- 年份
- 2024(5443)
- 2023(7864)
- 2022(7089)
- 2021(6611)
- 2020(5966)
- 2019(13851)
- 2018(14237)
- 2017(27648)
- 2016(15887)
- 2015(18366)
- 2014(18856)
- 2013(18693)
- 2012(17935)
- 2011(16416)
- 2010(16837)
- 2009(16015)
- 2008(16133)
- 2007(15004)
- 2006(13084)
- 2005(11866)
- 学科
- 济(61471)
- 经济(61401)
- 管理(39859)
- 业(37812)
- 方法(29467)
- 企(28468)
- 企业(28468)
- 数学(26306)
- 数学方法(26099)
- 农(18849)
- 中国(18545)
- 财(16593)
- 学(16518)
- 制(15352)
- 贸(12856)
- 贸易(12851)
- 易(12502)
- 银(12057)
- 银行(11998)
- 农业(11648)
- 行(11500)
- 地方(11481)
- 业经(11414)
- 体(10841)
- 融(10614)
- 金融(10606)
- 和(9810)
- 理论(9442)
- 务(9287)
- 财务(9256)
- 机构
- 大学(238522)
- 学院(237953)
- 济(92355)
- 经济(90135)
- 研究(85945)
- 管理(82403)
- 理学(69637)
- 理学院(68801)
- 管理学(67425)
- 管理学院(67010)
- 中国(64524)
- 科学(57272)
- 农(53988)
- 京(52642)
- 所(47638)
- 财(45239)
- 研究所(43421)
- 农业(43297)
- 业大(42784)
- 中心(38672)
- 江(37620)
- 财经(35252)
- 北京(33526)
- 经(31664)
- 范(30515)
- 院(30232)
- 师范(30050)
- 州(29782)
- 技术(28428)
- 经济学(28260)
- 基金
- 项目(151277)
- 科学(114007)
- 研究(105281)
- 基金(105220)
- 家(94814)
- 国家(94060)
- 科学基金(75780)
- 社会(61777)
- 省(61322)
- 社会科(58250)
- 社会科学(58227)
- 基金项目(55527)
- 划(52085)
- 自然(50505)
- 自然科(49210)
- 自然科学(49188)
- 教育(48937)
- 自然科学基金(48272)
- 资助(44526)
- 编号(44080)
- 成果(37347)
- 重点(35088)
- 发(33020)
- 部(32884)
- 课题(31657)
- 计划(30911)
- 创(30429)
- 科研(29688)
- 创新(28655)
- 科技(28502)
- 期刊
- 济(104546)
- 经济(104546)
- 研究(68129)
- 农(49558)
- 学报(49465)
- 中国(47273)
- 科学(39561)
- 财(35096)
- 大学(35048)
- 学学(33405)
- 农业(32971)
- 管理(28229)
- 教育(25169)
- 融(22329)
- 金融(22329)
- 技术(19646)
- 业经(18387)
- 财经(17670)
- 业(17123)
- 经济研究(16855)
- 问题(15270)
- 经(15161)
- 版(13500)
- 业大(13381)
- 贸(12585)
- 理论(12101)
- 商业(11434)
- 统计(11358)
- 技术经济(11355)
- 科技(11346)
共检索到357896条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 林业科学
[作者]
李长友 袁强 张永安 戴莲韵 黄大昉
利用苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系和SDS PAGE方法分析了来自我国不同森林立地带土壤中的 72株苏云金芽孢杆菌的cry1、cry2、cry3、cry4、cry5、cry8、cry9、cry10、cry11、cry1I等 10类基因类型和表达蛋白 ,并进行了杀虫活性的生物测定。研究表明 :同时含有cry1,cry2 ,cry1I 3类基因的有 2 1株菌 ,6株菌含有cry1,cry2类基因 ,4株菌含有cry1和cry1I类基因 ,只含有cry1基因的有 1株 ,cry2类基因的 4株 ,36株菌不含所鉴定的 10类cry基因。同时证明 ,绝大多数含有cry1基因的菌株...
