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[期刊] 中国农业科学  [作者] 雷蕾  鲍恩东  
【目的】探讨急性热应激条件下肉鸡组织的病理性损伤及其Hsp90含量变化的相关性。【方法】将100只1日龄AA肉鸡随机分成5组,每组20羽。正常环境温度下对受试鸡进行30d的适应性饲养后,除对照组外,将其余80只受试鸡的环境温度迅速由(25±1)℃上升至(40±1)℃,并分别持续进行2、3、5和10h的热应激处理。利用组织病理、免疫组织化学和酶联免疫吸附试验,检测急性热应激状态下受试肉鸡心脏、肝脏及肾脏组织的病理性损伤和Hsp90的定位与表达。【结果】在热应激开始的2~5h,受试鸡心脏、肝脏和肾脏组织的实质细胞损伤表现出随热应激时间的持续而逐渐加重的趋势,病理变化特征以颗粒变性和水泡变性为主。热...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 付旭彬  孙培明  李玉保  王志亮  鲍恩东  
将 30日龄AA肉鸡在 ( 4 0± 1)℃高温中分别持续 2、 3、 5和 10h ,定期剖杀 ,进行临床血液病理学、组织病理学和免疫组织化学检测。结果表明 :在热应激 2~ 5h内 ,受试鸡外周血液中肌酸激酶活性持续升高 (P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 严建燕  鲍恩东  于纪棉  朱琳  
为研究环境胁迫条件下热休克蛋白60 mRNA(hsp60mRNA)转录水平和应激性损伤的关系,将30日龄AA肉鸡的饲养环境温度从(22±1)℃突然升高到(37±1)℃分别热应激1、2、3、5和10 h后剖杀,利用临床血液病理学、组织病理学和荧光定量PCR方法,观察热应激不同时间对肉鸡重要器官心脏和肾脏组织损伤及其hsp60mRNA表达水平的影响。结果显示,持续热应激处理后的肉鸡血液肌酸激酶(CK)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)均显著升高,CK在2、3、5和10 h与对照组(无热应激)差异极显著(P<0....
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 许生友  陈兴勇  姜润深  耿照玉  
研究优质黄羽肉鸡热应激期间肝脏和下丘脑组织中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)基因mRNA的动态表达规律,为揭示该类型优质鸡种热应激反应机理提供参考。64日龄Anak 40(♂)×岭南黄(♀)杂交后代母鸡置于(38±1)℃恒温室内进行持续热应激处理,采取荧光定量PCR方法分别测定热应激起始(0 h)、热应激后12、24、36、48和60 h肝脏和下丘脑组织中HSP70 mRNA的表达水平。随着热应激时间的延长,肝脏和下丘脑组织中HSP70 mRNA表达水平均显著上升,至热应激36 h时表达水平达高峰值,约为应激起始表达水平的7倍,差异显著(P<0.05);...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 张成  赵菲  李煬  张勇  王驰  耿照玉  
为研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对急性热应激肉鸡血清及器官抗氧化能力的影响,选取144羽10日龄淮南麻黄公鸡,随机分为3组:对照组(Ⅰ组)、急性热应激组(Ⅱ组)和急性热应激+EGCG组(Ⅲ组),每组6个重复,每个重复8羽。Ⅰ组和Ⅱ组饲喂基础饲粮,Ⅲ组饲喂在基础饲粮中添加400mg/kg EGCG的试验饲粮。至94日龄时,Ⅰ组环境温度维持为(22±1)℃,Ⅱ组和Ⅲ组升温至(33±1)℃,持续12h后,采集血清、脾脏、肝脏及空肠,用比色法检测抗氧化指标,并用实时荧光定量(qRT-PCR)法检测肝脏核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路相关基因表达水平。