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[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 程方圆  陶紫玉  李晨虹  
为了快速区分长江流域各水体中的鲚属鱼类,利用单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)标记对短颌鲚(Coilia brachygnathus)、湖鲚(C. nasus taihuensis)和刀鲚(C. nasus)进行物种鉴定。从120个在短颌鲚和刀鲚之间分化指数(Fst)为1的SNP位点中随机挑选出20个用于引物设计,从21个在湖鲚和刀鲚之间分化指数较高的SNP位点中随机挑选出10个设计引物。随机挑20尾短颌鲚、20尾湖鲚和12尾刀鲚用设计的引物扩增、测序。结果表明:洞庭湖和鄱阳湖的短颌鲚与刀鲚可以使用以上19个SNP分子标记中的任何一个完全分开,剩下1个SNP标记在所扩增的样本中没有发现多样性变异而被弃用。用于区分湖鲚与刀鲚的10个SNP分子标记中有8个在所测样本中可以扩增并用于物种鉴定。其中单独使用Ct-Cn_wtap位点时,湖鲚和刀鲚的基因频率相差最大,当使用Ct-Cn_wtap和Ct-Cn_eif2b4位点时,对湖鲚和刀鲚的鉴别准确率可以达到100%。本研究提供了稳定、高效和低成本识别短颌鲚和刀鲚、湖鲚和刀鲚的方法,为今后鲚属鱼类的物种鉴定和资源保护提供了有效的工具。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 王倩  程方圆  李晨虹  
单核苷酸多态性(SNP)分子标记结合二代测序技术是研究群体遗传学强有力的工具,同时也是界定物种的最佳方法之一。与以往获取SNPs数据的常用方法相比,靶基因富集的方法可以用来富集不同物种的同源片段,甚至可以用于部分降解的DNA。本研究应用一套通用的脊椎动物单拷贝核基因标记,通过基因富集和Illumina测序获取鲱形目鲚属数千个SNPs位点。样本取自靠近长江入海口的沿海地区、长江干流和洞庭湖。用STRUCTURE和Bayes factor delimitation(*with genomic data,BFD
[期刊] 华北农学报  [作者] 籍贵苏  吕芃  杜瑞恒  刘国庆  侯升林  马雪  李素英  王金萍  赵秀萍  
高粱在粮食安全、人类健康和生物能源的开发上具有非常重要的作用,其被认为是二倍体模式化作物和多倍体能源作物甘蔗和芒草类的参考植物,开发高粱多态性分子标记对促进分子遗传学发展及高粱分子标记辅助育种意义重大。以甜高粱与粒用高粱杂交的F2遗传群体作为研究材料,对其全基因组DNA进行酶切,然后用高通量测序法开发SLAF(Specific-locus amplified fragment sequencing)标签,并经过分析筛选多态性SNP标记。试验过程中测序的reads数达到43 528 021个,母本2 598 472个,父本3 134 524个,子代的reads数为205 083~454 258个,平均为290 732.5个。通过原始数据的评估、聚类和纠错开发的SLAF标签数,父母本分别为44 895,42 100个。测序深度分别为19.78和16.22,F2群体每个个体的SLAF标签为26 737~39 291个,平均为33 445.06个,测序深度2.24~3.72,平均为2.79。通过对聚类群中高深度片段的潜在基因型分析,得到了6 353个多态性SNP标记,其中5 829个标记成功分型,占多态性SNP标记的91.75%,剔除不适宜作图的标记,剩余有效的SNP标记2 246个,占有效标记百分比100%,F2个体的各样品完整度平均为94.99%。所以,对基因组DNA进行酶切和高通量测序,从庞大的reads中获得SLAF标签是得到全基因组SNP标记的有效途径。为高粱高密度图谱构建和QTL定位研究,以及分子标记辅助育种奠定了基础。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 刘福平  白俊杰  
单核苷酸多态性(SNPs)是广泛存在于基因组中的一类由单个碱基转换或颠换引起的DNA序列多态性。它是继限制性片段长度多态性(RFLP)、微卫星标记(SSR)之后的新一代分子标记,已广泛应用于构建遗传连锁图谱、QTL定位、关联分析及研究群体遗传结构与亲缘关系等方面。本文主要介绍了SNPs的概念、特点及检测SNPs的主要方法,综述了SNPs在水产动物遗传育种中的研究进展,以期将SNPs更广泛地应用于水产动物群体遗传、分子标记辅助育种和生物进化等研究领域。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 李哲  李雨  敬庭森  刘小莉  闫卉果  陆安帅  周剑  罗辉  叶华  
