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[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 郭利军  曾炳山  刘英  李湘阳  裘珍飞  
以巨桉无性系Eg5叶片为外植体材料,试验了硫酸卡那霉素(kanamycin sulfate,Km)对外植体愈伤组织诱导增殖、芽分化、芽生根的影响,并且试验了头孢霉素(Cefotaxime,Cef)对外植体再生的影响及其对根癌农杆菌GV3101的抑制效果。结果表明:抑制愈伤组织增殖培养的卡那霉素浓度为17.5 mg/L,完全抑制芽分化的卡那霉素浓度为60 mg/L,完全抑制生根的卡那霉素浓度为400 mg/L;Cef在0~500mg/L范围内,0~300mg/L Cef对外植体的生长分化影响最小;共培养结束后的外植体经过500 mg/L的Cef处理后,共培养基中添加100 mg/L的Cef便可以...
[期刊] 林业科学  [作者] 李玲  韩一凡  
植物遗传转化时,选用抗性基因作为标记基因,用来分析已转化植株的基因整合及表达。新霉素磷酸转移酶基因(neo)是在遗传工程中经常使用的标记基因,它对卡那霉素具有很高的抗性。作为杨树基因转化的显性选择记号,首先要将杨树不同种对卡那霉素的敏感性进行测定。本文报道了这方面研究的结果。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 郭利军  曾炳山  刘英  李湘阳  裘珍飞  
以巨桉无性系Eg5叶片为外植体材料,以GUS瞬时表达率和瞬时表达率指数作为评价指标,主要探讨了预培养时间、菌液浓度、侵染时间、共培养基pH、共培养时间和乙酰丁香酮(Acetosyringone,AS)对遗传转化的影响,结果表明预培养3 d、菌液浓度OD600 nm为0.5、接种30~60 min、共培养基pH值为5.8~6.0、共培养基中添加150 mg.L-1AS、菌液中不添加AS、共培养1 d遗传转化效果最佳,初步建立了巨桉Eg5的遗传转化体系。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 邓艺  曾炳山  刘英  裘珍飞  李湘阳  
以巨桉栽培无性系EG5无菌苗的叶片为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究。结果表明:愈伤组织高效诱导和不定芽分化的最适培养基为改良MS+0.12 mg·L-1TDZ+0.25 mg·L-1NAA;硝酸铵对EG5叶片愈伤组织生长及植株分化的影响较大,最适宜质量浓度为0.412 5 g·L-1;最佳伸长培养基配方为改良MS+0.3 mg·L-16BA+0.05 mg·L-1IBA+0.3 mg·L-1IAA;暗培养10 d能促进不定芽分化,延缓愈伤组织老化和褐变速度。生根培养基为改良MS+0.4 mg·L-1NAA时生根率最高,为65.47%,移植成活率为90%以上。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 李倩  张聪  吴洁  蒲志刚  王大一  阎文昭  邓科君  张勇  郑雪莲  
为了研究不同品种甘薯在潮霉素以及basta选择下的耐受性,为甘薯的遗传转化提供依据,本试验选取了四川省常用甘薯栽培品种(材料),川薯164与西成薯007,以叶片为外植体,分别接种于含有6-BA、NAA及不同浓度梯度的潮霉素及basta的培养基上,统计分析得出不同基因型甘薯的最适抗性压。结果表明,川薯164与西成薯007叶片抗hyg的最适选择压分别为20~30,15~20 mg/L,川薯164与西成薯007叶片抗basta的最适选择压均为1.0 mg/L。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 赵志祥  严婉荣  陈圆  陈绵才  肖敏  肖彤斌  
从海南白沙、文昌等市县生姜主要种植区采样,经分离、纯化,获得生姜青枯病菌(Ralstonia solanaceaRum)菌株27株,采用抑菌圈法对72%农用链霉素可湿性粉剂进行了敏感性测定。结果表明:不同地理来源的生姜青枯病菌对农用链霉素敏感性差异明显,同一来源地的不同菌株也有一定的差异。ec50值分布在3.22~71.07μg/m l,平均ec50为34.69μg/m l;其中,白沙荣邦RB-2菌株最敏感,ec50为3.22μg/m l;而白沙邦溪BX-3菌株敏感性最低,ec50为71.07μg/m l。敏感性分布频率呈连续性单峰曲线,ec50值表现连续,符合正态分布,其平均ec50值34....