[期刊] 华北农学报
[作者]
杜立新 董明 王容燕 马铭泽 王金耀 曹伟平 宋健 冯书亮
苏云金芽孢杆菌SHJ-5菌株是从黑龙江采集的土样中分离获得的新菌株,对其伴孢晶体形状、基因型、蛋白表达以及杀虫活性进行了系统研究。菌株SHJ-5产生的伴孢晶体形状为钝菱形;利用PCR-RFLP技术对该菌株的基因型进行鉴定,结果表明,该菌株含有cry1Aa、cry1Ea、cry1Be、cry1Ah、cry1Ai、cry2Ab、cry1i和vip3A基因;SDS-PAGE晶体蛋白检测结果显示,该菌株表达130~150 kDa和60 kDa大小蛋白;生物活性测定表明,菌株SHJ-5对棉铃虫和小菜蛾有较高杀虫活性,校正死亡率分别为100%和96.7%。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
丁双阳 何钟佩 王保民
在离体培养条件下,研究了外源 Bt 杀虫晶体蛋白对棉花胚珠内源激素系统变化及发育过程的影响,结果表明,外源 Bt 杀虫晶体蛋白明显影响胚珠发育的进程,内源 CTKs,GAs,ABA 含量下降,IAA 含量增加,胚珠总糖含量增加,可溶性蛋白含量降低,最终胚珠干重显著降低。0~200ng/mL 范围内,随外源Bt 杀虫晶体蛋白浓度增加,对胚珠发育的影响增大。
[期刊] 华北农学报
[作者]
臧大康 郑桂玲 周洪旭 张媛 李国勋 李长友
以本实验室分离的Bt菌株B-DLL质粒DNA为模板,利用cry8类基因特异性引物JJX5和JJX3扩增出3.5kb的片段,将该片段插入克隆载体pMD 18-T中,筛选获得一个含新基因的克隆pMD-cry8new。序列测定表明,该基因编码区为3 525 bp,编码的蛋白质由1 174个氨基酸残基组成,理论分子量为133.05 kDa,等电点为pH4.69,为弱酸性蛋白。该基因核苷酸序列已在GenBank登录(Accession number:HQ174208),编码的氨基酸序列与Cry8Fa1的同源性最高达99.8%,被国际Btδ-内毒素命名委员会正式命名为Cry8Fa2。将cry8Fa2基因插...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
沙莉 章淘 黄张敏 黄志鹏 关雄
分离自武夷山土壤的苏云金芽胞杆菌BRC-HZP7菌株对小菜蛾和甜菜夜蛾幼虫有较好的毒杀作用.对该菌株进行了生理生化测定、cry基因的PCR-RFLP检测,以及通过SDS-PAGE检测晶体蛋白,并对蛋白点进行肽段指纹图谱鉴定.结果表明该菌株含有cry1Aa、cry1Ba、cry1Ia、cry2Ab、cry2Ac、cry2Ae等6种cry基因.从选取的8个蛋白条带肽段指纹图谱可以看出:标记3、6、7、8的4个蛋白点都是杀虫晶体蛋白,蛋白点6、7、8分别鉴定为Cry2Aa、Cry1Aa、Cry1Ba,蛋白点3可能是Cry1Ba的部分片段.表明该菌株有丰富的ICP资源,可作为杀虫应用的候选菌株.
[期刊] 西南农业学报
[作者]
赵直 吴钢 王闵霞 朱旭东 蒲志刚 张志勇 彭正松 蔡平钟
以分离的3株苏云金芽孢杆菌质粒为模板,通过设计一对特异引物,PCR扩增得到3条全长3.6 kb的基因序列,其各自都包含一个完整的开放阅读框,编码序列全长分别是3468、3450、2697 bp(Genebank登录号分别为GQ385073,GQ385074,GQ385075);它们与cry1A类基因同源性都高达95%以上;分别编码1159、1150和902个氨基酸。并在此基础上采用生物信息学方法对这3个基因编码蛋白从氨基酸组成、理化性质、跨膜结构域、疏水性/亲水性、亚细胞定位、跨膜结构域以及功能域等方面进行了预测和分析。为转基因抗虫植物和微生物杀虫工程菌的构建提供了基因来源。
[期刊] 林业科学
[作者]
陈颖 韩一凡 李铃 田颖川 聂绍基
本研究首先建立了美洲黑杨叶片外植体的再生系统,并利用Horsch等人1985年发明的叶盘法,将分别带有嵌合基因NPTII和1.8kb或2.1kbBt.基因的土壤杆菌LBA4404与美洲黑杨叶片共培养。采用30mg/l和50mg/l两种浓度的卡那霉素筛选转化子,约28天左右的时间,有不定芽从外植体切口处形成。两种卡那霉素浓度下共形成275个伸长芽,存活了187株。这187株分别进入卡那霉素30mg/l,50mg/l的生根培养基后,生根率分别为9.62%和8.02%。PCR反应证明部分植株已成功地进行了转化。
关键词:
美洲黑杨,Bt.基因,转化,PCR反应
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王清锋 喻子牛
利用PCR片段延伸连接技术将cry1E的原启动子准确地更换为cry3A启动子,重组cry1E经载体pHT315克隆至枯草芽胞杆菌无芽胞突变株1S8和苏云金杆菌以色列亚种无晶体突变株4Q7,获得重组菌3A1EBs和3A1EBt。聚丙稀酰胺凝胶电泳和生物测定表明,克隆改造后的cry1E可表达,表达的Cry1E对海灰翅夜蛾有毒(幼虫死亡率60%~70%)。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王广君 张杰 吴隽 宋福平 黄大昉
