- 年份
- 2024(9856)
- 2023(14267)
- 2022(12242)
- 2021(11548)
- 2020(9692)
- 2019(22246)
- 2018(22011)
- 2017(41568)
- 2016(22952)
- 2015(25902)
- 2014(25803)
- 2013(25344)
- 2012(23349)
- 2011(21031)
- 2010(21145)
- 2009(19716)
- 2008(18125)
- 2007(15970)
- 2006(14047)
- 2005(12394)
- 学科
- 济(82632)
- 经济(82529)
- 管理(61628)
- 业(58269)
- 企(49233)
- 企业(49233)
- 方法(36703)
- 数学(31320)
- 数学方法(30932)
- 中国(28306)
- 融(27398)
- 金融(27390)
- 学(25670)
- 银(25569)
- 银行(25495)
- 行(24627)
- 财(23085)
- 农(22086)
- 制(19426)
- 业经(19043)
- 地方(18676)
- 理论(16844)
- 务(15136)
- 财务(15062)
- 财务管理(15033)
- 农业(14932)
- 企业财务(14340)
- 贸(14059)
- 贸易(14045)
- 体(13709)
- 机构
- 大学(320085)
- 学院(316992)
- 管理(118666)
- 济(117277)
- 经济(114402)
- 研究(112460)
- 理学(102255)
- 理学院(100976)
- 管理学(98932)
- 管理学院(98394)
- 中国(87017)
- 科学(74935)
- 京(69376)
- 农(63103)
- 所(58933)
- 财(54896)
- 研究所(54331)
- 业大(54199)
- 中心(51885)
- 农业(50112)
- 江(47074)
- 财经(43805)
- 北京(43786)
- 范(41599)
- 院(41014)
- 师范(40954)
- 经(39810)
- 州(38578)
- 技术(37277)
- 经济学(35169)
- 基金
- 项目(221870)
- 科学(170625)
- 基金(158170)
- 研究(156220)
- 家(141260)
- 国家(140088)
- 科学基金(117209)
- 社会(93766)
- 省(88847)
- 社会科(88559)
- 社会科学(88530)
- 基金项目(83877)
- 自然(79489)
- 自然科(77560)
- 自然科学(77534)
- 自然科学基金(76118)
- 划(75352)
- 教育(71599)
- 资助(65894)
- 编号(63429)
- 成果(52417)
- 重点(50646)
- 发(47451)
- 部(47109)
- 创(46371)
- 课题(44970)
- 计划(43547)
- 科研(43453)
- 创新(43341)
- 大学(40635)
共检索到471163条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
刘玲 连芙菲 刘长江
为考察康宁木霉3.2774(Trichoderma.koningii 3.2774)和白腐真菌5.776(Phanerochaete chrysosporium 5.776)原生质体融合子生物学特性,采用同工酶聚丙烯凝胶电泳、插片培养、拮抗试验和生长曲线的测定,对康宁木霉和白腐真菌的融合子进行鉴定,结果表明:融合子酯酶同工酶电泳有不同于亲本的新酶带出现,融合子菌落与亲本之间存在拮抗,菌丝颜色不同,菌株生长速度慢于亲本菌株,这些生理生化性状上与亲本存在明显的差异,是一株融合双亲性状的新菌株。
关键词：
康宁木霉 白腐真菌 融合子 生物学特性
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孙玉强
根据增加棉花基因库多样性的迫切需要,棉花改良计划正在转向于多种分子育种技术的应用和资源的利用。丰富的棉花野生种(Gossypiumspp.)是栽培棉遗传改良重要的种质资源和更新资源,并成为宝贵的遗传资源库,野生棉研究利用对栽培棉的遗传改良有着重大的现实和理论意义及潜在的应用
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
刘限 高增贵 庄敬华 肖淑芹 陈捷
采用正交拉丁设计对影响木霉菌原生质体制备和再生的条件进行了系统研究。结果表明:木霉菌原生质体制备受到缓冲体系、渗透压稳定剂、木霉菌菌龄、细胞壁降解酶的种类、酶解时间和再生培养基的影响,而不受木霉菌株系的影响。其中以磷酸缓冲体系和蔗糖为渗透压调节剂的降解体系为最佳,木霉菌菌龄以培养20h较好,崩溃酶对木霉菌细胞壁的降解效果好,酶解时间以4h为最佳,再生培养基以基础培养基和NaCl为渗透压调节剂为最佳。
关键词：
木霉菌 原生质体 制备条件 再生率
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
皇甫张娟 顾彪 宗兆锋
利用重寄生链霉菌F46与生防放线菌SC1和SC11进行原生质体融合,以原生质体的形成率和再生率为指标,研究了Gly、蔗糖、酶及其质量浓度对原生质体融合的影响,并确定了最佳的酶解时间及灭活时间。结果表明,3个菌株培养液中加入Gly和蔗糖的质量浓度以0．5和30 g／mL为宜。对菌株SC1和SC11,分别用10 mg／mL和15 mg／mL,溶菌酶酶解60 min和100 min较合适;对菌株F46,以蜗牛酶(10 mg／mL)和溶菌酶(10 mg／mL)体积比为1:1的混合酶液酶解75 min为宜。菌株F46在55℃条件下热灭活45 min,菌株SC1和SC11则需在55℃条件下热灭活15 mi...
