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[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨月春 王士勇 李钟淑 李福俊 方南洙
为了研究延边黄牛体细胞克隆胚胎内部的活性氧水平,以延边黄牛孤雌激活胚胎为对照,用2,′7′-二氯荧光素二乙酸酯和二氢乙锭两种染料分别对体细胞克隆胚胎进行染色,测定其内部超氧阴离子和过氧化氢含量。结果表明,2细胞期处理组间超氧阴离子水平差异不显著(P>0.05),其它细胞期体细胞克隆组均显著高于孤雌激活组(P<0.05),过氧化氢水平各细胞期体细胞克隆胚胎均显著高于孤雌激活胚胎(P<0.05)。因此,延边黄牛体细胞克隆胚胎氧化损伤水平显著高于孤雌激活胚胎。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
朱玉霞 王玉涵 李钟淑 方南洙
为确定延边黄牛体细胞核移植过程中卵母细胞的最佳去核时期,本试验选取体外成熟22 h的中期(MⅡ期)卵母细胞与体外成熟28 h的末期(TⅡ期)卵母细胞进行化学辅助去核操作,并将去核的卵母细胞作为受体构建重构胚,后期观察发育情况。结果显示,M期卵母细胞的显核率与TⅡ期卵母细胞的显核率无显著差异;但是TⅡ期卵母细胞所得重构胚的卵裂率及囊胚率均显著高于MⅡ期卵母细胞所得重构胚的卵裂率及囊胚率。综上所述,卵母细胞体外成熟28 h后的TⅡ期可作为延边黄牛核移植去核操作的理想时期,在TⅡ期卵母细胞中选择化学辅助去核法去核能够提高延边黄牛体细胞克隆的效率。
[期刊] 水产学报
[作者]
余来宁 危起伟 张繁荣 杨东 姚雁鸿 刘红艳
为了保存濒危鱼类中华鲟种质资源,对其囊胚细胞和原肠细胞进行了冷冻保存和核移植试验。用二甲亚砜(DMSO)、1,2-丙二醇(PG)、羟乙基淀粉(HES)3种抗冻剂,配制4种冷冻保护液:CP1(12%D)、CP2(10%P)、CP3(8%D+6%E)、CP4(7%P+6%E),冷冻细胞存活率分别为47.4%±4.7%、64.4%±3.6%、54.7%±4.7%、76.7%±5.7%,CP4保存效果最好,说明添加非渗透型抗冻剂羟乙基淀粉能提高冷冻保存细胞的存活率。比较了两种冷冻方法,发现细胞在-7℃平衡30min之后直接投入液氮的一步冷冻降温法是可行的。对不同发育时期的胚胎细胞冷冻存活率进行了比较,...
关键词：
中华鲟 胚胎细胞 冷冻保存 核移植
[期刊] 中国农业科学
[作者]
崔奎青 刘庆友 谢英 韦精卫 石德顺
对兔胚胎细胞核移植(NT)的有关影响因素进行了系统研究。结果发现电场强度100V·mm-1,脉冲时间15μs,电脉冲3～4次的融合率显著高于其它组(P<0.05);融合前激活卵母细胞,分裂率和囊胚率显著高于融合后激活(P<0.05);当用8～16-细胞胚胎的卵裂球作供核时,卵裂率和囊胚率显著高于致密桑椹胚卵裂球为供核组;当重组胚在含3%发情牛血清(OCS)的TCM199中培养48h后,转入含10%FCS的TCM199中继续培养,卵裂率和囊胚率显著高于一直在3%OCS或10%胎犊血清(FCS)中培养的重组胚(P<0.05)。将22枚2～4-细胞期重组胚移入同期发情的受体母兔输卵管内,34d后产下...
