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[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 崔先利  杨利国  茆达干  王水莲  李复兴  
为增强肉牛的繁殖力,应用本实验室构建的抑制素真核融合表达质粒pCISI,提纯后辅以不同的免疫佐剂注入96头母黄牛体内,采用AMI-900兽用B超对其中84头发情牛进行卵泡检测,并对其中78头妊娠牛进行早期胚胎数目检测。结果发现:抑制素质粒pCISI能促进双大卵泡发育(80.95%,68/84),诱发排双卵(60.71%,51/84),诱导黄牛孪生(41.03%,32/78);普鲁卡因佐剂(48.78%)比脂质体(32.43%)效果明显。研究表明,抑制素基因免疫能有效提高黄牛的繁殖率。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王水莲  薛立群  陈小军  杨利国  
选择40头南阳黄牛,用3.0 mg抑制素基因重组质粒(pCIS,免疫组,n=30)或同剂量的生理盐水(对照组,n=10)间隔21 d注射2次,分别在首次免疫当天、首次免疫后第10天和第21天、加强免疫后第10天和第45天收集血清,应用放射免疫法(RIA)测定处理后不同时期血清中激素水平。结果表明:在5个采血时间点内,加强免疫后第10天抗体阳性牛比率最高,为37.5%,与其他采血时间点有显著差异。免疫组促卵泡素(FSH)平均含量比对照组高,但差异不显著;17-β雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平在加强免疫后2组有显著性差异。另外,抑制素抗体阳性牛的FSH、E2和P4比阴性牛高,但差异不显著。这些结...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 姜卫星  刘友生  薛立群  陈小军  杨利国  王水莲  
为探讨双拷贝抑制素pcISI基因疫苗纯度和剂量对肉牛黄体发育的影响,将150头同期发情的南阳黄牛随机分为8个试验组和2个对照组,试验组用pcISI按2种纯度、4种剂量(0.75、1.50、2.25、3.00 mg/头)进行免疫处理,2个对照组分别用空质粒和生理盐水进行处理;初次免疫21 d后进行加强免疫。结果表明:无论用高纯度还是低纯度疫苗免疫,2.25 mg/头剂量处理对黄体的作用效果最明显,且抗体水平与黄体发育密切相关,2.25 mg/头抑制素融合表达质粒组的黄体显著大于0.75 mg/头组(P<0.05),抗体阳性牛两侧黄体显著比抗体阴性牛的大(P<0.05)。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 张德坤  杨利国  张红琳  王文  乌娜尔汗  纪平  古武昌  
应用抑制素基因免疫重组质粒 (PCIS)免疫绵羊 ,首次免疫后 ,绵羊能够产生抗抑制素抗体 ,加强免疫后抗体增加显著 (P
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 王水莲  杨利国  薛立群  曹迎春  陈小军  
为探讨佐剂、质粒纯度和免疫次数3种因素对抗抑制素抗体效价的影响,以分析抑制素基因免疫是否使肉牛产生免疫应答,利用已构建的抑制素真核融合表达质粒pCISI对肉牛进行了免疫试验.结果表明,抑制素pCISI基因免疫肉牛后佐剂处理组比无佐剂组免疫效果明显.对抗体P/N(待测血样的吸光值P与阴性血样吸光值N的比值)来说,普鲁卡因佐剂显著优于脂质体,但就抗体阳性率来说,普鲁卡因和脂质体差异不显著.无论是抗体P/N值还是抗体阳性率,高纯度组的效果略高于低纯度组,但差异不明显.随着免疫次数的增加抗体P/N值和抗体阳性率均升高,两者差异显著,说明了抑制素基因免疫肉牛可诱导产生抗抑制素抗体,纯度对抗体的产生和抗体...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 牛树理  叶荣  杨利国  