关键词：
重寄生链霉菌 放线菌 原生质体融合
[期刊] 林业科学研究
[作者]
孔繁翔
从菌根真菌黑核菌（Ｃｅｎｏｃｏｃｃｕｍｇｅｏｐｈｉｌｕｍ）菌丝分离出原生质体，并获得再生菌落。研究了预处理方法及不同水解酶组合，酶解温度和菌丝密度对原生质体产率的影响。在用胰蛋白酶（２０μｇ．ｍＬ－１）预处理后，以０．８Ｍ山梨醇为渗透压稳定剂，温度为２０Ｃ，ｐＨ５．５及纤维素酶，溶解酶侧浸解酶处理，可获得较高的原生质体产量。在固体及液体再生培养基中，原生质体均可形成再生菌落，再生率为１％～５％。葡萄糖－６－磷酸脱氢酶和甘露醇脱氢酶活性测定结果表明，分离出的原生质体具有较高的生理活性。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
尹良芬
鉴于有性世代形成能高的稻瘟病菌菌株有限,稻瘟病菌间的杂交组合难于获得,从而很难对一些重要基因,如无毒基因,抗药性基因等进行遗传分析及深入研究。本研究利用原生质体融合技术获得梨孢菌的杂合子,从而评价该体系用于遗传研究的可行性。首先,利用转基因技术获得稻瘟病菌Y93-164a-1跟蟋蟀草病菌SA98-4的抗药性转化子,然后将两个菌的稳定转化子的原生质体进行融合,之后进行连续5次的继代培养,最后进行3次单孢分离来挑选稳定的融合子。结果表明,利用原生质体融合技术在两个不同致病型的梨孢菌之间能获得稳定的融合子,初步表明利用原生质体融合技术组建梨孢菌的融合子群体用于遗传分析在技术上是可行的。
关键词：
梨孢属 稻瘟病菌 原生质体融合 遗传分析
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
艾云灿 赵学慧 汪履绥
用正交试验比较了菌龄、酶种类及浓度配比、酶解温度和酶解时间４个主要因素，对黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）ＡＭＳ１１和里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）ＱＭ９４１４两菌株原生质体形成与再生的影响。结果表明，ＡＭＳ１１和ＱＭ９４１４两菌株原生质体形成与再生的４个因素的合理参数分别是：菌龄１４～１６小时和１８～２０小时；三种酶配比（纤维素酶：蜗牛酶：溶菌酶）（ｍｇ／ｍｌ）为（８：４：２）和（５：２．５：２．５）；酶解温度均为３２℃；酶解时间均为２～３小时。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈孝仁 王源超 张正光 郑小波
为了建立聚乙二醇(PEG)介导的大豆疫霉菌的遗传转化系统,对大豆疫霉菌原生质体的制备条件及再生菌株的生物学性状进行了研究。结果表明:D riselase以及D riselase和Lysing酶的混合液均能有效地裂解菌株Pmg 2-3的细胞壁并获得原生质体;其中混合酶液的裂解效果优于D riselase单一酶液,当混合酶液中两个酶的浓度均为15 mg.mL-1时,在30℃消化3 h可产生4×106mL-1的原生质体。所制备的原生质体经细胞核染料4,6-d iam id ino-2-phenyl-indole(DAPI)染色后发现,大型均一的原生质体内含有细胞核;原生质体在再生培养基上再生率达1....
关键词：
大豆疫霉菌 原生质体 再生菌株 致病性
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
赵乐辉 李颖 吕淑霞
采用不同菌龄、酶液配比、缓冲液-稳定剂系统、酶解时间等条件对木霉T21、T22原生质体制备和再生影响的试验表明,木霉T21和T22原生质体制备和再生的最适条件为:以纤维素酶:蜗牛酶:溶菌酶=5.0:2.5:2.5(g·L-1)的酶液配比,0.2mol·L-1磷酸缓冲液(phosphatebuffersolution,PBS),pH值5.8和0.6mol·L-1蔗糖组成的缓冲液稳定剂系统,将培养了20h的菌丝体在30℃下,酶解3h,最后获得原生质体数量平均约为2.7×1010个·L-1。
关键词：
木霉 原生质体 再生株 生物防治 抗药性
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
纪明山 李博强 许远 时越 谷祖敏 陈捷
绿色木霉菌TR-8是一株具有生防潜力的拮抗菌。研究发现TR-8菌株在PDA培养基、查彼培养基和基本培养基上均能较好生长,在基本培养基上生长最快,3种培养基对孢子产生影响不大。温度对菌丝生长和孢子产生影响显著,30℃时菌丝生长最快,25℃时产孢量最大。TR-8菌株在pH值2～10范围内均可生长,pH值5～6时菌丝生长最快,pH值为7时孢子产生量最大。光照处理对菌丝生长影响不明显,但可明显促进孢子产生。葡萄糖和麦芽糖为菌丝生长和产孢的最佳碳源。天冬酰胺是菌丝生长和孢子产生的最佳氮源。不同维生素对菌丝生长和孢子产生作用不同,烟酸对菌丝生长最有利。微量元素对菌丝生长有一定的促进作用,Mn有利于孢子产生...