[期刊] 华北农学报  [作者] 王清海  杨在君  魏淑红  廖明莉  苏瑾  杨宇凤  杨会  王育伟  彭正松  
为明确四倍体小麦矮秆基因Rht14、Rht16和Rht18的赤霉素敏感性及其对小麦农艺性状的影响,促进这些矮秆基因的合理利用。选用分别含有Rht14、Rht16和Rht18的四倍体小麦近等基因系ANW16D(Rht14)、ANW16F(Rht16)、ANW16G(Rht18)及其高秆轮回亲本LD222以及六倍体小麦中国春(Chinese spring),测量其不同浓度GA3处理下小麦的株高,计算赤霉素敏感系数(GRI)并推断3种矮秆小麦的赤霉素反应类型。在成熟期对LD222近等基因系小麦的农艺性状如株高、穗长、主穗穗下第一茎节(P-1)节间长、节间表皮细胞、种子表皮细胞及种子体积等进行测量,分...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 郭英杰  刘晓婕  张帅  刘洋  张萍  许晨晨  朱学海  
为探究黍子突变体株高、节间和穗部等表型差异及对外源赤霉素的敏感性,以野生型‘260’及其EMS诱变获得的矮秆突变体‘87’为试验材料,对其农艺性状、茎秆细胞学、内源激素含量及喷施外源赤霉素后的表型进行分析。结果显示:与野生型‘260’相比,矮秆突变体‘87’成熟期株高、穗长和千粒重分别下降53.3%、31.8%和1.7%;茎粗和分蘖数分别增加14.1%和113.3%。突变体株高的下降与节间数无关,主要由中下部节间长度缩短造成。经细胞学观察,矮秆突变体茎秆缩短主要是由主茎茎节纵向细胞尺寸减小所致,茎粗增加是由横向细胞数目增加造成的。喷施外源GA_3后,植株高度变化与喷施清水基本一致,成熟期矮杆突变体‘87’内源GA_1+GA_3含量显著高于野生型‘260’,可见矮秆突变体‘87’为GA不敏感性突变体,导致植株矮化并增强了抗倒伏性能,可作为黍子矮化育种的新种质。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 唐娜  姜莹  何蓓如  胡银岗  
【目的】明确赤霉素敏感性不同的矮秆基因对小麦株高和胚芽鞘长度的效应,促进小麦不同矮秆基因的合理利用。【方法】利用分子标记和系谱分析相结合,对中国小麦主产区部分小麦品种及品系中所含的矮秆基因Rht-B1b、Rht-D1b和Rht8进行分类,结合田间株高和室内胚芽鞘长度调查,比较赤霉素(GA3)敏感性不同的矮秆基因对胚芽鞘长度和株高的效应。【结果】分子标记检测结合系谱分析对129份供试品种进行分类,含有矮秆基因Rht-B1b的小麦品种58份,含有Rht-D1b的24份,含有Rht8的73份。其中35份品种含有2个矮秆基因Rht-B1b和Rht8,16份品种含有Rht-D1b和Rht8。赤霉素敏感性...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 李敏  石治鹏  林忠旭  李晓方  李定国  
【目的】以70份棉花多基因型种群(MAGIC)后代株系为材料,研究株系主要性状对花铃期喷施缩节胺、缩节胺+赤霉素的生态响应,鉴定其敏感性。【方法】试验设缩节胺、缩节胺+赤霉素2个处理,每个处理1种浓度,即缩节胺(30 g/hm2,兑水225kg/hm2)、缩节胺+赤霉素(30 g/hm2+0.5 g/hm2,兑水225 kg/hm2),以喷清水为对照。9月15日调查棉花株式图,测定单铃重、衣分、子指、理论皮棉产量。【结果】株高、5果枝长、10果枝长、顶部果枝长、单铃重、子指、皮棉产量较对照对缩节胺、缩节胺
