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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
顾欣哲 孙晔 王文雪 王振杰 屠康 潘磊庆
［目的］本文旨在开发一种新颖、快速、无损的方法模拟铜绿假单胞菌的生长。［方法］利用高光谱图像技术获取铜绿假单胞菌在营养琼脂平板上培养０、１２、２４、３６和４８ ｈ的图像和光谱参数，采用部分短波近红外波长范围的平均光谱值、高光谱图像的掩模图形和４８０～１ ０００ ｎｍ波段内光谱值的第１主成分共３种方法来模拟铜绿假单胞菌的生长。［结果］对初始浓度为１０２和１０４ＣＦＵ·ｍ Ｌ－１的假单胞菌所建立的模型训练集决定系数（Ｒ２）为０．９７０ １～０．９９３ ２，平方误差和（ＳＳＥ）为０．０００ ０３～０．０８０ ６１，验证集Ｒ２为０．８０５ ７～０．９５４ ２，ＳＳＥ为０．０００ ２８～０．１０４ ６１．．．
关键词：
高光谱图像 铜绿假单胞菌 生长模拟 区分
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
王微 李圆萍 谢惠玲 肖清铁 郑梅琴 陈燊 何小三 郑新宇 林瑞余 林文雄
为将铜绿假单胞菌应用于重金属污染环境的生物修复，以硅藻土（１～３ ｍｍ）、硅藻土（３～６ ｍｍ）、活性炭和轻石为材料，通过测定不同材料的吸水率、菌体吸附与释放作用及制备菌剂的活菌数，筛选出适宜的菌剂载体．结果表明，在设定的载体浓度下（０～２０ ｇ·Ｌ－１），不同载体的菌体去除率随浓度提高而增大，Ｑ值在４．９０％～４９．６０％之间；载体负载量随浓度提高而减小，Ｌ值在９２３．３３～８２．８３ ｍｇ·ｇ－１之间；硅藻土、活性炭的Ｑ值在３０ ｍｉｎ达到最大．硅藻土（１～３ ｍｍ）、硅藻土（３～６ｍｍ）、活性炭和轻石的吸水率依次为６０．３％、４３．３％、２３．４％和３３．１％；以上４种载体制备的菌剂（菌．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
梁利国 秦国民 张晓君 毕可然 杨家新 阎斌伦
对从患病血鹦鹉(Cichlasoma var.)肝、眼部脓肿处分离到2株细菌,对该分离菌进行人工感染实验、鉴定和药敏实验。结果显示:通过人工感染实验证明其对血鹦鹉有较强的致病性。分离菌革兰氏阴性杆状,氧化酶阳性、接触酶阳性、甲基红阴性,能够利用枸橼酸盐、丙二酸盐,发酵葡萄糖。综合分离菌的表型特征及分子生物学结果,鉴定分离菌为假单胞菌属(Pseudomonas)的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。药敏试验结果显示头孢哌酮、头孢他啶、壮观霉素、阿米卡星、阿奇霉素、氨噻酸单胺菌素和阿洛西林抑菌效果显著。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
龙苏 梁静真 韩书煜 范华龙 牛志伟 邓小红 胡大胜 黄钧
探明广西桂林市全州县禾花鲤暴发性死亡的病原菌及其药敏特性，为有效防控禾花鲤暴发性死亡现象提供依据。按常规方法进行病原菌的分离，人工感染试验确定病原菌，分别以ＡＰＩ ２０ＮＥ和１６Ｓ ｒｒＮＡ基因序列分析对病原菌进行生化鉴定和分子鉴定，Ｋ－Ｂ纸片扩散法进行药敏试验。结果表明，从患病禾花鲤中分离到１株优势菌株ＴＨ４，该菌株对禾花鲤的平均致死率为８０．００％，是引起禾花鲤暴发性死亡的病原菌；ＡＰＩ ２０ＮＥ和１６Ｓ ｒｒＮＡ鉴定结果，ＴＨ４为铜绿假单胞菌（ＰＳＥｕｄｏｍｏＮＡＳ ＡＥｒｕｇＩＮｏＳＡ），与标准株ＰＳＥｕｄｏｍｏＮＡＳ ＡＥｒｕｇＩＮｏＳＡ ＰＡ９４（Ｋｍ０１３８１５）的亲缘关系最近，．．．
关键词：
禾花鲤 铜绿假单胞菌 病原分离与鉴定
[期刊] 西南农业学报
[作者]
阎华 王会 汤尚文 于博 黄升谋 李云捷 吴进菊 李玉奇