关键词：
木霉菌 生物学特性 菌丝生长 产孢
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
谢航 陈婕 邱宏端
为选育耐高温耐盐红螺菌用于其粉状制剂研制,以降解水产养殖水体亚硝基氮功能达90%以上的耐盐红螺菌与能在60～70℃下生长的嗜热脂肪芽孢杆菌为出发菌株,通过正交试验探讨2种菌株的原生质体融合条件。分别对融合子进行温度、生长盐度和净化水质等功能测定,检出性能较优的融合子,同时采用电镜、细胞色素吸收光谱等方法,将融合子优良株与2种亲株进行比较鉴别。实验结果表明,2种菌株原生质体融合的最优条件为温度37℃,作用时间3 h,聚乙二醇(PEG)浓度为40%。在该优化条件下原生质体融合率为1.536%,筛选获得3株能在30～50℃良好生长的融合子(a、b、c)。融合子生长耐受温度较耐盐红螺菌亲株提高66%,...
[期刊] 水产学报
[作者]
何福林 肖克宇 陈光荣 钟蕾 何燕林 向建国 黄兴国
采用细胞融合技术首次将肠型点状产气单胞菌菌株和鱼害粘球菌菌株融合,构建二元融合菌株AM-1,再将AM-1与荧光假单胞菌菌株融合,构建三元融合菌株AM-2。对AM-1和AM-2菌株的形态结构、生理生化特性、致病性、抗原性、抗体效价进行分析。结果表明,AM-1活菌椭圆形,无鞭毛,死菌短杆状,AM-2菌株短杆状,有鞭毛,它们的生理生化性状介于3原始亲本菌株之间;用AM-2菌株对当年健康草鱼种进行人工感染攻毒,被攻毒草鱼种具有烂鳃病、赤皮病及肠炎病的部分症状;AM-2菌株抗原的受免草鱼种对荧光假单胞菌、鱼害粘球菌和肠型点状产气单胞菌菌株的免疫保护率分别达64.90%、68.00%、67.00%,抗体效...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
田娟 李玉祥 李惠君
采用１５ｇ／Ｌ溶壁酶处理获得了香菇单核体Ｌ３８－Ｓ０３、Ｌ５２－ａｄｅ和金针菇单核体ＦＶ１１－Ｓ２３的原生质体。１ｇ／Ｌ焦磷酸二乙酯灭活的Ｌ３８－Ｓ０３和腺嘌呤缺陷型Ｌ５２－ａｄｅ的原生质分别与８ｇ／Ｌ碘代乙酰胺灭活的ＦＶ１１－Ｓ２３的原生质体进行ＰＥＧ－Ｃａ２＋促融合，在ＲＣＭ、ＩＲＭＭ培养基上再生，得到１４２个融合子。其中１７个菌株能结实出菇。筛选出Ｆ０１、Ｆ０２和Ｆ０３３个融合子菌株，并从培养特征、显微结构、拮抗反应、同工酶谱分析和出菇特征等方面与亲本菌株Ｌ３８、Ｌ５２及ＦＶ１１进行了比较，结果显示融合子既有双亲菌株的特征，又有别于双亲菌株。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张修军 周启
报道了农抗５１０２产生菌同源菌株９０－１１、ＦＲ－００８及ＷＨ－１相互之间融合研究的前期结果。３菌株原生质体制备的适宜酶解温度和时间均为３２℃和１．０～１．５ｈ，但所需溶菌酶量则有异：９０－１１为２～４ｍｇ／ｍｌ，ＦＲ－００８为６ｍｇ／ｍｌ，ＷＨ－１为２ｍｇ／ｍｌ。将各菌株的原生质体在－２０℃下冻存１个月内的相对再生率可维持在７０％以上，２个月以内仍可达６０％以上。以５０％ＰＥＧ１０００诱导融合各组合的融合频率是，９０－１１×ＷＨ－１为１０－２，ＦＲ－００８×－９０－１１以及ＦＲ－００８×ＷＨ－１均为１０－３。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李华 游玲 刘晓晴 刘延琳
对酿酒酵母(S accharomy ces cerev isiae)与酒类酒球菌(O enos.oen i)的跨界融合子F-20-7进行抗生素筛选、降酸试验、生长试验等生产性能测试及相关基因鉴定研究。结果表明,氨苄青霉素对融合子的影响较小,融合子对L-苹果酸的降解率在54.06%~78.81%,在挑选出的融合子中仅有4株能够在YNB、模拟葡萄汁及天然葡萄汁中生长,其生长力较葡萄酒酵母差。PCR扩增结果显示,融合子质粒DNA中存在苹果酸-乳酸发酵的两个关键酶基因,即苹果酸-乳酸酶基因M leA和苹果酸-乳酸通透酶基因M leP,测序结果表明M leP基因与G enB ank中M leP基因序列的...
关键词：
酿酒酵母 酒类酒球菌 跨界融合子
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