为开发长吻(Leiocassis longirostris)生长性状相关的分子标记,为其分子辅助育种提供基础资料,以115尾长吻为研究对象,运用57个单核苷酸多态性标记(SNPs)位点与体重、全长、体长和头高进行关联分析。结果显示,有10个SNPs位点与生长性状显著相关,其中3个SNPs位点(Cluster-65_137265、Cluster-65_111833和Cluster-65_137642)对所测量的4个生长性状均有显著影响(P<0.05);3个SNPs位点(Cluster-65_120392、Cluster-65_5592_0和Cluster-65_105077)对体重、全长和体长有显著影响(P<0.05);Cluster-65_110382对全长、体长和头高有显著影响(P<0.05);Cluster-65_19497和Cluster-24304_1对全长和体长有显著影响(P<0.05);Cluster-65_130153对体长和头高有显著影响(P
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 李辰钰   李乐康   高小平   孔赤平   许群   张宝   鲍宝龙   龚小玲  
为了探究鄱阳湖刀鲚(Coilia nasus)和短颌鲚(Coilia brachygnathus)的来源地,采集了长江干流、鄱阳湖、长江口和嵊泗海域,不同月份样本,运用16s rRNA高通量测序法,比较分析了它们肠道微生物差异,结果显示,(1)刀鲚不同群体之间,3月份彭泽段样本的肠道菌群丰富度显著高于鄱阳湖、青草沙和嵊泗的;PCoA 分析结果显示,4月份鄱阳湖刀鲚(PC-4)有一组样本以及青草沙的样本菌群组成与嵊泗(SC-3)的相似度高,提示它们可能是从嵊泗洄游而来。(2)在短颌鲚不同采样群体之间,不同水域短颌鲚肠道菌群差异较大,同一水域不同月份之间的差异较小,而5月份鄱阳湖短颌鲚的肠道菌群和其余月份显著不同,提示其可能从不同地方洄游而来。(3)鄱阳湖短颌鲚肠道菌群平均丰富度和多样性均高于鄱阳湖刀鲚的。以上肠道微生物组成分析表明,鄱阳湖的刀鲚和短颌鲚群体肠道菌群的分析结果看,它们可能都存在洄游群体。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 李亚培   孔赤平   许群   张宝   高小平   鲍宝龙   李乐康   龚小玲  
鱼类的肌间骨与其运动有着密切的联系,鱼类运动能力越强,肌间骨数目可能越多,肌肉脂肪含量可能相对高些。为了探究鄱阳湖短颌鲚是否存在江、湖及湖、湖等洄游的生态类群,在不同月份采集了鄱阳湖不同采样点如千眼桥等地的短颌鲚样本。此外为了探究洄游对刀鲚肌间刺形成的影响,采集了舟山嵊泗、长江口青草沙水库、鄱阳湖刀鲚样本,采用解剖法和常规测量法比较了它们髓弓小骨和脉弓小骨形态、数目和肌肉蛋白与脂肪含量。结果表明:(1)3月份鄱阳湖瓢头地区短颌鲚的肌间骨数目最少,为(100.67±6.34)根;6月份千眼桥的肌间骨数目最多,为(127.67±6.18)根;(2)鄱阳湖刀鲚肌间骨数为(129.60±0.98)根,极显著高于短颌鲚(110.60±2.97)根;(3)同为刀鲚,鄱阳湖的肌间骨数目极显著高于青草沙的(113.67±3.29)根,但低于嵊泗的(147.67±3.09)根;(4)鄱阳湖刀鲚肌肉的蛋白质含量低于短颌鲚,脂肪含量高于短颌鲚,鱼类肌肉中的蛋白质含量较高的鱼类肌间骨的数量会较少,提示刀鲚需要更多的鱼体摆动以完成长距离洄游需要,刺激更多肌间刺的形成。以上这些结果对于理解鄱阳湖刀鲚和短颌鲚洄游群体的来源差异有重要启示,为下一步对鄱阳湖洄游群体生物学研究奠定基础。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 廖晓兰  朱水芳  罗宽  
基因突变和单核苷酸多态性分析是确定生物性状与某种遗传变异的关系、探讨生物物种内基因的差异、了解生物种间亲缘和进化的关键技术 ,对生物群体遗传学、生物分类学研究都有着重要的理论意义和实用价值 .对近2 0年来基因突变和单核苷酸多态性检测技术及应用的研究进展进行了全面概述 ,特别对 2 0世纪 90年代发展起来的几种最新技术进行了详细介绍 ,并展望了这些技术在农业上的应用前景 .
