２０１３年广西百色市田林县利周乡油茶苗圃岑软２３号油茶苗出现严重的叶枯病。对叶枯病的病原菌采用组织分离培养、致病性测定、形态特征观察及核糖体内转录间隔区（ｒ ＤＮＡ－ＩＴＳ）基因序列测定。结果表明：引起岑软２３号油茶苗叶枯病的病原菌为茶拟盘多毛孢ＰｅＳＴＡｌｏＴＩｏＰＳＩＳ ＴｈｅＡｅ（ＳＡｗＡＤＡ）ＳＴｅｙＡｅｒＴ。这是广西对油茶叶枯病的首次报道。

【目的】鉴定广西香花油茶炭疽病病原菌，掌握其生物学特性，为抗病油茶品种选育提供参考依据。【方法】采集广西南宁市、来宾市和崇左市香花油茶林地典型炭疽病样品，以组织分离法和柯赫氏法获得致病菌株，依据病原菌形态特征描述和病原菌核糖体内转录间隔区(ITS)、肌动蛋白(ACT)、几丁质合成酶(CHS1)和3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPDH)多基因分子系统学分析结果进行鉴定，并采用平板法测定病原菌的生物学特性。【结果】从广西南宁市、来宾市和崇左市3个地区香花油茶林地采集典型炭疽病样品中分离获得的76株炭疽菌属真菌，对健康香花油茶叶片均具有致病性，但致病力略有差异；代表菌株CXNN02、CXLB08和CXCZ09的离体接种病斑平均直径分别为6.48、6.39和5.20 mm，活体接种病斑比前者略小，分别为5.53、5.33和 4.97 mm，以CXNN02菌株的致病力略强。菌株CXNN02在PDA培养基上菌落呈圆形，菌丝灰色至深灰色，气生菌丝茂盛，绒毛状，背面产生黑色色素；菌丝生长较快，平均生长速率为11.75 mm/d；分生孢子光滑，无色，单胞，圆柱状，顶端钝圆或略尖，大小为（13.30～20.67）μm×（3.39～7.48）μm；分生孢子附着胞浅褐色至褐色，单个或多个，圆形或近圆形，边缘完整，大小为（6.50～10.69 ）μm×（5.17～9.50）μm。对菌株CXNN02、CXLB08和CXCZ09进行形态学结合病原菌多位点基因系统发育进化树分析，确定核果炭疽菌（Colletotrichum fructicola）是广西香花油茶炭疽病病原菌。生物学特性测定结果显示，香花油茶炭疽病病原菌菌丝生长和产孢的最佳温度均为28 ℃，最适菌丝生长pH为4～5，最适产孢pH为6，菌丝生长的较佳碳源为D-麦芽糖、D-葡萄糖、D-果糖和D-木糖，最佳产孢碳源为乳糖，较佳氮源为牛肉膏、蛋白胨和酵母粉3种有机氮源，最佳产孢氮源为酵母粉；完全黑暗有利于香花油茶炭疽病病原菌菌丝生长和产孢。【结论】广西香花油茶炭疽病病原菌为核果炭疽菌，其菌丝生长和产孢受温度、pH、碳氮源和光照条件影响明显。香花油茶是核果炭疽菌的新寄主，进行香花油茶抗病品种选育及制定炭疽病防治措施时需充分了解该菌的生物学特性。

在广西南宁桂花树上严重发生一种叶枯病,从病叶上分离到桂花叶枯病菌(编号CHS),在致病性测定的基础上,根据病原菌株CHS的形态及ITS序列,将其鉴定为Alternaria alternata(Fr.)Keissler。对该菌的生物学特性研究结果表明:菌丝生长、孢子形成和孢子萌发的最适温度均为28℃;生长发育最适pH值为6~7;不同光环境对该菌菌丝生长发育影响不大,黑光环境最利于孢子萌发;在供试的培养基中PDA最适合菌丝生长和产孢;苯醚甲环唑、咪鲜胺和丙环唑对该菌的抑制作用最强。由A.alternata引起的桂花叶枯病在广西的发生属首次报道。

在江西蓝莓产区的病害调查过程中，发现一种由镰孢菌侵染的叶部新病害，主要引起叶片枯萎，进行病原菌的分类鉴定将为病原学及该病害综合防控提供前期基础。病原菌的分离采用二步分离法，组织分离之后采取单孢分离。致病菌的确定依据柯赫氏法则。病原菌的鉴定方法依靠表型特征鉴定，同时辅助ＩＴＳ和ＴＥＦ－１α序列进行分子鉴定。引致江西地区蓝莓叶枯病的致病菌为ＪＸ０３ＡＡ，经表型鉴定与分子鉴定表明该病菌为亚细亚镰孢菌（ＦｕＳＡｒＩｕｍ ＡＳＩＡＴＩｃｕｍ）。江西地区发生的蓝莓叶枯病由亚细亚镰孢菌侵染所致，蓝莓是亚细亚镰孢菌的新记录寄主。