【目的】本文分离和鉴定了湖北省汉川市同旺养殖场患病黄颡鱼的病原菌种类并分析其影响寄主抗菌肽基因表达的特点,能够为该病症预防和治疗提供研究基础。【方法】以患病黄颡鱼肝脏作为样本,使用划线培养的技术,分离得到病原菌PA-5。对病原菌进行革兰氏染色和显微镜观察,其形态为长棒状,革兰氏染色为阴性。再进行VITEK-32全自动微生物分析鉴定仪操作,该病原菌对D-葡糖酸、丙二酸和葡萄糖等反应灵敏,对黏菌素、七叶苷和阿拉伯糖等反应迟钝。采用多重PCR技术对该菌16SrRNA和gyrB基因序列分析后发现。【结果】该菌与铜绿假单胞菌的特征序列相似,亲缘关系较为接近,综合后鉴定该病原菌为铜绿假单胞菌。同时以该病原菌为样本,分析其感染黄颡鱼后,对寄主抗菌肽基因PC1/PC2/PC3的表达影响。在黄颡鱼的腹腔中注射3.0×10~(6 )cfu/mL铜绿假单胞菌PA-5,侵染完成后0～96 h分别解剖获取黄颡鱼的肝脏,肾脏以及表皮组织。然后利用Trizol试剂盒操作获取黄颡鱼总RNA,反转录合成cDNA后应用实时荧光定量PCR技术分析黄颡鱼抗菌肽基因PC1/PC2/PC3基因表达变化特点。铜绿假单胞菌PA-5侵染黄颡鱼后,寄主肝脏组织中的抗菌肽基因PC1/PC2/PC3相对表达量24,36 h较高,与对照组比较显著(P
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
于盼 金浩 潘迎捷 李柏林 宋雨泽 靳兰兰 陈兰明
旨在分析养殖鱼塘水体中铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)分离菌株的致病性、耐药性及其可能机制,为保障水产食品的安全提供科学依据。使用美国临床与实验室标准研究所的标准纸片扩散法,以及聚合酶链反应技术对PA分离菌株进行了抗菌素耐药性,以及毒性、固有和获得性耐药相关基因的检测与分析。结果显示,受试PA分离菌株的50%为exoS+/exoU-侵染型分子型,无临床分离菌株的exoS-/exoU+的细胞毒型分子型。PA菌株对6大类9种抗菌素的耐药性存在明显差异,其中甲氧胺苄嘧啶和利福平的耐药率最高为100%,其次是氨苄西林、卡那霉素和四环素,分别为90%、90%和80%,庆...
关键词：
养殖水体 铜绿假单胞菌 毒性 耐药性
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
邓英 李强 严立恒 张白玉 杨胡 付萍 孙珊珊 颜其贵
[目的]比较表型差异的林麝肺源铜绿假单胞菌ZP-1株(不产绿脓菌素)和BX-1株(产绿脓菌素)的毒力表达情况以及在小鼠急、慢性肺部感染时的致病性,为林麝化脓性肺炎的治疗与防控提供依据。[方法]比较ZP-1株和BX-1株的毒力因子表达差异,利用无创式气管插管滴注和制备琼脂糖包埋株的方法,建立ZP-1和BX-1株的小鼠急、慢性肺部感染模型,并检测小鼠急性、慢性感染肺脏残留铜绿假单胞菌数、白细胞总数和细胞因子含量,观察病理组织学变化。[结果]在体外培养条件下,ZP-1株的脓青素和胞外多糖表达量显著高于BX-1株(P0.05);BX-1株鼠李糖脂表达量显著高于ZP-1株(P
[期刊] 中国农业科学
[作者]
岳明 丁宏标 乔宇
【目的】通过构建毕赤酵母工程菌株,以期获得重组海藻酸裂解酶,并对其性质加以研究。【方法】采用PCR的方法,以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)基因组DNA为模板,克隆出约1.0kb的海藻酸裂解酶基因algL的成熟蛋白编码序列,并将其插入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPIC9K中,获得重组质粒pPIC9K-algL。重组质粒线性化后用聚乙二醇(PEG)法导入毕赤酵母菌株GS115中表达。【结果】用甲醇诱导培养基进行摇瓶发酵,表达得到40kD的目的蛋白,酶活力达540U·ml-1左右。经测定,该重组酶的最适反应pH为8.5,最适反应温度为40℃...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
谯天敏 张静 朱天辉
铜绿假单胞菌和长枝木霉均对杂交竹梢枯病菌具有明显的拮抗作用。通过室内抗生素、紫外诱变和杀菌剂胁迫培养,获得铜绿假单胞菌和长枝木霉突变菌株,此突变体在形态特征、平板抑菌活性上与原始菌株差异不显著,且具有长期稳定的抗药性。田间喷施突变菌株菌悬液或孢子悬液可以使其成功定殖到杂交竹叶表面。铜绿假单胞菌和长枝木霉的亲和性研究显示,二者浓度低于108cfum L,均无明显抑制作用,具有高度亲和性,这有利于2菌株在杂交竹梢枯病生物防治中协同作用的发挥。利用铜绿假单胞菌悬液和长枝木霉孢悬液进行梢枯病菌田间协同防治试验,结果表明:预先接种拮抗菌防效最高,其次是同时接种,后施拮抗菌防效最低,说明铜绿假单胞菌和长...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
