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[期刊] 西南农业学报
[作者]
王跃华 朱丹青 代勇 何玉红 徐世军 邓启花 王晓蓉
通过正交试验筛选快速提高川贝母鳞茎生物量的氨基酸前体组合配方,为工业化大规模生产名贵药材川贝母奠定基础,以川贝母小鳞茎为悬浮培养外植体,利用正交试验研究在川贝母小鳞茎悬浮培养中添加不同氨酸前体观察其对生物量的影响。结果表明,川贝母小鳞茎在添加由0.60 mmol.L-1酪氨酸、0.60 mmol.L-1苯丙氨酸和0.60 mmol.L-1色氨酸组合的悬浮培养液中培养25 d,其鳞茎的生物量提高最大可达3.5倍。
关键词：
正交试验 川贝母 悬浮培养 氨基酸前体
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王跃华 何诗虹 郭翠平 江明殊 王晓蓉 刘涛
为了利用四氮唑脱氢酶还原法测定川贝母悬浮培养细胞的活力,并对影响其活力测定的各种因素进行了研究。选取四氮唑脱氢酶还原法测定了经三次继代培养的川贝母悬浮培养细胞的活力,并研究了不同四氮唑溶液浓度、缓冲液种类和pH值以及脱氢酶还原反应时间对川贝母悬浮培养细胞活力测定的影响。通过实验得出用四氮唑脱氢酶还原法测定川贝母悬浮细胞活力的最佳条件为:四氮唑溶液最适浓度0.6%,脱氢酶还原反应在Tris-HCl缓冲液中的效果优于磷酸缓冲液和磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液,最适pH为7.0~7.5;脱氢酶最适还原反应的时间为18 h。
关键词：
氯化三苯基四氮唑 脱氢酶 细胞活力
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王跃华 闫胜杰 代勇 代娟 蕾芸 李洋
本试验筛选出诱导川贝母鳞茎的最佳外植体。选取生长不同时期的川贝母植株鳞茎外植体分别接入由不同激素浓度配比的培养基中,在不同培养条件下获得川贝母鳞茎快速增殖的最佳培养条件,并检测出再生鳞茎的总生物碱含量。结果表明:开花期鳞茎为鳞茎增殖的最佳外植体,其最佳培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.2 mg.L-1,川贝母出苗期、开花期和果实期植株鳞茎外植体再生鳞茎的总生物碱含量分别为0.180%,0.190%,0.182%,均高于野生川贝母鳞茎的总生物碱含量0.109%。
关键词：
川贝母 鳞茎 增殖 培养基
[期刊] 草业科学
[作者]
吴海旭 马艳珠 成春亚 李冉 崔治家 晋玲 马毅 王振恒 王圆圆 刘立
本研究对不同年限的川贝母（Fritillaria cirrhosa）各器官进行称重，通过比较不同生长年限栽培川贝母的各器官性状及生物量占比，并进行正态性检验和方差分析，利用标准化主轴回归分析（SMA）探明川贝母的生物量积累及其异速生长规律。结果表明不同年限川贝母各器官生物量大小均为鳞茎>叶>地下茎>根；川贝母鳞茎及叶片生物量在第四年增长最多，根系及地下茎生物量在第五年增长最多；川贝母地上部分与地下部分生物量均随生长年限的增长而不断增大，且地上部分各器官生物量间均差异显著（P < 0.05）。整个生长过程中，川贝母各器官生物量占总生物量的比例随年限增长而有所变化，且各器官生物量与总生物量之间均呈正相关。除五年生川贝母花和果的生物量与总生物量为等速生长模式外，其余年限川贝母各器官生物量与总生物量皆为异速生长模式，为人工生产川贝母提供理论依据。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
苏鹏 胡莉 董品利
对8个川贝母品种采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)进行贝母碱分析、基于百合科植物特征序列trn H-psb A的分析、以及ISSR分子标记分析。结果表明,3种方法对川贝母的鉴定都是有效的。8个川贝母品种根据不同的贝母素含量均能独立区分开,trn H-psb A序列的分析和ISSR分子标记分析的聚类结果基本相符。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
梁艳 陈典 黄晓梅
以MS为基本培养基,用大蒜茎尖外植体培养的试管苗进行离体培养试验.结果表明,多效唑对大蒜试管鳞茎形成和膨大作用显著,多效唑质量浓度为2～8mg/L时,随着质量浓度的增加,多效唑对鳞茎形成与分化的抑制程度加深,叶片和根系变短、变细弱;诱导鳞茎形成和膨大的最适多效唑质量浓度为6mg/L;多效唑处理后,大蒜试管苗叶鞘中内源激素IAA与ABA的含量比急剧下降,降低幅度越大,鳞茎形成、膨大的效果越好.
