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[期刊] 中国水产科学  [作者] 李宁求  米彦飞  付小哲  林强  石存斌  邓国成  吴淑勤  
应用模糊层次分析法,并结合流行病学调查、荟萃分析和德尔菲法,构建了由评估指标体系、风险因素权重、评分标准、综合评价函数等组成的草鱼出血病免疫预防风险评估模型,其中,评估指标体系包括疫苗品质(B1)、免疫程序(B2)、鱼体(B3)、池塘环境(B4)和饲养管理(B5)共5个准则层风险因素和疫苗品种(C1)、保存温度与有效期(C2)、运输存储条件(C3)、免疫时疫苗的存放(C4)、免疫时鱼体健康状态(C5)、免疫技术(C6)、免疫剂量(C7)、漏免的鱼数(C8)、鱼种来源(C9)、健康状态(C10)、鱼体规格(C11)、水温(C12)、溶氧(C13)、氨氮(C14)、亚硝酸盐(C15)、pH值(C1...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 刘林  徐诗英  李婧慧  邹勇  倪金俤  杨鸢劼  曹广力  薛仁宇  陈辉  贡成良  
为了评估草鱼出血病病毒(GCRV)vp6基因核酸疫苗的免疫效果,将vp6基因克隆进pFastBacTMDual载体杆状病毒的多角体蛋白(Ph)启动子下游,同时将团头鲂(Megalobrama amblycephala)β-actin启动子控制的vp6基因克隆进杆状病毒的P10启动子下游,获核酸疫苗载体pFastBac-FA-VP6-ph-VP6。按每尾分别注射疫苗载体10、30、60μg的剂量免疫草鱼(Ctenopharyngodon idellus)(体长14~20 cm,体质量60~120 g),同设pFastBacTMDual载体(30μg/尾)阴性对照组及空白对照组(0.4 mL/尾无...
[期刊] 水产学报  [作者] 许淑英  李焕林  邓国成  姜兰  
本文报道经筛选的GCHV-841毒株在草鱼吻端成纤维细胞系(PSF)中进行适应性培养,弱毒驯化,细胞培养弱毒疫苗的制备,安全性观察,不同稀释度和剂量的免疫保护率测定及保存试验。GCHV-841毒株在PSF细胞中继代驯化至53代达到减毒目的。筛选得53~59代作毒种制备的细胞弱毒疫苗使用安全。用稀释10~104倍的疫苗,0.1~0.3毫升/尾剂量注射草鱼,其免疫保护率均在85%以上。生产上使用疫苗的适宜浓度和剂量是稀释102倍和0.2毫升/尾。冻干疫苗宜保存于4℃以下。较合适的保存期是6个月(4℃)和18个月(-20℃)。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 曾令兵  左文功  廖来强  田先文  
使用廉价培养基CAS在CIK细胞系上增殖草鱼出血病病毒(GCHV—854株),所制备的灭活疫苗性能稳定,安全性好。用该疫苗免疫草鱼,饲养10天后,其血清中和抗体水平测定结果表明,注射组为107.9±11.0(3),浸泡组为68.5±9.9(3),与对照组[20.23±4.5(3)]相比,P值分别为P<0.001和0.001<P<0.01,差异极显著。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 许淑英  李焕林  邓国成  姜兰  白岳强  姜金忠  
草鱼出血病细胞培养弱毒疫苗对草鱼的最小免疫量为稀释103倍、02ml/尾。免疫产生期为疫苗注射后的第2天;免疫保护期达15个月。弱毒疫苗的保存期为-30℃30个月、-10℃24个月、4℃8个月、15—20℃1个月左右。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 刘德福  孙世友  彭福峰  王兴礼  
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 李瑞伟  曾令兵  张辉  肖艺  周勇  范玉顶  刘秋凤  孙建滨  
以海藻酸钠、壳聚糖以及草鱼出血病细胞灭活疫苗为原材料,采用复凝聚法制备草鱼出血病口服微囊疫苗。通过单因素试验和正交试验,研究了海藻酸钠浓度、壳聚糖浓度、氯化钙浓度以及加入疫苗体积对微囊疫苗包封率的影响,确定了其最佳制备工艺。结果显示,各因素对草鱼出血病微囊疫苗包封率的影响程度由大到小依次为:海藻酸钠浓度>疫苗加入量>壳聚糖浓度>氯化钙浓度;制备草鱼出血病微囊疫苗的最佳工艺为:海藻酸钠浓度为1.5%,壳聚糖浓度为1%,氯化钙浓度为4%,加入疫苗体积为2 mL。该微囊疫苗平均粒径为(7.02±3.95)μm,平均包封率为60.53%,平均载蛋白量为8.12 mg/g,在pH 7.4的PBS溶液、生...