伍茜 杨威 赵位 程建国 罗燕 王印 杨泽晓 姚学萍
[目的]对分离自林麝化脓肺脏的1株疑似铜绿假单胞菌(PA)进行鉴定,并分析其致病和耐药机制,为林麝PA感染化脓性疾病的防控奠定基础。[方法]将病原菌分离纯化后,依次进行生化试验、16S rRNA序列分析、药敏试验和小鼠致病性试验,并通过全基因组测序,对分离菌株进行群体进化和物种分型分析以及基因功能注释。[结果]分离自林麝化脓肺脏的1株疑似铜绿假单胞菌经鉴定与PA相符,命名为FMDP001。药敏试验显示其对阿莫西林、头孢曲松、氨曲南、多粘菌素B和林可霉素耐药;对小鼠半数致死量为9.4×10~5 CFU/mL。全基因组序列分析显示该菌基因组大小为6 955 100 bp,序列类型为ST1249,与B136-33株同源性最高,且两菌株基因组平均核苷酸一致性(ANI)值达98.93%;全基因组中共有357个序列编码FMDP001与致病性相关的基因,根据功能分为黏附、铁摄取、胞外毒性蛋白和调控系统;84个序列编码耐药基因,其中多药耐药外排泵为主要成分。[结论]从林麝化脓肺脏中分离到1株致病性较强的PA,并获得ST1249型林麝源PA的全基因组序列,序列显示该菌携带大量药物外排泵及生物膜形成相关基因,决定其具有多重耐药特性,哌拉西林等可作为该类型PA感染的临床用药。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
张飞燕 何敏 王振华 潘康成 冯杰 唐慧琴
对铜绿假单胞菌脂肪酶基因(Lip A)进行克隆,构建整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,并在枯草芽孢杆菌pab02中整合表达。根据铜绿假单胞菌Lip A基因设计引物,扩增Lip A基因,并进行测序,构建整合表达质粒pHSG398–16S–lip A,转化枯草芽孢杆菌pab02,并对转化后的阳性菌株进行诱导表达。结果显示,成功从铜绿假单胞菌A05菌株中扩增到长1 092 bp的Lip A基因,该基因与铜绿假单胞菌Lip A基因(登录号为AB290342)的同源性高达98%;该基因共编码311个氨
关键词：
铜绿假单胞菌 枯草芽孢杆菌 脂肪酶基因
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
常冰雪 马志 曲岩 陆兆新 吕凤霞 赵海珍 张充 别小妹
[目的]本文旨在研究耐药性细菌对其他抗生素是否会产生交叉耐药性及附属敏感性。[方法]采用二倍稀释法测定铜绿假单胞菌的药敏情况,并选择铜绿假单胞菌ATCC 27853为目标菌株进行人工诱导,研究单一抗生素耐药菌株对其他抗生素的药敏情况,同时用产生附属敏感性的抗生素进行二次诱导,观察其耐药性的变化。[结果]对ATCC 27853进行单一抗生素人工诱导试验30 d后,菌株对所诱导的药物除多肽类外均产生耐药性,对多肽类药物的最小抑菌浓度也有所增加。对耐药菌株进行药敏试验,发现耐药菌株对同类抗生素中的其他抗生素会产生交叉耐药性,同时可能会对其他类型的抗生素产生附属敏感性,但附属敏感性的规律与交叉耐药性相比并不明显。用不同类型的药物进行二次诱导,发现有7株耐药菌株对原耐药抗生素的敏感性增强,耐药性降低。[结论]铜绿假单胞菌在应用抗生素期间易产生耐药性,且同时会伴随交叉耐药性和附属敏感性的产生。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘祥
为探索铜绿假单胞菌ＥＴＡ蛋白的免疫保护功能，采用分子克隆方法获得铜绿假单胞菌ＥＴＡ表达菌株；利用切胶纯化获得ＥＴＡ蛋白并免疫小鼠，制备ＥＴＡ蛋白多克隆抗体；用ＥＬＩＳＡ方法，检测出ＥＴＡ抗血清滴度达１∶８ ０００；蛋白质印迹分析结果表明，抗血清具有很好的特异性；小鼠免疫保护试验结果表明，ＥＴＡ对铜绿假单胞菌感染的保护率达５０％，显著高于对照组的免疫保护率。用ＤＮＡｍＡＮ软件对ＥＴＡ序列同源性进行分析，发现革兰氏阴性菌的同源性高于革兰氏阳性菌，铜绿假单胞菌种间的同源性高于其他种类细菌的同源性；用ｍＥＧＡ软件对ＥＴＡ的进化分析结果表明，不同血清型铜绿假单胞菌的亲缘关系高于其他细菌，据此可推测ＥＴＡ．．．
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