[期刊] 中国农业科学  [作者] 徐飞  周洁  吴超  王建芬  丁双阳  李秀波  
【目的】卡那霉素是一种在奶牛兽医临床常用药物,其在牛奶中的残留不容忽视。荧光微球作为一种新型的荧光示踪物,近年来在小分子快速检测方面呈现出独特的优势,试验开展了卡那霉素荧光微球免疫层析定量方法的研究,旨在为牛奶中卡那霉素药物的快速筛选提供新型有效的检测手段。【方法】采用戊二醛法和过碘酸钠法制备了两种卡那霉素的包被抗原(KANA-GA-OVA1、KANA-I2-OVA2),抗卡那霉素的单克隆抗体通过蛋白G免疫亲和柱进行纯化后,采用碳二亚胺法与荧光微球进行了共价偶联,成功制备了抗体-荧光微球标记物。免疫层析试纸条方法采用微孔测定法。包被卡那霉素包被抗原的NC膜作为固相载体,荧光微球标记的单克隆抗体...
[期刊] 林业科学  [作者] 王小雪  刘芸  邵呈龙  唐小荐  黄小辉  吴艳冰  唐吉芳  何炳辉  
近几年,随着重庆"森林工程"全面启动,重庆西部主要区县充分利用当地有利自然条件,大规模发展速生桉树人工用材林。种植桉树需5年以上才能产生经济效益,因此,开展幼龄林林下种植成为以短养长、提高桉农收益的有效途径。但很多研究发现:桉树不仅具有较强的水、肥竞争力,而且作为一种外来树种,化感作用为其在新生境的生长和繁殖
[期刊] 华北农学报  [作者] 崔淑芳  李俊兰  葛朝红  张寒霜  
[期刊] 西南农业学报  [作者] 吕孟雨  董福双  张俊敏  王海波  
为了建立简单有效地筛选抗卡那霉素标记基因玉米的方法,分别用玉米自交系"昌7-2"和杂交种"郑单958"为试验材料,用不同浓度、不同体积的卡那霉素溶液分别浸种3、4 d后播种,调查播种10 d后的玉米幼苗白化率,确定玉米对卡那霉素的抗性,结果表明用卡那霉素浸泡玉米种子,玉米苗的白化率不但与卡那霉素浓度有关,而且与浸种的用液量有关,杂交种和自交系之间差异并不大,利用100 mL浓度为200 mg/L的卡那霉素溶液浸种3 d后播种,白化苗率基本可以达到100%,用100 mL浓度为150mg/L的卡那霉素溶液浸种20粒种子3 d后播种进行抗性筛选,经过对玉米T1代转基因植株的筛选试验进行验证准确度达...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘鹏  陈素梅  房伟民  蒋甲福  管志勇  陈发棣  
将菊花品种‘神马’的叶盘和茎段分别接种含有0、5、7.5、10、15和20 mg·L-1卡那霉素(Kan)的再生培养基和生根培养基上,以建立简单有效的转基因菊花Kan抗性株系的筛选方法。结果表明:菊花叶盘不定芽分化筛选和生根筛选的Kan临界耐受质量浓度分别为10和7.5 mg·L-1。通过农杆菌介导法转化2 400个叶盘,经Kan筛选后得到358个抗性不定芽,经Kan生根筛选后得到65个生根株系。为了有效剔除假阳性植株,用500 mg·L-1的Kan溶液浸泡菊花转基因再生株系的叶片,通过性状观察筛选出6个Kan抗性株系,且6个抗性株系都通过PCR手段得到验证。表明成功建立了简单有效的筛选转基因...
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