[期刊] 水产学报  [作者] 于凌云  白俊杰  叶星  李胜杰  李小慧  
采用PCR技术和基因组步移技术从大口黑鲈基因组DNA中扩增得到MyoD基因及其5′调控区序列。该基因序列全长3 797bp,其中5′调控区长1 077bp,MyoD基因转录区由3个外显子(分别为591、81和78bp)和2个内含子(分别为1 077和486bp)组成。5′调控区含有与肌肉特异性基因转录密切相关的转录调控元件E box、肌细胞增强因子2(MEF2)、肌肉特异性金属硫蛋白结合位点(MTBF)及一些转录反应调控元件(TATA box、OCAAT box、OCT1、PRE、AP4、Pit1)。运用PCR-SSCP技术和直接测序法进行大口黑鲈MyoD基因SNP位点筛选,结果表明MyoD基...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 付苏宏  雷鸣  张勇群  施静  郝豆豆  
【目的】挖掘菊叶香藜转录组数据中的SNP信息,对具有SNP位点的unigene(SNP-unigene)进行功能注释分析,为菊叶香藜SNP分子标记的开发提供理论依据。【方法】利用Samtools和VarScan v.2.2.7软件寻找候选的SNP位点,并对SNP-unigene进行GO注释、COG注释和KEGG注释。【结果】在菊叶香藜花和叶转录组中,分别鉴定出了889个和673个SNP位点,转换分别占63.0%和62.7%,颠换分别占37.0%和37.3%,转换和颠换的比值分别为1.70和1.68,非编码区分别占21.15%和21.10%,编码区分别占67.27%和67.46%。菊叶香藜所有SNP位点分布于643条SNP-unigene上,功能注释结果显示,总共有343条SNP-unigene具有GO注释,370条SNP-unigene具有COG注释,232条SNP-unigene具有KEGG注释,这些SNP-unigene涉及较多的功能主要与代谢、核糖体、次生代谢产物的生物合成相关。【结论】本研究通过大规模地筛选菊叶香藜中的候选SNP位点,可以为研究菊叶香藜基因分型、构建遗传图谱等方面奠定基础,对于开发利用菊叶香藜植物资源具有重要的价值。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 陈吉宝  景蕊莲  员海燕  卫波  昌小平  
TaDREB1是一种转录因子,调控抗旱等抗逆相关基因的表达。以抗旱性不同的20份六倍体小麦和3份小麦的二倍体近缘种为材料,用直接测序法筛查TaDREB1基因DNA序列的单核苷酸多态性,在23份材料的38038bp序列中发现了271个SNP和14个InDel,平均140bp中有1个SNP,2717bp中有1个InDel。核苷酸多样性(Л)分析表明,小麦二倍体近缘种的Л值(0.02188)明显大于六倍体小麦的Л值(0.01029),说明该基因在二倍体种中的变异程度大于六倍体小麦,可能原因是六倍体小麦长期承受强大的人工选择压力。单倍型分析揭示了TaDREB1基因单核苷酸多态性与抗旱性表型的相关性,但...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 何桂娟  罗婷颖  黄守婷  王景伟  林秋娟  肖天放  
利用PCR-SSCP技术,分析莆田黑猪心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的多态性.结果表明:在H-FABP基因5'-调控区检测到两个多态性位点(G7T和C11A),由两个等位基因控制,定义为A和B,基因频率分别为0.740和0.260;在外显子2处存在3个多态性位点(A2C、T62C和T65C),由两个等位基因控制,定义为C和D,基因频率分别为0.164和0.836.群体遗传分析表明,H-FABP基因5'-调控区属中度多态(0.25
[期刊] 中国农业科学  [作者] 朱彩梅  张京  
【目的】大麦Wx是控制直连淀粉合成相关的糯性基因,研究大麦糯性相关基因Wx单核苷酸多态性,并分析其与籽粒直链淀粉含量的关系。【方法】以2个国外糯大麦品种为对照,对30份高、中、低直链淀粉含量的中国大麦进行Wx的克隆和测序,分析Wx的单核苷酸多态性(SNP)及其与籽粒直链淀粉含量之间的关系。【结果】在对32个大麦品种的核苷酸序列多态性鉴定中,共检测到了169个多态性位点,平均每26bp检测到一个多态性位点。在所有检测到的多态性位点中,包括143个SNP和26个InDel,二者的频率分别为1/310和1/169。Wx的内含子1、3、5、8区,外显子2、5和5′-UTR及3′-UTR区域为变异富集区...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 刘声传  鄢东海  周雪  莫雪  胡依然  魏杰  周富裕  周玉锋  
为了发掘利用茶树茶树富硒关键酶硒代半胱氨酸甲基转移酶(SelenocySteine methyltranSferaSe,Smt)基因cSSmt,通过race克隆该基因的cDna全长,并通过水培试验,分析该基因在井43幼苗根叶的表达特征。结果表明:通过该基因cDna的全长克隆,获得5个茶树品种cSSmt的开放阅读框(orf)全长;对茶树5个品种的orf核苷酸多态性鉴定共检测到19个多态性位点,包括17个SnPS和2个inDelS,平均每55 bP检测到1个多态性位点,这些多态位点引起9个氨基酸位点变化;5个茶树品种Smt的氨基酸序列一致性为99.15%,出现一定的遗传分化。na_2Seo_3水培...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 王旭歌  何勇凤  李昊成  颜文斌  杨德国  
2014年采集自湖北长湖的479尾短颌鲚(Coilia braChygnathus)样本,研究了长湖种群的年龄结构和生长特性。短颌鲚的耳石和鳞片均可用于鉴定短颌鲚年龄,且两者鉴定年龄的吻合度达到75.8%。长湖短颌鲚种群的年龄组成为1~4龄,其中1~3龄鱼为主,占总样本量的96.0%。短颌鲚属匀速生长型,其体重和体长的关系为:W=6.290×10-6l2.855(n=479,r2=0.959,P
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