盐霉素抗性株对拉沙里菌素表现敏感,而拉沙里菌素抗性株对盐霉素则缺乏敏感性.拉沙里菌素抗性株和盐霉素抗性株对克球粉表现为部分抗药,克球粉抗性珠对拉沙里菌素和盐霉素则表现敏感.
[期刊] 中国农业科学
[作者]
韩红玉 赵其平 姜连连 董辉 陈兆国 黄兵
以遗传背景一致的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)敏感株孢子化卵囊为驱动组,马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株孢子化卵囊为试验组,利用抑制消减杂交(SSH)方法,通过两轮杂交和两次PCR分别构建了富含两个抗药株孢子化卵囊与敏感株孢子化卵囊之间差异表达基因的消减cDNA文库。随机从两个消减文库中分别挑取50个克隆,经PCR鉴定马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株孢子化卵囊的消减文库重组率分别为96%和98%,差异基因片段大小分布在250bp～1.0kb之间。从每个文库中随机挑取65个阳性克隆经斑点杂交试验,分别选择表达量上调的6个克隆进行序列分析和同源性比较。结果发现,有4个cDNA片段...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
秦泽荣 孔繁瑶 荒川皓 马场荣一郎
本试验对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染对肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)感染的影响进行了研究。实验结果表明:肠炎沙门氏菌和柔嫩艾美耳球虫的相互作用显著;在球虫感染后第4,10,14d 时,柔嫩艾美耳虫球虫感染可显著地(P<0.01)增加盲肠内容物中肠炎沙门氏菌数量。肠炎沙门氏菌和柔嫩艾美耳球虫之间协同作用与肠炎沙门氏菌的感染量大小和感染后的时间显著相关(P<0.01)。柔嫩艾美耳球虫感染并没有显著地提高肝脏、脾脏中肠炎沙门氏菌的阳性率。不同感染量的肠炎沙门氏菌感染对鸡盲肠的球虫病变记分显著影响.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
林青 于三科 陈秀荔 潘广林 王建锋 李涛
构建了一种新的鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术 ,并对杨陵柔嫩艾美耳球虫地理株进行了分离 ,对继代增殖的纯种卵囊进行了致病性试验。结果表明 ,该单卵囊分离技术简单易行 ,单卵囊感染成功率可达4 0 % ;该虫株对雏鸡有很强的致病性 ,经口接种 1× 10 5个孢子化卵囊 ,致死率高达 80 %。
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