通过对Cry1Ba3蛋白序列的分析,以及与已知Cry蛋白比较,设计了6对特异性引物,通过PCR扩增获得6种不同长度的cry1Ba3基因片段。将这些基因片段克隆到pET-21b载体上,导入大肠杆菌BL21中进行诱导表达,最终得到6种不同长度的Cry1Ba3蛋白片段。采用浸叶法检测这些蛋白片段对小菜蛾的杀虫活性,研究结果表明含有第1~685位和含有第22~655位氨基酸的蛋白片段对小菜蛾的毒性,与全长Cry1Ba3蛋白相比,没有改变;含有第54~655位氨基酸的蛋白片段对小菜蛾的毒力明显降低;而含有第22~627位和含有第85~655位氨基酸的蛋白片段完全丧失了对小菜蛾的活性。上述结果表明Cry1...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
张永安 宋福平 戴莲韵 张杰 李长友
利用PCR RFLP鉴定体系和SDS PAGE表达蛋白的分析方法,分析了来自我国不同森林立地带(寒温带、中温带、暖温带、北亚热带、中亚热带、南亚热带、高原亚热带、热带)自然保护区森林土壤中分离的72株苏云金芽孢杆菌的cry1、cry2、cry3、cry4、cry5、cry8、cry9、cry10、cry11、cry1I杀虫晶体蛋白基因类型,表达蛋白和杀虫活性的生物测定。研究表明:同时含有cry1、cry2、cry1I3类基因的有21株菌,6株菌含有cry1、cry2类基因,4株菌含有cry1和cry1I基因,只含有cry1基因的有1株,cry2基因的4株,36株菌不含所鉴定的10类基因。同时证...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
姚宝安 王祥 夏雪山 赵俊龙 马丽华 孙明 喻子牛
捻转血矛线虫是世界各国危害牛、羊等反刍动物的主要寄生虫之一.目前虽然有特效的化学药物驱虫,但因其具一定的副作用,寄生虫易产生耐药性,药物易在内品残留,危害人类健康.苏云金芽胞杆菌是一种革兰氏阳性细菌,它在形成芽胞的同时,在菌体一端形成一种蛋白性质伴胞晶体,它对昆虫有较高毒力,对人畜安全无毒,不污染环境,成本低,已广泛用于防治农、林、仓贮害虫和医学
[期刊] 华北农学报
[作者]
初立良 郑桂玲 周洪旭 李长友 李国勋
发掘对鞘翅目害虫具有活性的苏云金芽孢杆菌(Bt)菌株和杀虫蛋白基因在生物防治中日益受到人们的重视。利用杀鞘翅目Bt基因通用引物进行PCR检测与生物测定相结合的方法,从山东省各地土壤中分离的66株Bt中筛选获得了两株对鞘翅目昆虫具有杀虫活性的菌株B-DLL和B-JJX,并采用SDS-PAGE和PCR-RFLP方法对其杀虫晶体蛋白和杀虫基因类型进行了鉴定。结果表明,菌株B-DLL和B-JJX对华北大黑鳃金龟1龄幼虫14 d的校正死亡率分别为86.7%和60.0%,对暗黑鳃金龟1龄幼虫14 d的校正死亡率分别为83.3%和76.7%,对柳蓝叶甲3龄幼虫5 d的校正死亡率分别为33.3%和46.7%。...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
戴经元 钱江伟 邓英 孙明 喻子牛
用苏云金杆菌菌株HD-1和7216的伴胞晶体蛋白碱解产物作抗原,制备相应抗血清,并用协同凝集反应测定HD-1和7216的晶体蛋白的含量,其最低检测量分别为78ng/ml和130ng/ml。用生物测定方法测定HD-1和7216经碱溶的晶体蛋白对小菜蛾幼虫的LC50值分别为0.452μg/ml和0.763μg/ml。两种方法测定的结果有一定的相关性。用协同凝集反应测定苏云金杆菌晶体蛋白含量比火箭免疫电泳、环状沉淀反应、双相单扩散反应的灵敏度高,比ELISA的灵敏度略低,但操作更简便、快速。
关键词:
苏云金杆菌 晶体蛋白 协同凝集反应
[期刊] 中国农业科学
[作者]
邢珍娟 王振营 何康来 白树雄
【目的】研究间苗后留在田间地表的转Bt基因玉米幼苗残体中Cry1Ab杀虫蛋白的降解规律,比较两种Bt玉米幼苗残体中Cry1Ab杀虫蛋白的降解速度。【方法】以两种表达Cry1Ab杀虫蛋白的转Bt基因抗虫玉米MON810和Bt11为材料,采用ELISA方法测定各取样时期中幼苗残体中Cry1Ab杀虫蛋白残留量。【结果】转Bt基因玉米幼苗残体中杀虫蛋白降解是逐渐的,且降解速度较快,到50d时幼苗残体已经完全腐烂,Bt11幼苗残体中的杀虫蛋白已经完全降解,在MON810中还能检测到微量的杀虫蛋白。两种转基因玉米幼苗残体中的Bt杀虫蛋白的初始含量差异不显著,但在同一时间段的Bt杀虫蛋白降解速度存在差异均显...
[期刊] 林业科学
[作者]
郭晋平 肖扬 张剑英 王昌富 张芸香
以主要造林树种生物学特性与立地因子的协调性为立地分类的依据.借助聚类分析法对立地生产性能的相似性进行数量化描述,以欧氏距离定义立地单元间的相似性,类重心法计算类间距,在一定的相似性水平上划定立地类型。研究地区共划分为12个类型,编制了立地类型表,并采用热量、水分、养分三段式命名法为备立地类型命名。落叶松和油松在12个立地类型上的生长预测结果与现有林生长状况基本一致。
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式:WXtxt
删除