结果表明:1)与Ⅰ组相比,Ⅱ组肉鸡脾脏指数,血清和脾脏中总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,肝脏中T-SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及Nrf2、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO1)、CAT、GSH-Px mRNA表达量显著降低(P<0.05),而空肠中丙二醛(MDA)含量,肝脏中MDA和蛋白羰基(PC)含量及Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)mRNA表达量显著升高(P<0.05),而空肠和肝脏中MDA含量显著降低(P<0.05)。综上,饲粮中添加EGCG可提高急性热应激肉鸡的抗氧化能力,进而缓解急性热应激导致的氧化损伤,其机制可能与EGCG激活Nrf2信号通路关键抗氧化基因表达有关,为EGCG应用于肉鸡生产奠定了理论基础。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 陆蓓玲  王兰芳  
为研究急性热应激后小鼠抗氧化酶活性的变化及其肝脏热休克蛋白70基因(Hsp70)的表达规律,选取5~6周龄健康昆明雄性小鼠56只,平均分成7组(1个对照组和6个急性高温处理组)。6个急性高温处理组小鼠分别为41℃、急性高温处理2 h后再置于25℃环境中0、2、6、12、24、48 h的小鼠。分别测定各处理小鼠的脏器指数、血清和肝脏中抗氧化酶的活性,用RT-PCR方法检测肝脏中Hsp70-1,Hsp70-3基因的表达。结果表明,急性热应激处理后,小鼠脏器指数在48 h内没有明显变化。血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高(P<0.05)...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 潘晓建  彭增起  周光宏  于纪棉  鲍恩东  
【目的】研究宰前热应激对肉鸡胸肉pH、脂肪氧化和蛋白质氧化的影响,探讨热应激影响宰后肌肉蛋白质功能特性的机制。【方法】将30日龄AA肉鸡由(25±1)℃突然暴露在(40±1)℃高温中,并分别持续0、1、2、3和5h后,各处理组中随机抽取10只,宰杀后剥取的胸肌在4℃条件下成熟24h,测定鸡胸肉的pH、脂肪氧化产物MDA、蛋白羰基值和蛋白质功能特性的变化。【结果】与对照组相比,热应激处理组的鸡胸肉pH30min、pH24h呈现下降趋势(P<0.05),3h和5h处理组提高了胸肉脂肪氧化程度(P<0.01),2、3和5h处理组胸肉肌浆蛋白和肌原纤维蛋白氧化程度高于对照组(P<0.01),热应激时间...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 孙培明  李玉保  王志亮  鲍恩东  
将 90只肉鸡随机分成A组 (对照)、B组 (热应激 6h)、C组 (热应激 12h)、D组 (热应激 18h)、E组 (热应激 24h) 和F组 (热应激 48h)。对各组受试鸡心肌进行病理组织学检查, 并利用 4种HSP单克隆抗体 (HSP27、HSP60、HSC70和HSP86 ) 对心肌纤维进行免疫组织化学染色。实验结果显示, 热应激时心肌纤维的病理组织学损伤主要表现为心肌纤维变性和心肌纤维断裂; HSP27、HSP60、HSC70和HSP86在心肌纤维中的定位不尽相同, HSP27、HSC70和HSP86在心肌纤维中有强阳性表达, 但HSP60的阳性染色较弱。提示HSPs在心肌纤维内...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 鲍恩东  K R Sultan  B Nowak  J Hartung  
利用Westernblot技术 ,检测长途运输试验猪骨骼肌 (背最长肌和臀大肌 )中分属于HSP70 家族和HSP90 家族的 4种应激蛋白 (HSP70 ,HSP72 ,HSP86和HSP90 )的表达。所有运输应激猪和对照猪肌肉组织中均检测到了上述 4种HSP。对照猪组织中HSP的表达说明HSP除了在受应激的细胞内行使生理功能外 ,还具有独立于应激刺激应答以外的其它作用。6h的长途运输后 ,HSP的表达量明显不同 ,HSP70 和HSP72 在肌肉组织中的表达虽然有一定的增加 ,但统计学分析差异不显著 (P >0 0 5 ) ;而HSP86和HSP90 在骨骼肌中的表达明显下降 ,尤以H...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 彭梦玲  董静  刘琦  胡文业  张粟子  王菊花  周杰  