[期刊] 水产学报  [作者] 刘林  徐诗英  李婧慧  邹勇  倪金俤  杨鸢劼  曹广力  薛仁宇  陈辉  贡成良  
为了探讨草鱼出血病病毒(GCRV)VP6亚单位疫苗对草鱼出血病的免疫保护作用,将vp6基因克隆进原核表达载体pET-28a(+),构建了重组质粒pET28a(+)-VP6。SDS-PAGE和Western-blotting显示,重组VP6蛋白的分子量约为43 ku,主要以包涵体形式存在,重组蛋白占菌体总蛋白的20%左右;Ni2+柱纯化后的重组蛋白,以每尾500μg肌肉注射免疫草鱼(14~20 cm,60~120 g),并在第14、21、28、49、70天通过间接凝集反应检测抗体水平,结果显示,免疫注射后第14天可检测到鱼体产生的特异性抗体,第21天达到最高峰,第70天仍可检测到抗体的存在;免疫...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 罗毅志  杨广智  叶雪平  
[期刊] 淡水渔业  [作者] 杨先乐  夏春  左文功  
旋转培养优于静置培养,它不仅表现在可形成细胞单层的面积大,单层细胞的产量高,单位面积所需的培养液(维持液)少,而且细胞生长的速度较快,细胞形成单层的时间较短,接种病毒后收获的病毒滴度也相应较高,它适宜于疫苗工厂化生产。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 杨淞  吴淑勤  李宁求  石存斌  邓国成  林文辉  林强  
本研究通过调查、分析草鱼出血病发生的各种风险因素,初步构建该病发生的风险评估模型,旨在为防控疾病提供决策依据。该模型包括由层次分析法构建的指标体系,以德菲尔法确定的各风险因素权重,由综合评价法表述的风险评估结果。构建的草鱼出血病风险指标体系包括9个目标层,即鱼种(B1)、免疫(B2)、水质(B3)、放养密度(B4)、水温(B5)、饲养管理(B6)、发病史(B7)、天气(B8)、池塘状况(B9);26个风险指标层,主要包括如鱼种是否带毒(C1)、是否免疫(C4)、免疫时健康状况(C6)、放养密度(C13)、水温(C14)、近年来发病情况(C19)等。目标层风险因素权重值集合为W={0.167;0...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 何福林  肖克宇  龚泽修  
为了探明草鱼出血病病毒的血凝作用及其影响因素 ,应用血凝试验对此进行了测定 ,结果表明 :病毒只对鸡红细胞引起高滴度凝集 ,这种凝集能被特异性抗血清所抑制 ;血凝的适宜 pH为 5 .5~ 7.0 ,2 %的氯化钠为较适宜的稀释液 ,血凝活性以在 37℃温度条件下最好 ;出血病病鱼肠道的凝集价最高 ;醛化的鸡红细胞在 4℃下保存一年多仍具有新鲜红细胞表面受体活性 ,从而使草鱼出血病的HA和HI试验更具有稳定性和广泛的实用性 ,建立了一种快速诊断草鱼出血病的方法
[期刊] 世界农业  [作者] 曾智勇  汤德元  郭万柱  
疫苗免疫接种是防制和控制乃至根除伪狂犬病的根本措施,许多国家在发展和改进现有常规疫苗的同时,纷纷探索利用生物技术研制和开发安全有效的新型疫苗。为此,本文就伪狂犬病疫苗的研究做一综述,以供参考。
[期刊] 水产学报  [作者] 杨先乐  曾令兵  
本文研究了草鱼对CFRV疫苗的免疫应答水平、规律性、免疫效应期及免疫持久性。用该疫苗免疫后的草鱼能产生很强的应答反应,免疫保护力可达80%以上,血清中和抗体效价非常明显地高于对照组。它的免疫效应期在5天以内,第10天血清中和抗体达到较高水平,第20天处于峰值,并可维持20余天,以后在第10天的水平上波动。草鱼对CFRV疫苗的免疫持久性在13个月以上。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 杨龙圣  胡元亮  薛家宾  王芳  王德云  徐为中  
【目的】研究两个中药成分复方(cCHMIs)的免疫增强作用和机理。【方法】选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-γ、IL-10mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63d测定免疫器官指数和攻毒保护率。【结果】两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-γ、IL-10mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显...
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