为研究中和内源抑制素对排卵的影响,用猪精液抑制素粗品,对产后2 ̄5个月的25头母黄牛进行主动免疫。粗制品用福氏完全佐剂乳化后间隔20d免疫两次。在配种后第10d对11头发情母牛经直肠触摸卵巢,同时颈静脉采血。根据血清孕酮水平与排卵数之间的线性回归关系测定血清孕酮,采用直肠触摸黄体数推算排卵率。排2个以上卵的母牛占36%(4/11)。结果表明,用猪精液抑制素主动免疫黄牛可以提高其排卵率。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 王水莲  冯建忠  李文平  夏迪  卢向阳  杨利国  
将24头产后7 d的荷斯坦奶牛随机分为4组,高、中、低剂量免疫组(记为T1、T2、T3)分别注射1010、109、108 CFU/mL无抗性基因的抑制素真核表达质粒基因疫苗(重组菌C500(pXAIS))各3 mL,对照组(CK)注射10%生理盐水3 mL。初次免疫28 d后进行加强免疫。用B超诊断仪检测产后奶牛子宫恢复情况。结果表明:加强免疫能提高抗抑制素抗体P/N值,各免疫组P/N值均高于对照组,其中T1和T2组均与对照组差异显著(P
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王水莲  薛立群  邓立新  崔先利  杨利国  
【目的】探讨不同剂量的双拷贝抑制素pcISI基因免疫对肉牛生殖能力的影响。【方法】将58头同期发情肉牛随机分为6组,每组肉牛分别注射0.75(T1)、1.5(T2)、2.25(T3)、3.0mg/头(T4)pcISI质粒、3.0mg/头pcMV-S空质粒(C1)和3mL/头生理盐水(C2),初次免疫21d后进行加强免疫,以探讨抑制素pcISI基因疫苗对肉牛卵泡和黄体发育的影响。【结果】4个剂量组的大卵泡数均高于对照组,除了T1外,其它3个剂量组均与对照组差异显著(P<0.05);T3和T4的中卵泡数均高于对照组,且差异显著(P<0.05);T3和T4的小卵泡数均高于对照组,且差异显著(P<0....
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张德坤  杨利国  曹少先  王文  乌娜尔汗  纪平  古武昌  
用抑制素基因重组质粒(pC IS)免疫生产母羊,剂量分别为每只0.2 mg、0.4 mg和0.8 mg,以生理盐水为对照。结果表明:免疫组抗抑制素抗体阳性率达46.7%。加强免疫后第45天,免疫组的促卵泡素(FSH)水平显著高于对照组(P<0.05)。首次免疫后第20天与加强免疫后第45天抗体阳性羊的促卵泡素水平显著高于抗体阴性羊(P0.05)。抑制素基因免疫能调节绵羊的促卵泡素水平,但对雌激素与孕激素的水平无显著影响。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 茆达干  吴结革  舒邓群  薛春林  王锋  杨利国  
40只小鼠分为4组,分别注射pC ISI(抑制素质粒)、pC ISI+细菌DNA、pC ISI+pGM-CSF和生理盐水(8.5 g.L-1)。pC ISI剂量为20μg,与佐剂等量混合,2周后加强免疫1次。试验结果表明,细菌DNA佐剂组诱导77.8%(7/9)的个体产生了抑制素阳性抗体,抗体以IgG2α型为主,gm-csf佐剂组产生的抗体以IgG1型为主;基因佐剂联合抑制素基因免疫激发的淋巴细胞增殖能力显著高于抑制素基因单独免疫组(P<0.05);细菌DNA佐剂组阳性鼠的动情期血浆雌二醇高于阴性鼠(P0.05)。上述结果表明,细菌DNA和gm...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李超  梅承  朱玉林  薛建华  钟寿坤  麻柱  张胜利  施振旦  