为探讨稀土壳糖胺螯合盐(RECC)对热应激黄羽肉鸡脂肪组织学及三磷酸结合盒转运体G1(ATPbinding cassette G1,ABCG1)mRNA表达的影响。随机选取90只饲养至29日龄黄羽肉鸡,分为3个处理组,即常温对照组、热应激组和RECC组(热应激+基础日粮中添加0.03%RECC)。分别在热应激处理1和2周后,采集肉鸡内脏、皮下及肌间脂肪,实时荧光定量(qRT-PCR)方法检测脂肪细胞大小变化及脂肪组织中三磷酸结合盒转运体G1mRNA表达变化。结果表明:热应激1周后,与对照组和热应激组相比,RECC组肉鸡内脏、皮下和肌间脂肪细胞直径与相比显著减小(P<0.05);热应激2周后,与对照组和热应激组相比,RECC组肉鸡内脏和肌间脂肪细胞直径显著减小(P<0.01)。综上所述,RECC可通过减小脂肪细胞直径和促进ABCG1的表达,从而抑制热应激1周肉鸡体内脂肪沉积。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 周朝伟  胡续雯  雷骆  刘晓庆  任胜杰  杨旻珉  曹高祥  陈国梁  邓星星  李岩  李路宽  
本研究旨在探讨热应激对银鲫(Carassius auratus gibelio)生化指标及肝脏HSP70 mRNA表达的影响,选取平均体重为(72.8±10.1) g的银鲫,分别在热应激前(25℃,对照组)、热应激后(32℃,0 h、2 h、6 h、10 h)和恢复适温后6 h (25℃,恢复组)的条件下,测定机体血浆乳酸(LD)、血浆葡萄糖(Glu)、肝糖原(Gly)、己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)和肝脏HSP70 m RNA表达量变化。研究表明,实验组乳酸含量从热应激开始至恢复期,差异始终不显著(P>0.05);实验组血浆葡萄糖水平在热应激后0 h、2 h、6 h,极显著高于对照组(P0.05);己糖激酶活力在热应激后2 h,显著高于对照组(P>0.05);丙酮酸激酶活力在热应激后6h,极显著高于对照组(P0.05)。本研究为进一步探究银鲫的高温应激作用机制及调控机理提供参考数据,同时,也为银鲫养殖和育种等生产实践提供相应参考依据。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李玉保  孙培明  王志亮  鲍恩东  
利用组织学、免疫组织化学以及临床血液检测等方法,探讨持续运输应激对育肥出栏猪组织的病理性损伤以及组织损伤与HSP27组织定位之间的相关性。结果表明:运输应激初期(1~2h),反映组织损伤的血液肌酸激酶(CK)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性都显著升高;应激4h时,CK及AST活性有所下降;当应激持续到6h和10h时,CK活性又显著升高。组织病理损伤也呈现出相似的波动变化。免疫组织化学结果显示,随着应激时间的延长,HSP27在组织中的定位没有发生肉眼可见的变化;HSP27主要分布在心肌和肝细胞胞浆中,在背最长肌的细胞浆和细胞核中均呈强阳性表达,在肺脏细支气管的黏膜下层有强阳性表达,在受检组织...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张成  王驰  王孝成  赵菲  耿照玉  
[目的]本试验旨在研究白藜芦醇对热应激肉鸡肝脏抗氧化功能和核因子E2相关因子2(Nrf2)通路相关基因表达的影响。[方法]300羽1日龄爱拔益加(AA)公鸡饲养至21日龄时选取其中54羽体重相近的肉鸡,随机分为3组,每组3个重复,每个重复6羽。对照组[(22±1)℃,24 h)]和热应激组[(33±1)℃,10 h;(22±1)℃,14 h)]饲喂基础饲粮,热应激+白藜芦醇组饲喂在基础饲粮中添加400 mg·kg~(-1)白藜芦醇的试验饲粮。试验期21 d。[结果]与对照组相比,热应激组肉鸡终末体重、平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数、血清中葡萄糖(GLU)含量和总蛋白(TP)含量,肝脏中核因子E2相关因子(Nrf2)、亚铁血红素加氧酶(HO-1)、超氧化物歧化酶1(SOD1)mRNA表达量及过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、谷胱甘肽疏基转移酶(GSH-ST)、SOD活性均显著降低(P<0.05)。[结论]白藜芦醇对热应激肉鸡生长性能、免疫器官发育、血清生化指标及抗氧化功能具有促进作用,其改善抗氧化功能的机制可能与其激活Nrf2信号通路有关。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 石一凡  李晓彤  锁云鹏  刘俊泽  李春梅  李延森  