从发病严重田块采集蘘荷叶枯病病叶，采用组织分离法进行病原菌分离、纯化，获得代表性致病菌株RH–1，对RH–1进行鉴定，并测定其生物学特性。结合病原菌形态学特征和分子生物学鉴定，构建真菌内转录间隔区(ITS)、β–微管蛋白基因(β–Tubulin)和TEF–1α系统发育树，鉴定该菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。分别在温度(5、10、15、20、25、30、35℃)、pH(4、5、6、7、8、9、10)和光照时间(连续光照、连续黑暗、12h光照/12 h黑暗、24 h光照/24 h黑暗)条件下用PDA培养基培养RH–1，结果在30℃、pH 9和连续光照下菌丝生长较快。分别用葡萄糖、α–乳糖和麦芽糖以及酵母膏、牛肉膏、(NH4)_2SO_4、NH_4Cl、蛋白胨和NH_2CH_2COOH等量替代Czapek基础培养基中的碳源和氮源，发现菌丝生长的较适碳源为葡萄糖或麦芽糖，最适氮源为牛肉膏或蛋白胨。将RH–1分别接种于红蘘荷和绿蘘荷，发现绿蘘荷的抗病性强于红蘘荷的。

【目的】明确造成南宁植物园青秀山苏铁园内苏铁叶片干枯的病因，研究防治手段，为有效保护苏铁种质资源提供理论基础。【方法】采集不同发病苏铁植株上的枯萎叶片样本113个，使用平板培养及稀释分离法将病原真菌进行分离纯化，通过柯赫氏法则测定分离菌株致病力，依据形态学及分子生物学鉴定等手段对所获得分离株进行物种鉴定，选取代森锰锌、啶氧菌酯、苯甲·丙环唑、苯甲·嘧菌酯、氟菌·肟菌酯、氯氟醚·吡唑酯和百菌清等7种杀菌剂对病原菌进行室内药效试验。【结果】通过对枯萎组织的微生物分离纯化，共获得72株分离菌株，经ITS序列分析发现分别来自炭疽菌属、镰刀菌属、链格孢菌属、拟盘多毛孢属、叶点霉属、黑孢霉属、枝孢菌属、球毛壳菌属、炭团菌属、炭角菌属、葡萄座腔菌属、曲霉属及小新壳梭孢属等13个不同属。对其中的真菌进行致病力测定发现，镰刀菌属的GX2210菌株经针刺接种到苏铁羽片会产生枯萎病斑；进一步采用CaM、bTUB、RPB2和TEF1a基因序列分析，确定该菌株为变红镰孢菌（Fusarium incarnatum）；药效试验显示，代森锰锌是抑制该菌株的最有效药物，抑制中量（ID_(50)）为0.3577 mg/L。【结论】造成南宁植物园苏铁叶枯病的病原菌为变红镰孢菌。代森锰锌对变红镰孢菌具有较好的抑制作用，可考虑用于苏铁叶枯病防治。

近年来，福建省厦门市园林植物园内的酒瓶椰子频发叶枯病，影响了植株的正常生长，降低了酒瓶椰子的观赏价值。从厦门市园林植物园收集了12份感病的酒瓶椰子叶片样品，通过分离和纯化，得到5个类拟盘多毛孢属真菌菌株。结合其形态特征和基于3个基因（ITS、TUB2和TEF1）的系统发育分析结果，这5个菌株被鉴定为Neopestalotiopsis cubana、Pestalotiopsis diploclisiae、P. humicola、P. neolitseae和Pseudopestalotiopsis theae。柯赫氏法则验证结果显示，N. cubana、P. diploclisiae、P. humicola和Ps. theae可以引起酒瓶椰子的叶片发病，而P. neolitseae不能侵染酒瓶椰子的叶片，表明N. cubana、P. diploclisiae、P. humicola和Ps. theae是引起酒瓶椰子叶枯病的病原菌。这是新拟盘多毛孢属真菌和假拟盘多毛孢属真菌在酒瓶椰子上的首次报道。其中，N. cubana为我国首次发现。