关键词：
大蒜 多效唑 试管鳞茎 内源激素
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
姚树林 陆兆新 郝天怡 吕凤霞 别小妹
本文研究了单独添加以及组合添加氨基酸和碳架物质对surfactin生物合成的影响。氨基酸筛选试验表明,赖氨酸和甘氨酸能在一定程度上提高surfactin产量。添加一定浓度的赖氨酸和亮氨酸时,surfactin的产量分别比对照提高了29.20%和23.58%。进一步采用空间填充试验设计研究了氨基酸协同作用对surfactin生物合成的影响。结果表明:组合添加试验各氨基酸之间无交互作用,而且对surfactin生物合成未表现出比单独添加更高的增强作用,因此推测其surfactin生物合成存在严密的特异性限速机制。对碳架物质的筛选试验发现,添加三羧酸循环(TCA循环)相关碳架柠檬酸钠、琥珀酸钠和草酸...
[期刊] 草业科学
[作者]
刘思妤 杨悦 王鹰 王丽娟 吴秀菊
以北细辛(Asarum heterotropoides)幼嫩叶柄诱导的愈伤组织为材料,初步建立悬浮培养体系,同时探讨接种量、光照、培养液量、转速、蔗糖浓度、激素配比等因素对细胞生物量的影响。结果表明,100mL的1/2MS液体培养基中,2g愈伤组织是最适接种量,蔗糖浓度为30g·L(-1),摇床转速150r·min(-1),0.6mg·L(-1) 6-BA+0.3mg·L(-1) NAA,全天光照培养时细胞生长量最大。北细辛悬浮细胞生长曲线大致为"S"型,悬浮细胞的最佳收获周期为15d。经悬浮培养后可快速
[期刊] 华北农学报
[作者]
张国君 李云 刘书文 姜金仲 田砚亭
测定了廊坊地区饲料型四倍体刺槐叶粉4个不同时期的粗蛋白质含量及18种氨基酸组分,用氨基酸分(AAS)和必需氨基酸指数(EAAI)对其氨基酸营养进行评价,并结合其生物量对最佳刈割时期进行了分析。结果表明,饲料型四倍体刺槐叶粉4个时期的粗蛋白1、8种氨基酸总量和12种必需氨基酸含量均较高,且呈现随时间的推移而逐渐下降的趋势;其必需氨基酸分(AAS)均较高,氨基酸组成较平衡;对牛、猪、鸡、鸭、鹅、草鱼、对虾和羊8种动物的必需氨基酸指数(EAAI)4个时期之间无差异,均大于0.86,可作为这些动物的优良植物饲料蛋白源;在7月中下旬其生物量和营养达到了最佳结合点,适宜采摘或刈割。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
任亚萍 刘秀群 陈龙清
以卷丹的组培苗为试验材料,研究不同培养方式(固体培养、固-液培养、液体浅层静置培养)、蔗糖与活性炭双因素、茉莉酸甲酯等对卷丹试管内结鳞茎的生长和膨大的影响,以期筛选出对卷丹试管鳞茎生长和膨大有利的培养条件。结果表明:液体培养方式对卷丹试管鳞茎膨大效果较显著,鳞茎的平均鲜质量达到249.84mg,是固体培养条件下的3倍,直径>8 mm鳞茎的产率达54.05%,是固体培养条件下的近5倍;蔗糖和活性炭双因素试验表明,90 g/L蔗糖+3 g/L活性炭是最佳浓度配比,可使鳞茎平均鲜质量达到479.17 mg,最大达到870 mg;茉莉酸甲酯的最佳浓度为10-7mol/L,可使鳞茎平均鲜质量达180 m...