【目的】研究免疫抑制素提高奶牛超数排卵的效率以提高胚胎产量。【方法】免疫组首次免疫抑制素α亚基融合蛋白(1mg·头-1)与白油佐剂混合乳液,首免后第28、56d分别进行2次加强免疫,剂量为0.5mg·头-1。对照组同时注射生理盐水与白油佐剂的混合乳液。在第二次加强免疫后10d,采用FSH四日递减法进行超排处理,并根据母牛发情表现进行人工授精,试验一使用常规冷冻精液输精,试验二使用分离的雌性精子输精,输精后第7天进行冲胚。【结果】主动免疫抑制素能够有效提高血液抗抑制素抗体效价。试验一,免疫抑制素组头均获胚/卵总数为(15.8±2.8)枚,显著高于对照组(8.3±1.5)枚(P<0.05);头均可...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李慧峰  单明辉  程淑琴  
【目的】探讨健脾益气汤对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。【方法】给小鼠皮下注射环磷酰胺(CTX)30mg/(kg·d),制备免疫抑制模型;阴性对照组小鼠灌胃生理盐水,阳性对照组灌胃0.1g/(kg·d)左旋咪唑,健脾益气汤低剂量给药组(16g/(kg·d))和高剂量给药组(44g/(kg·d))分别灌胃健脾益气汤,研究健脾益气汤对小鼠体质量、脾脏指数以及血清中IgG、IL-2、TNF-α质量浓度和T淋巴细胞亚群中CD4+、CD8+数量的影响。【结果】健脾益气汤低剂量给药组和高剂量给药组均能拮抗由环磷酰胺所导致的体质量下降,健脾益气汤高剂量组显著降低了免疫抑制小鼠的脾脏指数。健脾益气汤可以明显提高免...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张小冬  程瑞禾  夏银  
研究了抑制素主动免疫对母羊促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、孕酮(P)、雌二醇(E2)以及妊娠、产羔的影响。15只发情季节考力代母羊平均分成3组:人抑制素α亚基(1-26)Tyr·Gly合成肽免疫组(H组)、猪精液抑制素免疫组(S组)和对照组(C组)。H组在初次免疫后即产生了抑制素抗体,第2次加强免疫后抗体滴度最高可达1∶64000。S组和C组均未产生可与人抑制素合成肽结合的抗体。H组母羊在第一次加强免疫后,血清FSH和P的水平显著高于C组(P<0.05)。S组母羊E2浓度在初次和第一次加强免疫后显著高于对照组(P<0.05)。各组血清LH水平未有显著变化。H组和S组母羊妊娠期分别为148...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 曾勇  陆承平  
通过对抑制性差减杂交和cDNA芯片技术分离的 2 0 1个阳性克隆的测序 ,得到螯虾 (Procambarusclarkii)免疫相关基因 4 8个 ,其中正向克隆中 4 2个 ,反向克隆 6个 ,除正向克隆中SNAP - 2 5 (synatosome-associatedproteinof2 5ku)已报道外 ,其余均为新基因 ,均在GenBank登录。正向克隆中的同源基因有微管蛋白、超氧化物歧化酶前体、丝氨酸蛋白酶抑制物Ⅰ、精氨酸激酶、70kD伴侣蛋白同类物等。进一步用DotNorthernblot对克隆号PCI188进行鉴定 ,结果攻毒组的杂交信号是对照组的 3.2 4倍 ,与cDNA...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 余树民  甘梦  左之才  崔恒敏  彭西  王娅  邓俊良  
【目的】评价自拟中药复方对免疫抑制小鼠血清细胞因子、免疫球蛋白和红细胞免疫黏附功能的影响。【方法】通过腹腔注射环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型。试验组免疫抑制小鼠分别按20,10和5g/kg剂量灌胃自拟中药复方,同时设置模型对照组(灌胃等体积生理盐水)、健康对照组(灌胃等体积生理盐水)和黄芪多糖对照组(灌胃剂量66mg/kg),连续7d,试验第0,3,7天采集血样,用血细胞自动分析仪测定小鼠血细胞数,用酶联免疫吸附试验测定血清IL-2、IgG、IgM、IL-4和IFN-γ含量,并计算IL-4/IFN-γ,用红细胞C3b受体花环(C3b RR)及免疫复合物花环(ICR)试验分析红细胞免疫黏附功能。【...
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