关键词：
兔 核移植 胚胎
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
剧世强 赵雪璠 张妍婷 孔妍 李建珅 芮荣
以小鼠卵丘细胞为供核细胞,猪体外成熟去核卵母细胞为受体,构建小鼠-猪种间体细胞核移植(iSCNT)胚胎,并以猪体细胞核移植(pSCNT)胚胎为对照,采用开放式拉长细管(OPS)法对所获iSCNT胚胎进行冷冻保存,研究不同冷冻保护液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同发育阶段(2-、4-、8-细胞)对冷冻效果的影响。结果显示:小鼠-猪iSCNT胚胎卵裂率与猪pSCNT胚胎相比无显著差异(P>0.05),但其8-细胞发育率则明显较低(28.1%对56.8%,P<0.05)。采用ES液作为冷冻保护液,iSCNT胚胎冻后存活率与EDFS组相似,但显著高于EFS组(28.6%和22.7%对9.5%,P<...
关键词：
种间核移植 胚胎 玻璃化冷冻
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
胡广卫 苏建民 曹泽磊 丁向彬 王勇胜 张涌
【目的】探讨5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2-′Deoxycytidine,5-Aza-CdR)联合曲古抑菌素A(Trichosta-tin A,TSA)对牛核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响。【方法】以体外受精胚胎作为对照组,将部分体细胞、核移植胚胎以及体细胞联合核移植胚胎用5-Aza-CdR+TSA(5-Aza-CdR:20 nmol/L,72 h;TSA:50 nmol/L,12 h)进行处理,统计核移植胚胎体外发育率,并对2-细胞、8-细胞和囊胚阶段胚胎进行DNA甲基化和组蛋白乙酰化检测,研究5-Aza-CdR+TSA处理对核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响。【结果...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张运海 潘登科 孙国杰 孙秀柱 李燕 戴蕴平 李宁
目的本研究系统比较了体外受精胚(IVFEs)、孤雌激活胚(PAEs)以及体细胞核移植胚(NTEs)的发育率和囊胚质量,同时还比较了PZM-3和NCSU-23两种培养基培养对PAEs以及NTEs发育的影响。方法利用体细胞核移植技术、体外受精技术和孤雌激活技术分别生产猪的NTEs、IVFEs和PAEs,开展体外培养。结果(1)IVFEs、PAEs和NTEs的卵裂率分别为72.0%,66.0%和63.5%,各组间没有显著差异(P>0.05);囊胚形成率分别为11.0%,22.6%和16.9%,也不存在明显不同(P>0.05);然而,在囊胚质量,即ICM细胞数/总细胞数的比例上,IVFEs和NTEs均...
[期刊] 华北农学报
[作者]
李振侠 徐继忠 高仪
试验以SH40、M26两种苹果砧木为试材,研究了缺铁胁迫对根系组织中O2-.(超氧阴离子)含量及SOD(超氧化物歧化酶)、POD(过氧化物酶)活性的影响。结果表明:铁胁迫条件下SH40根系内O2-.含量升高,MDA含量降低,O2-.和MDA含量均高于M26根系内的。随着铁胁迫处理时间的延长,M26根系内SOD活性先升高后降低,POD活性一直升高;而SH40根系内SOD酶活性降低,POD活性先升高后降低。M26根系内SOD、POD活性均高于SH40。
[期刊] 华北农学报
[作者]
贾瑞贞 李煜 杨利军 黄翔华
研究了牛体细胞核移植过程的去核方法、融合条件等对重构胚发育的影响,旨在探索一种简化的核移植操作程序。结果表明,添加FSH,LH,最高成熟率为81.7%。在电压为2.6 kV/cm时,融合率为93.96%。激活后重构胚在压制的WOW内进行培养,采用半卵法去核的卵裂率和8-细胞发育率分别为61.2%和3.27%,盲切法去核的卵裂率和8-细胞发育率分别是70.8%和7.56%。
关键词：
体细胞 核移植 徒手克隆 牛
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
戴津泼 华松 张涌
利用PCR反应延伸过程中,3′端碱基不配对,PCR反应不能启动的等位基因特异性PCR分析法(AS-PCR)原理,采用生物软件DNASTAR分析牛、羊线粒体细胞色素b(Cytb)基因,以牛、羊碱基差异较大位点作为上游引物的3′端来设计引物,进行PCR扩增反应,分析牛羊异种克隆胚中线粒体的变化情况。结果表明,AS-PCR法是一种快速、有效鉴定异种重构胚中线粒体异质性的方法。
关键词：
AS-PCR 核移植 线粒体 细胞色素b
[期刊] 中国农业科学
[作者]
赵学明 杜卫华 王栋 郝海生 朱化彬
【目的】探讨冷冻保存对牛体外生产胚胎能量代谢、有氧代谢造成的影响。【方法】采用常规法或玻璃化法(open pulled straw,OPS法)冷冻保存牛体外受精(in vitro fertilization,IVF)囊胚和体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)囊胚,利用ATP Bioluminescence Assay Kit HS II和GENMED ROSAssay Kit检测了冷冻-解冻后囊胚ATP含量和ROS水平。【结果】(1)IVF和SCNT囊胚OPS法冷冻-解冻后存活率((93.25±5.17)%和(77.56±3.52)%)均显著高于...
