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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张德坤 杨利国 张红琳 王文 乌娜尔汗 纪平 古武昌
应用抑制素基因免疫重组质粒 (PCIS)免疫绵羊 ,首次免疫后 ,绵羊能够产生抗抑制素抗体 ,加强免疫后抗体增加显著 (P
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
牛树理 叶荣 杨利国
为研究中和内源抑制素对排卵的影响，用猪精液抑制素粗品，对产后２￣５个月的２５头母黄牛进行主动免疫。粗制品用福氏完全佐剂乳化后间隔２０ｄ免疫两次。在配种后第１０ｄ对１１头发情母牛经直肠触摸卵巢，同时颈静脉采血。根据血清孕酮水平与排卵数之间的线性回归关系测定血清孕酮，采用直肠触摸黄体数推算排卵率。排２个以上卵的母牛占３６％（４／１１）。结果表明，用猪精液抑制素主动免疫黄牛可以提高其排卵率。
关键词：
抑制素 猪 精液 主动免疫 黄牛
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
崔先利 杨利国 茆达干 王水莲 李复兴
为增强肉牛的繁殖力,应用本实验室构建的抑制素真核融合表达质粒pCISI,提纯后辅以不同的免疫佐剂注入96头母黄牛体内,采用AMI-900兽用B超对其中84头发情牛进行卵泡检测,并对其中78头妊娠牛进行早期胚胎数目检测。结果发现:抑制素质粒pCISI能促进双大卵泡发育(80.95%,68/84),诱发排双卵(60.71%,51/84),诱导黄牛孪生(41.03%,32/78);普鲁卡因佐剂(48.78%)比脂质体(32.43%)效果明显。研究表明,抑制素基因免疫能有效提高黄牛的繁殖率。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王建东 唐玉林 王敏 张宝所 杨富强 高海慧 于洋 郭延生
【目的】本试验旨在研究枸杞糖肽（LbGp）对环磷酰胺（CY）诱导雏鸡产生免疫抑制的调节作用。【方法】将200羽7日龄海兰蛋鸡随机分成5个组，每组40羽，即空白组（NC）、环磷酰胺组（CY）及LbGp高（LbGpH）、中（LbGpM）、低（LbGpL）3个剂量组，NC组肌注生理盐水，其余4组连续3 d肌注80 mg/(kg·d) CY进行造模，造模后LbGpH、LbGpM和LbGpL组连续7 d分别给予10、5、2.5 mg/(kg·d）LbGp。在首次给药后第7、14、21和28 天各随机选取5只鸡测定体重，脾脏指数，外周血淋巴细胞转化作用，并进行脾脏组织学分析。【结果】LbGpH显著提高了CY诱导免疫抑制雏鸡体重（P＜0.05），LbGpM组能极显著提高CY诱导免疫抑制雏鸡体重（P＜0.01）；LbGpM组显著提高了CY诱导免疫抑制雏鸡脾脏指数（P＜0.05）；LbGpH和LbGpM组极显著提高了CY诱导免疫抑制雏鸡外周血淋巴细胞转化率（P＜0.01）；脾脏组织学结果显示，在首次给药后第14和21天LbGp各组生发中心个数显著高于CY组（P＜0.05）。【结论】枸杞糖肽对环磷酰胺诱导的雏鸡免疫抑制有显著的拮抗作用，以中剂量组效果最佳。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张德坤 杨利国 曹少先 王文 乌娜尔汗 纪平 古武昌
用抑制素基因重组质粒(pC IS)免疫生产母羊,剂量分别为每只0.2 mg、0.4 mg和0.8 mg,以生理盐水为对照。结果表明:免疫组抗抑制素抗体阳性率达46.7%。加强免疫后第45天,免疫组的促卵泡素(FSH)水平显著高于对照组(P<0.05)。首次免疫后第20天与加强免疫后第45天抗体阳性羊的促卵泡素水平显著高于抗体阴性羊(P0.05)。抑制素基因免疫能调节绵羊的促卵泡素水平,但对雌激素与孕激素的水平无显著影响。
[期刊] 华北农学报
[作者]
郝瑞荣 吕丽华 高俊杰 张春香
为了探究AY 9944-A-7在3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine,IBMX)阻滞的绵羊卵母细胞减数分裂恢复过程中的作用,将绵羊卵丘-卵母细胞复合体(COCs)、分离的卵丘-卵母细胞(split COCs)和脱卵丘后制成的裸卵(DOs)培养于含250μmol/L IBMX的体外成熟液中,分别添加10,20,30,40μmol/L的AY 9944-A-7以诱导卵母细胞恢复减数分裂。结果表明,10~40μmol/L的AY 9944-A-7极显著地提高了绵羊COCs的生发泡破裂(GVBD)率和第一极体(PBI)排出率(P
[期刊] 林业科学
[作者]
白根本 沈昕 王沙生
Salt-induced/repressed genes were isolated at the transciption level in P.euphratica using subtractive hybridization technique.About 40 cDNA fragments were obtained with polyacrylamide gel electrophoresis from +6/-6 to +8/-8 cDNA hybridization cycles,which will be used for screen and cloning salt-to...
