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[期刊] 西南农业学报
[作者]
梁洪宇 刘成倩 高骏 周佳明 司伏生 易建中
【目的】本实验基于双分子荧光互补(Bimolecular fluorescence complementation， BiFC)技术研究依据猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白受体结合位点肽段的靶标肽与互补肽在活细胞内的相互作用关系以及定位情况，为进一步利用该多肽进行猪流行性腹泻病毒的检测积累前期基础和提供理论支撑。【方法】依据靶标蛋白的氨基酸组成、所带电荷种类、形成分子间氢键的能力、极性的强弱、疏水性能等理化特性设计出靶标肽；根据靶标蛋白的氨基酸组成，设计出在理论上与其相互作用的互补肽，并利用生物信息学工具对靶标肽与互补肽进行预测分析；将靶标肽与互补肽的核苷酸序列分别插入EcoRΙ/XhoΙ双酶切后的pBiFC-VC155与NotΙ/SalΙ双酶切后的pBiFC-VN173载体中，构建出BiFC真核表达载体，经酶切及测序验证正确后转染Vero细胞来研究靶标肽与互补肽的互作关系以及形成的BiFC复合物在细胞内的精确定位。【结果】生物信息学分析表明靶标肽和互补肽分别带有亲水性和疏水性结构域，亲水性结构域都带有正负电荷，能够产生静电引力；酶切鉴定和测序结果表明成功构建了pBiFC-VC155-靶标肽和pBiFC-VN173-互补肽真核表达质粒；细胞转染试验表明重组质粒共同转染后靶标肽和互补肽能够在Vero细胞内形成BiFC复合物，表明两者发生了相互作用；间接免疫荧光试验证实该BiFC复合物主要分布于细胞核中。【结论】研究证实了基于猪流行性腹泻病毒S蛋白受体结合位点肽段设计的多肽能够在活细胞内发生相互作用，表明该肽段用于检测的可行性。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
崔喜艳 赵吉元 胡广宇 窦瑶 刘相国 韩四平
【目的】解析玉米淀粉合成限速酶ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase-bt2)与糖酵解关键酶甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GPN1)在植物体内是否存在相互作用。【方法】首先克隆获得AGPase-bt2和GPN1基因,然后采用双分子荧光互补技术(BiFC),构建326-CYCHA-AGPase-bt2和326-CYNEE-GPN1双分子荧光表达载体,转化农杆菌EHA105,并用2种载体共同瞬时侵染烟草叶肉细胞,48h后在激光共聚焦显微镜下观察AGPase-bt2与GPN1的相互作用。【结果】AGPase-bt2基因长1 428bp,GPN1基因长1 497bp。双酶切鉴定结果表明,326-CYCHA-...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
崔喜艳 赵吉元 胡广宇 窦瑶 刘相国 韩四平
【目的】解析玉米淀粉合成限速酶ＡＤＰ－葡萄糖焦磷酸化酶（ＡＧＰＡｓｅ－ｂｔ２）与糖酵解关键酶甘油醛－３－磷酸脱氢酶（ＧＰＮ１）在植物体内是否存在相互作用。【方法】首先克隆获得ＡＧＰＡｓｅ－ｂｔ２和ＧＰＮ１基因，然后采用双分子荧光互补技术（ｂｉＦＣ），构建３２６－ＣＹＣＨＡ－ＡＧＰＡｓｅ－ｂｔ２和３２６－ＣＹＮｅｅ－ＧＰＮ１双分子荧光表达载体，转化农杆菌ｅＨＡ１０５，并用２种载体共同瞬时侵染烟草叶肉细胞，４８Ｈ后在激光共聚焦显微镜下观察ＡＧＰＡｓｅ－ｂｔ２与ＧＰＮ１的相互作用。【结果】ＡＧＰＡｓｅ－ｂｔ２基因长１ ４２８ｂＰ，ＧＰＮ１基因长１ ４９７ｂＰ。双酶切鉴定结果表明，３２６－ＣＹＣＨＡ－．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
崔喜艳 张继晓 窦瑶 孙小杰 尹悦佳 刘相国
【目的】分析玉米胚乳可溶性淀粉合成酶(SSⅠ)与质体型糖酵解途径关键催化酶丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)的蛋白互作关系,揭示可能发生互作的亚细胞位置。【方法】采用酶切连接的方法构建326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1双分子荧光互补表达载体,转化农杆菌EHA105,瞬时浸染烟草叶片组织,激光共聚焦显微镜下观察SSⅠ和PPDK1相互作用产生的荧光信号。【结果】双酶切试验鉴定表明,326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1重组载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;双分子荧光互补试验中,可观测到SSⅠ和PP-DK1相互结合而产生...