关键词：
卷丹 试管鳞茎 生长 膨大 组织培养
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
刘永红 梁宗锁 杨东风 刘文婷
【目的】筛选半夏小块茎悬浮培养过程中诱导和继代的最佳培养基,并对小块茎中生物碱类化合物的含量进行测定,为半夏生物碱的生产及其次生代谢物的调控提供参考。【方法】在添加不同激素的MS培养基上诱导、增殖半夏小块茎,并建立未分化小块茎的液体悬浮培养体系,采用酸性染料比色法测定小块茎的总生物碱含量,高效液相色谱法测定小块茎中鸟苷、肌苷和葫芦巴碱的含量。【结果】以块茎、叶片叶柄为外植体诱导半夏小块茎的最佳培养基分别为MS+0.5mg/LNAA+1.0mg/L6-BA和MS+0.2mg/LNAA+1.0mg/L6-BA;小块茎最适继代培养基为固体1/2MS+0.6mg/LABA;小块茎的液体悬浮培养基为液体...
关键词：
半夏 组培小块茎 鸟苷 肌苷 葫芦巴碱
[期刊] 林业科学
[作者]
尹忠平 上官新晨 陈继光 吴少福 黎冬明
通过大孔树脂吸附、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶层析、半制备高效液相色谱及重结晶对青钱柳悬浮培养细胞三萜酸进行分离纯化,获得5个单体三萜酸,经高分离度快速液相-飞行时间质谱(RRLCTOF/MS)、核磁共振氢谱(1H NMR)和核磁共振碳谱(13C NMR)等分析,分别被鉴定为2α-羟基齐墩果酸、2α-羟基熊果酸、白桦脂酸、齐墩果酸、熊果酸,其中2α-羟基齐墩果酸和白桦脂酸是首次在青钱柳中得到分离鉴定。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王梦芝 王洪荣 曹恒春 李国祥 张洁
【目的】研究特定氨基酸在人工瘤胃体外培养条件下如何影响瘤胃微生物群系特征及其发酵。【方法】研究中以3只瘘管山羊作为瘤胃液供体,采用底物去除技术,底物设计分别为:全量必需氨基酸组(TEAA),组氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和支链氨基酸(BCAA)的缺省组。【结果】底物对培养液pH均值没有显著性影响,但各组pH值随时间的变化模式有所不同;培养液氨氮浓度较高,在10.99～30.51mg/100ml范围变动,各组氨氮浓度随时间的变化模式也有明显的不同;特定氨基酸缺省对微生物蛋白产量限制程度不同,以BCAA缺省对微生物蛋白产量的限制最大,相对于全量组混合微生物蛋白下降了44.52%。研究还发现底物对微生物区系...
[期刊] 林业科学研究
[作者]
徐志荣 王婷 娄佳兰 魏赛金
[目的]南方红豆杉细胞悬浮培养体系优化及动力学模型构建。[方法]以南方红豆杉1年生枝条诱导产生的愈伤组织为材料,在优化愈伤组织接种量、培养基初始pH、植物激素类型及配比的基础上,分析南方红豆杉悬浮细胞生长和紫杉醇积累的动力学关系及主要营养成分的变化。[结果]适合南方红豆杉悬浮培养的培养基为:B5+0.4 mg·L~(-1) 2,4-D+0.3 mg·L~(-1) NAA+1.2 mg·L~(-1) 6-KT+30 g·L~(-1)蔗糖,培养基最佳初始pH为5.8,最佳接种量为0.09 g·mL~(-1)。在1个培养周期内,培养液中的糖、磷元素,铵态氮、硝态氮在细胞培养的第18天基本被消耗完全或保持不变;动力学拟合表明,南方红豆杉细胞悬浮培养生长符合Logistic生长模型,最大比生长速率为0.143 65 d~(-1),底物消耗和紫杉醇合成可用Luedeking-Piret模型描述,悬浮细胞生长与紫杉醇积累属于部分生长偶联型。[结论]南方红豆杉细胞悬浮培养体系优化后,通过模型的回归拟合,获得了反映南方红豆杉细胞培养的动力学参数,试验所构建的发酵动力学模型在一定程度上揭示了南方红豆杉细胞产紫杉醇代谢过程的特征。
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