关键词：
胡杨 差减杂交 基因筛选
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李超 梅承 朱玉林 薛建华 钟寿坤 麻柱 张胜利 施振旦
【目的】研究免疫抑制素提高奶牛超数排卵的效率以提高胚胎产量。【方法】免疫组首次免疫抑制素α亚基融合蛋白(1mg·头-1)与白油佐剂混合乳液,首免后第28、56d分别进行2次加强免疫,剂量为0.5mg·头-1。对照组同时注射生理盐水与白油佐剂的混合乳液。在第二次加强免疫后10d,采用FSH四日递减法进行超排处理,并根据母牛发情表现进行人工授精,试验一使用常规冷冻精液输精,试验二使用分离的雌性精子输精,输精后第7天进行冲胚。【结果】主动免疫抑制素能够有效提高血液抗抑制素抗体效价。试验一,免疫抑制素组头均获胚/卵总数为(15.8±2.8)枚,显著高于对照组(8.3±1.5)枚(P<0.05);头均可...
关键词：
奶牛 免疫抑制素 超数排卵 胚胎产量
[期刊] 中国农业科学
[作者]
岳群华 袁建龙 郝斐 靳木子 王景园 杨文亮 刘东军 仓明
【目的】构建骨骼肌特异表达目的基因卵泡抑制素(follistatin,FST)的真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red,分别转染到不同细胞系中,检测FST及下游基因在RNA和蛋白水平的表达情况,同时测定骨骼肌特异启动子SP和α-actin的启动效率,以研究FST的特异表达对肌肉发育的影响。【方法】利用脂质体分别将真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red转染到绵羊胎儿成纤维细胞(SFFCs)、骨骼肌卫星细胞(SMSCs)和SMSCs诱导肌管中,获得转基因细胞;对获得细胞的生长状况、细胞周期、细胞形态大小以及目的基因和下游基因的表达情况,分别用流式细胞仪、实时定量...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
茆达干 吴结革 舒邓群 薛春林 王锋 杨利国
40只小鼠分为4组,分别注射pC ISI(抑制素质粒)、pC ISI+细菌DNA、pC ISI+pGM-CSF和生理盐水(8.5 g.L-1)。pC ISI剂量为20μg,与佐剂等量混合,2周后加强免疫1次。试验结果表明,细菌DNA佐剂组诱导77.8%(7/9)的个体产生了抑制素阳性抗体,抗体以IgG2α型为主,gm-csf佐剂组产生的抗体以IgG1型为主;基因佐剂联合抑制素基因免疫激发的淋巴细胞增殖能力显著高于抑制素基因单独免疫组(P<0.05);细菌DNA佐剂组阳性鼠的动情期血浆雌二醇高于阴性鼠(P0.05)。上述结果表明,细菌DNA和gm...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王水莲 杨利国 薛立群 曹迎春 陈小军
为探讨佐剂、质粒纯度和免疫次数3种因素对抗抑制素抗体效价的影响,以分析抑制素基因免疫是否使肉牛产生免疫应答,利用已构建的抑制素真核融合表达质粒pCISI对肉牛进行了免疫试验.结果表明,抑制素pCISI基因免疫肉牛后佐剂处理组比无佐剂组免疫效果明显.对抗体P/N(待测血样的吸光值P与阴性血样吸光值N的比值)来说,普鲁卡因佐剂显著优于脂质体,但就抗体阳性率来说,普鲁卡因和脂质体差异不显著.无论是抗体P/N值还是抗体阳性率,高纯度组的效果略高于低纯度组,但差异不明显.随着免疫次数的增加抗体P/N值和抗体阳性率均升高,两者差异显著,说明了抑制素基因免疫肉牛可诱导产生抗抑制素抗体,纯度对抗体的产生和抗体...