从发病严重田块采集蘘荷叶枯病病叶，采用组织分离法进行病原菌分离、纯化，获得代表性致病菌株RH–1，对RH–1进行鉴定，并测定其生物学特性。结合病原菌形态学特征和分子生物学鉴定，构建真菌内转录间隔区(ITS)、β–微管蛋白基因(β–Tubulin)和TEF–1α系统发育树，鉴定该菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。分别在温度(5、10、15、20、25、30、35℃)、pH(4、5、6、7、8、9、10)和光照时间(连续光照、连续黑暗、12h光照/12 h黑暗、24 h光照/24 h黑暗)条件下用PDA培养基培养RH–1，结果在30℃、pH 9和连续光照下菌丝生长较快。分别用葡萄糖、α–乳糖和麦芽糖以及酵母膏、牛肉膏、(NH4)_2SO_4、NH_4Cl、蛋白胨和NH_2CH_2COOH等量替代Czapek基础培养基中的碳源和氮源，发现菌丝生长的较适碳源为葡萄糖或麦芽糖，最适氮源为牛肉膏或蛋白胨。将RH–1分别接种于红蘘荷和绿蘘荷，发现绿蘘荷的抗病性强于红蘘荷的。

2013年夏季山东地区某刺参育苗场处于保苗期的刺参苗种暴发腐皮综合征疾病,表现为附着力下降、棘刺顶端溃烂、排脏、表皮溃疡和自溶等症状。自患病个体病灶组织分离优势细菌,并利用形态学观察、生理生化测定、回接感染、16S r DNA基因序列分析等方法完成致病原的鉴定。此外,通过对发病前后养殖系统中优势菌丰度的变化,追踪确定了所分离病原菌的致病阈值。结果显示,从患病参苗体表病灶处分离的一株优势菌HP130917A-1,经回接感染证实,该菌株具有较强的致病力,其对刺参苗种的半致死浓度为1.2×106 CFU/ml。生理生化结合分子鉴定表明,该菌株为溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)。此...

２０１３年夏季山东地区某刺参育苗场处于保苗期的刺参苗种暴发腐皮综合征疾病，表现为附着力下降、棘刺顶端溃烂、排脏、表皮溃疡和自溶等症状。自患病个体病灶组织分离优势细菌，并利用形态学观察、生理生化测定、回接感染、１６Ｓ ｒＤＮＡ基因序列分析等方法完成致病原的鉴定。此外，通过对发病前后养殖系统中优势菌丰度的变化，追踪确定了所分离病原菌的致病阈值。结果显示，从患病参苗体表病灶处分离的一株优势菌ＨＰ１３０９１７Ａ－１，经回接感染证实，该菌株具有较强的致病力，其对刺参苗种的半致死浓度为１．２×１０６ ＣＦＵ／ｍｌ。生理生化结合分子鉴定表明，该菌株为溶藻弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ＡｌｇｉＮｏｌｙｔｉＣＵＳ）。此外．．．

【目的】探讨中国油茶苗圃炭疽病原菌种类,揭示油茶苗圃炭疽病菌抗药性,为其防治提供依据和指导。【方法】分离油茶苗圃炭疽病菌,并对分离菌株的ApMat基因进行PCR扩增和测序,通过对序列系统发育分析鉴定炭疽病原菌种类;采用区分剂量法测定所有菌株对杀菌剂多菌灵、乙霉威、戊唑醇和咪鲜胺的抗药性。【结果】湖南、江西、海南和广东4个省份分离的95株的油茶苗圃炭疽病病原菌主要是果生炭疽菌(Colletotrichum fructicola)、暹罗炭疽菌(C.siamense)、山茶炭疽菌(C.camelliae)和胶胞炭疽菌(C.gloeosporioides) 4个种,其中炭疽病菌分布范围最广、分离数量最多(83株,占总分离菌株的87.4%)。抗药性测定结果表明,对多菌灵产生抗性的菌株有31个,占总分离菌株的32.6%;对戊唑醇产生了抗性的菌株有31株,占总分离菌株的32.6%。其中对多菌灵和戊唑醇这2种杀菌剂均具有抗性的菌株有6株,占总分离菌株的6.3%;对多菌灵、乙霉威和戊唑醇3种杀菌剂均有抗性的菌株有2株,占所有分离菌株的2.1%。但所有95个菌株对咪鲜胺敏感,说明目前苗圃油茶炭疽病菌尚未对咪鲜胺产生抗药性。29个高抗多菌灵而对乙霉威敏感菌株第198位氨基酸由谷氨酸(Glu)突变为丙氨酸(Ala),2株对多菌灵和乙霉威具有双重抗药性的菌株第200位氨基酸由苯丙氨酸(Phe)突变为酪氨酸(Tyr)。【结论】我国油茶苗圃炭疽病菌已对多菌灵/乙霉威和戊唑醇产生严重的抗药性,但对咪鲜胺尚未检测到抗药性。