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
樊甄姣 刘志鸿 杨爱国
实验测定了不同浓度氨氮胁迫下栉孔扇贝(Chlamys farreri)血淋巴中胞内胞外活性氧自由基(ROIs)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的变化。结果表明,在较低浓度氨氮胁迫下,胞内胞外活性氧含量都随氨氮浓度升高而增加,当浓度继续增加到 20~40 mg/L时,胞内外活性氧含量都明显下降且低于对照组;不同氨氮浓度下两种酶活性也不同,当氨氮浓度为1 25~20 mg/L时,CAT活性随氨氮浓度增加而升高,当浓度增大到 40 mg/L时,CAT活性明显下降且低于对照组;当氨氮浓度为1 25~ 5 mg/L时,SOD活性随氨氮浓度增加而升高,而当浓度为10~40 mg...
关键词：
栉孔扇贝 氨氮 血淋巴 活性氧 抗氧化酶
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王晓磊 雷安民 窦忠英
为了探讨线粒体对孤雌激活胚胎发育潜能的影响,比较了异体颗粒细胞线粒体移植的牛孤雌激活胚胎、胚胎培养液移植的孤雌激活胚胎和正常孤雌激活胚胎的发育情况。结果表明,异体颗粒细胞线粒体移植组和胚胎培养液移植组的牛孤雌激活胚胎的激活率差异不显著(P>0.05),但均显著低于正常激活组(P0.05),但均明显高于胚胎培养液移植组(P<0.05);异体颗粒细胞线粒体移植组的孤雌激活胚胎桑椹胚率极显著高于胚胎培养液移植组和正常激活组(P<0.01)。可见牛异体颗粒细胞线粒体移植可改善牛孤雌激活胚的发育。
关键词：
线粒体 颗粒细胞 牛孤雌胚胎
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王水莲 薛立群 贺建华 袁安文 唐红星 向建州
附植前后哺乳动物子宫和胚胎能分泌多种妊娠相关蛋白 ,这些蛋白对妊娠的建立与维持十分重要 .为了从生化角度进一步研究胚泡附植的机理 ,从分析附植前后兔子宫和胚胎总蛋白含量着手 ,探讨了非妊娠和受孕不同时期的子宫和胚胎总蛋白含量的变化 .结果表明 ,非妊娠兔比妊娠兔子宫冲洗液总蛋白含量低 .妊娠组中 ,胚泡附植前后随着妊娠时间的延长 ,子宫冲洗液中蛋白质含量逐渐增加 ,妊娠前 4 d,增加幅度不大 ,从第 4 d到第 6 d增加幅度较大 ,从妊娠第 6 d到第 9d,蛋白质增加特别明显 .对于妊娠第 9d胚泡液 ,大胚泡 (直径 1cm左右 )中胚泡液总蛋白含量高于小胚泡 (直径 0 .5 cm左...
关键词：
兔 附植 子宫 胚胎 蛋白质
[期刊] 华北农学报
[作者]
林峰 渊锡藩 张英汉 李峰
为了开发波尔山羊胚胎移植技术 ,提高群体繁殖力 ,采用两种超数排卵方法对 67只波尔山羊进行处理 ,结果表明 :FSH法的获胚平均数、获胚率、可用胚平均数极显著高于FSH -HCG法 (p
关键词：
波尔山羊 超数排卵 胚胎移植
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