[期刊] 华北农学报
[作者]
白薇 孙海莲 Mawsheng Chern Randy Ruan Pam Ronald 樊明寿
NPR1(Non-expresser of pathogenesis related genes 1)是水杨酸(Salicilic acid,SA)介导的系统获得抗性(Sys-temic aquired resistance,SAR)的关键调控因子,在水稻中过量表达拟南芥NPR1和水稻NH1/OsNPR1(NPR1 homo-logue 1)(NPR1的同源物)可增强抗病性。水稻基因组中还有4个NPR1旁系同源物(Paralog),为NH1的家族蛋白。本试验利用双分子荧光互补技术(Bimolecular Fluorescence Complementation,BiFC,or split YF...
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
沈跃 夏伟 刘慧 李宁
树木尺寸、形状等特征信息的获取,是现代化农业中重要的环节,为农林管理中的变量精密喷雾提供依据。为了实现对树木靶标信息的精确测量,搭建了基于UTM-30LX型激光传感器的室内滑台靶标检测系统,实现对规则物体、仿真树的扫描检测,通过编写的C++程序,实时读取数据信息并存储于控制计算机中。利用MATLAB软件对存储的数据信息进行后期的离线分析,重构物体三维图像,通过最大相对误差、轮廓相似度两个参数,分析激光传感器检测得到靶标目标尺寸、重构目标三维图像的精确度。以长方体柜子、圆柱体泡沫、2棵仿真树为试验对象,按照
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
沈跃 夏伟 刘慧 李宁
树木尺寸、形状等特征信息的获取,是现代化农业中重要的环节,为农林管理中的变量精密喷雾提供依据。为了实现对树木靶标信息的精确测量,搭建了基于UTM-30LX型激光传感器的室内滑台靶标检测系统,实现对规则物体、仿真树的扫描检测,通过编写的C++程序,实时读取数据信息并存储于控制计算机中。利用MATLAB软件对存储的数据信息进行后期的离线分析,重构物体三维图像,通过最大相对误差、轮廓相似度两个参数,分析激光传感器检测得到靶标目标尺寸、重构目标三维图像的精确度。以长方体柜子、圆柱体泡沫、2棵仿真树为试验对象,按照选取的3个检测距离和4个检测速度分别对4个试验对象进行检测与数据分析。试验结果显示,多次试验下,与人工测量尺寸比较而言,激光传感器测得的长方体柜子长度、宽度和高度尺寸最大相对误差分别为6.76%、6.86%和3.92%,圆柱体泡沫的高度、直径尺寸最大相对误差分别为4.25%和7.33%,仿真树1高度、宽度尺寸最大相对误差分别为4.06%和5.91%,仿真树2高度、宽度尺寸最大相对误差分别为3.24%和4.00%;仿真树1、2的激光扫描重构图像与对应实物轮廓相似度最小值分别为0.928 8和0.932 6。研究表明,UTM-30LX型激光传感器在各种试验条件下对多种试验靶标特征检测均具有较好的精确性和准确性,可以担负变量喷雾检测的任务,具有应用到农业生产中的前景。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
魏新元
对内含肽与内含子之间的差异进行了比较,概述了内含肽的种类和自我剪接机制,着重阐述了内含肽在当前各生物技术领域中的应用,分析了其优点和局限性,最后对内含肽的应用方向进行了展望。
关键词：
内含肽 内含子 自我剪接 生物技术
[期刊] 林业科学
[作者]
刘军侠 高宝嘉 张芳 姜文虎
通过在转基因741杨林中,对靶标害虫舞毒蛾实验种群生命表的比较研究,证明转基因741杨林中舞毒蛾世代存活率与对照相比显著降低,种群趋势指数降低了82%～92%,表明转基因杨可以减少靶标害虫的自然种群数量。经存活曲线分析得知舞毒蛾种群的个体死亡主要发生在幼龄幼虫期,特别是对1,2龄幼虫的致死能力更为明显。经过对转基因741杨林中舞毒蛾各死亡因子的致死力比较分析可知:由毒蛋白直接引起的食物和环境共同作用、病菌致死以及间接引起的化蛹死亡率升高的最为明显,转基因741杨林中舞毒蛾各龄期幼虫寄生性天敌的寄生率较之未转基因林下降。
关键词：
转基因741 舞毒蛾 种群生命表
[期刊] 中国农业科学
[作者]
程罗根 于光 李忠英
【目的】研究抗杀虫双、杀螟丹和溴氰菊酯品系的神经乙酰胆碱受体及与它们对沙蚕毒素类药物的抗性间的关系。【方法】测定不同品系小菜蛾的神经乙酰胆碱受体与125I标记的α-银环蛇毒素的结合率。【结果】抗杀虫双、杀螟丹品系小菜蛾的神经乙酰胆碱受体对沙蚕毒素药物有显著的靶标不敏感性,它们与配体的结合率大约分别是敏感品系的66%和60%,在溴氰菊酯抗性品系中没有明显变化。【结论】神经乙酰胆碱受体对杀虫剂敏感性下降可能是小菜蛾对沙蚕毒素药物产生抗性的一种作用机理。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李伟 郭建夫 袁红旭 李玥仁 刘月廉 黄永相 蒋世河
【目的】评价抗真菌转基因水稻对靶标真菌病害的抗性和稻田非靶标病虫害发生的影响。【方法】以过表达水稻酸性几丁质酶基因(RAC22)和水稻碱性几丁质酶基因(RCH10)及转化苜蓿β-1,3-葡聚糖酶基因(β-Glu)和大麦核糖体失活蛋白基因(B-RIP)的四价抗真菌转基因水稻品系E122-1和E127-1以及对照非转基因亲本E32为材料,通过温室接种和田间调查开展E122-1和E127-1对稻瘟病、稻曲病和胡麻叶斑病等靶标真菌病害的抗性和对白叶枯病、细菌性条斑病、三化螟和稻纵卷叶螟等非靶标病虫害的影响。【结果】E122-1和E127-1对稻瘟病菌株的抗性比对照明显提高,同时,E122-1和E127...