近年在广西的桑园中发现一种新细菌病害—桑树细菌性枯萎病,从病桑根部和茎部组织经组织分离法获得3个细菌菌株,选择1个典型菌株GXE001进行接种桑树,接种后发病症状与自然发病症状一致,并从接种病株上又重新分离到了此病原细菌,柯赫法则证明GXE001菌株为该病的致病菌。通过形态学观察、常规生理生化指标测定、16S rDNA序列测定和同源性分析,鉴定GXE001菌株为Enterobacter cloacae。

２０１４－２０１５年对广西百色烟区的烟草青枯病发生危害情况进行了较为全面的调查，并对具有典型青枯病症状的烟株进行病原菌分离及致病性鉴定。结果显示，烟草青枯病在百色市的靖西县、德保县、乐业县和凌云县主要种烟区普遍发生，部分茎下部黑色坏死病株复合感染黑胫病和根黑腐病中的一种或两种病害；隆林县的病害样本没有分离和检测出青枯病菌，推测该县烟草根茎类病害主要为根黑腐病和黑胫病。从百色市各主要烟区采集到疑似烟草青枯病害样本１７０个，通过特异培养基分离和青枯菌演化型鉴定获得青枯病菌１３７株，柯赫法则验证共有９２株菌株为烟草青枯病致病菌株。选取其中典型菌株Ｄ３－１２进行病原菌分类学鉴定，通过菌株１６Ｓ ｒ Ｄ．．．

从高山榕发生叶枯病的病叶上分离到一株真菌，菌株编号记为ＣＸ００２１Ｄ４。利用传统的形态学观察与现代分子生物学技术相结合的方法，并依据其形态特点与培养性状进行了初步研究。结果表明，病原菌为丝孢纲（ＨｙｐＨｏｍｙＣｅｔｅｓ）瘤座孢目（ｔｕｂｅｒＣｕｌａｒｉａｌｅｓ）瘤座孢科（ｔｕｂｅｒＣｕｌａｒｉａＣｅａｅ）镰刀菌属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｌｉｎｋ）层生镰孢菌。该菌对营养要求不高，碳源和氮源均能利用，最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和牛肉膏。该菌对温度和ｐ Ｈ值的适应范围均较广，２５～２８℃菌丝生长速度最快，２８～３０℃之间孢子萌发率最高；适宜孢子萌发的ｐ Ｈ值为７．０～８．０，弱碱性更利于孢子萌发；有无光．．．

【目的】对四川省主要小麦产区的小麦黄斑叶枯病致病菌进行分离与鉴定，分析其致病基因组成情况，探究其致病菌的致病力，明确其生理小种类型，为小麦黄斑叶枯病的防治提供理论基础。【方法】于2021—2022年在四川主要小麦产区采集小麦叶枯病样本，经病原菌分离，通过形态学观察分析，内部转录间隔区（ITS，internal transcribed spacer）序列分析，致病基因（Ptr ToxA 、ToxB 和 ToxC）扩增和小麦黄斑叶枯病鉴定系致病性测定相结合的方法对病原菌进行鉴定。【结果】在小麦叶枯病样本中共分离并鉴定出3个小麦黄斑叶枯病病原菌菌株，均为Pyrenophora tritici-repentis，其在所有分离得到的小麦叶枯病病原菌中所占比例较小。对3个小麦黄斑叶枯病病原菌菌落和分生孢子进行形态学观察，未发现显著差异，符合病原菌形态学鉴定标准。进一步对3个小麦黄斑叶枯病病原菌进行ITS序列分析，结果显示3个菌株与参考基因组（ID：AM887509）的ITS序列相似性达到100%。对致病基因Ptr ToxA、ToxB、ToxC进行扩增，3个菌株在ToxA和ToxB基因的位点上均未扩增出任何片段，但在ToxC基因位点上均成功扩增出约500 bp的条带。病原菌致病性鉴定结果显示，本研究分离得到的菌株在Prosper和6B365品种上表现出较强的致病性，引起大面积叶片黄化，而在Glenlea和6B662品种上则未出现明显的叶片坏死或黄化症状。在四川省主要小麦产区收集到的小麦黄斑叶枯病致病菌为Pyrenophora tritici-repentis生理小种3。【结论】本研究系国内首次针对Pyrenophora tritici-repentis不同生理小种进行鉴定报道，将为我国在小麦黄斑叶枯病的防治上提供重要参考。