[目的]本试验旨在探讨维甲酸对热应激小鼠睾丸损伤的保护作用。[方法]试验选用40只7周龄雄性ICR小鼠,随机分为4组:对照组(CON),热应激组(HTRA_(0)),5 mg·kg~(-1)·d~(-1)维甲酸处理组(HTRA_(5))和10 mg·kg~(-1)·d~(-1)维甲酸处理组(HTRA_(10))。小鼠灌胃相应剂量维甲酸或玉米油后,42 ℃全身热应激2 h,处理7 d,试验结束后屠宰采样。[结果]与CON组相比,HTRA_(0)组小鼠睾丸的质量、最小直径以及生精小管的横截面积、直径和上皮厚度显著降低(P<0.05),附睾精子活力显著下降(P<0.05),丙二醛(MDA)水平显著升高(P<0.05),总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著降低(P<0.05),抗氧化相关基因(nrf2、ho-1、nqo1、sod1、gpx1)表达量显著增加(P<0.05),bax基因表达量显著升高(P<0.05),精子发生相关基因(plzf、c-kit)表达量显著增加(P<0.05)。与HTRA_(0)比,HTRA_(5)组小鼠生精小管的横截面积、直径和上皮厚度显著升高(P<0.05),MDA水平显著降低(P<0.05),T-SOD活性显著升高(P<0.05);HTRA_(10)组小鼠生精小管的横截面积、直径和上皮厚度显著升高(P<0.05),精子的活力显著提高(P<0.05),MDA水平显著降低(P<0.05),T-SOD活性显著提高(P<0.05),nqo1、bax、bcl-2、zo-1、n-cadherin、plzf和c-kit基因表达量显著降低(P<0.05)。[结论]维甲酸能够改善热应激小鼠的睾丸质量、睾丸组织形态和附睾精子活力,使之更接近对照组水平;这种保护作用可能是通过增加小鼠睾丸抗氧化能力,减少生精细胞凋亡,增强血睾屏障,改善生精微环境实现的。
[期刊] 水产学报  [作者] 孙丽颖  张木子  黎明  袁莉霞  王日昕  
为了探讨急性氨氮胁迫对黄颡鱼组织中抗氧化酶活性及HSP70和HSP90基因mRNA表达水平的影响,实验随机挑选了360尾黄颡鱼[初体质量(17.25±0.05) g],分别暴露于含有0(对照)、5.70(低浓度组)、28.50(中浓度组)和57.00 (高浓度组) mg/L总氨氮浓度的水体中,进行96 h的急性胁迫实验。实验开始后,分别于0、12、24、48和96 h取样。结果显示,氨氮胁迫发生后,低、中浓度组实验鱼肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性呈先升高后降低趋势,而高浓度组则持续降低;低、中、高浓度组实验鱼肝脏中丙二醛(MDA)含量在胁迫开始后显著升高;3 h时,高浓度组实验鱼肝脏中SOD活性达到最低,而MDA含量最高;24 h后,高浓度组实验鱼肝脏中过氧化氢酶(CAT)活性显著升高;低、中、高浓度组实验鱼肝脏中HSP70基因的mRNA表达量呈先降低后升高趋势,而鳃中HSP70基因表达量持续升高,但脑中HSP70基因在0 h后显著降低;氨氮胁迫3 h时,低、中、高浓度组实验鱼肝脏和脑中HSP70基因表达量显著低于对照组,而在鳃中正好相反;相比HSP70基因,高氨氮浓度组实验鱼肝脏和鳃中HSP90基因的mRNA表达量在24 h时达到最高。研究表明,不同浓度的氨氮胁迫会对黄颡鱼抗氧化酶活性造成不同程度的抑制,原因与丙二醛的积累量有关;相比HSP90基因,黄颡鱼HSP70基因的表达量在氨氮胁迫发生后迅速上调,这种生理调控机制提示HSP70在应对急性氨氮胁迫时发挥着更重要的作用。
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