[期刊] 草业科学
[作者]
魏佳 魏臻武 张有鑫 颜梦雨 闵学阳
随着社会发展水平的提升，食物来源日益多元化，人们对优质蛋白质食物消费量的不断增加，促使植物蛋白资源的开发和提取技术的兴起。植物蛋白有动物蛋白无可比拟的优势，通过对叶蛋白深加工制备的蛋白肽，可以进一步提升植物蛋白的营养价值。因此，植物叶蛋白的提取及精深加工备受关注，关于植物叶蛋白提取的方法更是多种多样，最佳提取工艺参数也有深究，可谓前人之述备矣。本文在前人研究的基础上对不同的叶蛋白经典提取方法及精深加工生产蛋白肽的方法进行整理综述，从主要的叶蛋白提取环节着手，回顾了各提取方法的原理知识、操作注意事项并进行优缺点评价，以期为后续植物叶蛋白提取研究及蛋白肽的制备提供理论依据及指导意见。
关键词：
叶蛋白 提取工艺 蛋白肽 营养价值
[期刊] 情报学报
[作者]
张金柱 施佳璐 章成志
专利技术互补性作为各类组织进行技术创新的重要参考，近年来受到国内外学者的广泛关注。本文回顾了技术互补性概念的发展沿革，从产业/行业分类、专利分类、专利引用关系以及专利内容特征关联四个角度归纳其测度方法，最后综述专利技术互补性的多种应用。基于此，总结形成专利技术互补性的概念内涵，发现相关研究主要利用专利分类或专利引用网络来形成技术互补测度指标和方法，并主要应用于创新绩效因素判定、企业并购决策制定以及潜在合作伙伴发现等。未来，建议继续细化和具体化技术互补性概念，综合利用专利文本、图表、市场信息等多模异构数据，设计细粒度定量测度指标，引入深度学习等方法，提升专利技术互补测度的准确性，进一步拓宽专利技术互补性的应用范围，提升应用效果。
关键词：
专利技术 互补性 概念 测度 应用
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
林染荀 曾菀林 刘梦昕 王森 史嘉鹏 许海波 范治彪 汪世华 王宇
介绍了在生物体内特别是在病原真菌中，参与介导N-肉豆蔻酰化进程中的关键蛋白，即N-肉豆蔻酰基转移酶的作用。同时阐述了N-肉豆蔻酰基转移酶可作为具有广泛应用前景的抗真菌新型靶标的原因。此外，还总结了N-肉豆蔻酰基转移酶的催化作用机理，以及抑制该酶活性的小分子化合物的结构基础，并展望了基于该酶结构开发抗真菌药物的研究前景。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
周晓鸿 田芳 杜丽璞 王轲 林志珊 叶兴国
植物与微生物在长期的侵染和抗侵染过程中逐渐形成了复杂的互作关系,二者相互利用、协同进化。一些病原微生物致病能力的变化或增强迫使植物提高抗病性,同时改进了植物的农艺性状、产量性状和品质性状。植物与微生物互作关系的分子生物学研究促进了植物基因工程育种途径的创立和生产潜力的提高,尤其微生物介导的基因转移已成为改良植物的重要工具。本文概括性综述了植物与一些主要有益微生物互作的应答反应、信号传导和分子基础,以及利用有益微生物对改良植物性状和生产水平的研究进展。描述了植物对主要有益微生物的应答途径,以及植物和农杆菌、根瘤菌、真菌及植物病毒互作的分子信号系统,并介绍了它们在基因工程、遗传育种和生产实践中的应...
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