关键词：
抑制素基因 免疫 抗体 肉牛 反应性
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王水莲 薛立群 陈小军 杨利国
选择40头南阳黄牛,用3.0 mg抑制素基因重组质粒(pCIS,免疫组,n=30)或同剂量的生理盐水(对照组,n=10)间隔21 d注射2次,分别在首次免疫当天、首次免疫后第10天和第21天、加强免疫后第10天和第45天收集血清,应用放射免疫法(RIA)测定处理后不同时期血清中激素水平。结果表明:在5个采血时间点内,加强免疫后第10天抗体阳性牛比率最高,为37.5%,与其他采血时间点有显著差异。免疫组促卵泡素(FSH)平均含量比对照组高,但差异不显著;17-β雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平在加强免疫后2组有显著性差异。另外,抑制素抗体阳性牛的FSH、E2和P4比阴性牛高,但差异不显著。这些结...
关键词：
抑制素 基因免疫 肉牛 生殖激素
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
商文静 吴云锋 赵小明 杜昱光 商鸿生
采用ELISA-DSM法和半叶枯斑法,研究了壳寡糖诱导对普通烟(Nicotiana tabacum)体内TMV 增殖的影响。结果表明,普通烟经50μg/mL壳寡糖溶液诱导处理后,其对TMV的侵染表达了高水平的系统抗病性,显症推迟4～7 d,平均严重度降低了82．9％。ELISA-DSM法检测结果表明,壳寡糖诱导处理的普通烟植株体内病毒浓度明显降低;在接种后10 d,接种叶片OD值仅为0．400,相当于同期不诱导对照的23．0%;新生叶片OD 值为0．190,相当于同期不诱导对照的38．7％。以发病普通烟叶片为接种体,利用半叶法接种心叶烟(Nicotiana glutinosa),结果表明,壳寡...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王学红 尹星星 陆杰 晁沐 杨永晶
【目的】探究树莓果油对中波紫外线（UVB）诱导的人永生化角质形成细胞（HaCaT）光老化的抑制作用。【方法】采用超临界CO_(2)流体萃取技术提取树莓果油后，通过气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）分析其化学成分。建立HaCaT的UVB光老化模型，通过CCK-8法检测细胞存活率，用酶联免疫吸附法（ELISA）和微板法测定被UVB损伤的HaCaT细胞中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、Ⅰ型胶原蛋白（COL1A1）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6），肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、硫氧还蛋白（Trx）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量。【结果】GC-MS结果显示，树莓果油中含有脂肪酸、脂肪酸酯、生育酚、甾醇等53种化学成分，其中油酸、亚油酸、Z-9-油酸乙酯、维生素E和谷甾醇与其抑制UVB诱导HaCaT细胞的光老化密切相关。抗光老化活性研究发现，与模型组相比，树莓果油能明显提高UVB辐射后HaCaT细胞的存活率（P < 0.01），且具有明显的剂量依赖关系。此外，树莓果油能明显升高UVB诱导的HaCaT细胞中COL1A1的含量且降低MMP-3的含量（P < 0.05，P < 0.01），增加皮肤弹性；降低UVB诱导的HaCaT细胞中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量（P < 0.05，P < 0.01），延缓皮肤炎症反应的发生；升高UVB诱导的HaCaT细胞中抗氧化因子Trx和SOD的含量（P < 0.05，P < 0.01），提高皮肤氧化稳定性。【结论】树莓果油可能通过抑制细胞外基质降解、减轻细胞炎症反应和对抗氧化应激来抑制UVB对HaCaT细胞造成的光老化。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张瑞杰 苗向阳
构建并鉴定了针对绵羊抑制素α亚基(INHA)基因的shRNA(Small hairpin RNA,shRNA)慢病毒干扰载体,为进一步制备优质、高产转基因绵羊奠定基础。设计并合成4条针对绵羊INHA基因的shRNA表达序列(shRNA1、shRNA2、shRNA3、shRNA4)及2条阴性对照序列(NC1、NC2),将其分别连接到空载体pGFP-V-RS中,得到4个shRNA表达载体(即shRNA干扰载体)pGFP-V-RS-shRNA和2个阴性对照载体pGFP-V-RS-NC;同时构建绵羊INHA的高效表达载体pIRES2-eGFP-INHA,然后将构建好的4个shRNA干扰载体及2个阴性对...
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