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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
查红波 蒋金书
借助于改良甲苯胺蓝染色法和荧光测定法,分别检测了巨型艾美耳球虫感染鸡空肠粘膜肥大细胞(MMC)数量和组织胺(HA)含量的变化。结果表明,初次感染巨型艾美耳球虫之后,空肠 MMC 呈减少趋势,至感染后第14天回复至不感染对照组水平.而初次感染组相应空肠 HA 水平呈现出不显著波动后,在感染后第4天达最大值。在再次攻毒试验中,免疫攻毒组 MMC 开始显著增多,尔后呈下降趋势;免疫攻毒
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
查红波 蒋金书
通过用地塞米松处理鸡和用特异性抗原作刺激因子的微量全血淋巴细胞转化试验(LPA),研究了雏鸡抗 Eimeria maxima 再感染中细胞免疫现象。结果表明,地塞米松处理可损伤鸡抗 E.maxima 再感染的免疫力.这提示了 CD8+T 细胞、γIFN 及 IL-2等在抗 E.maxima 卵囊抗原刺激因子的微量全血 LPA结果表明,其刺激指数值与鸡抗 E.maxima 再感染抵抗力有关。此反应可用于体外监测鸡体抗 E.maxima再感染的抵抗力。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
陈刚 蒋金书
以15日龄公雏作为试验对象,利用 TECHNIOON RA-1000SYSTEM 血液生化分析仪,研究了鸡在人工感染 E.brunetti(41 500个卵囊/只)、E.maxima(42000个卵囊/只)和 E.acervulina(42500个卵囊/只)后3,5,7,9和11d 时其血清中葡萄糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、淀粉酶、尿酸、总蛋白、白蛋白、钙和镁的变化.结果表明:E.brunetti,E.maxima 和 E.acervulina 感染鸡后均可使其血清谷丙转氨酶活性升高,(E.
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
陈刚 蒋金书
采用体外脱囊的方法,将布氏艾美耳球虫(Eimeria brunetti)和巨型艾美耳球虫(E.maxima)的子孢子分别接种于鸡肾原代细胞和9日龄鸡的尿囊腔中,置40～41℃恒温箱内培养,结果如下:①E.brunetti 子孢子接种鸡肾原代细胞后,50h 发现第一代未成熟裂殖体;76h 发现第二代成熟裂殖体;128h 发现配子体,继续培养再无进一步发育。子孢子接种鸡胚尿囊腔后,16～48h 发现第一代裂殖体;60～72h 发现第二代裂殖体;未见到第三代裂殖体;144h 发现小配子体、大配子体和未成熟卵囊,168h 发
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
丁熙成 姜悦平 沈思军 徐素红
巨型艾美耳球虫是鸡球虫病中致病力较强的虫种,流行区域广,感染率高,成为防治的重点虫种。为此,我们分Ⅰ对照组Ⅱ感染球虫组Ⅲ感染球虫组+添加甜菜碱组Ⅳ感染球虫组+添加马杜拉霉素每组30只小公鸡,Ⅰ.Ⅱ,Ⅳ组按1.5万/只口服接种巨型艾美耳球虫卵囊,接种前一天第Ⅲ组按0.372g 甜菜碱/kg 饲料、第Ⅳ组按0.5g 马杜拉霉素/kg 饲料饲喂。研究其生理和生化指标的动态变化。本试验对雏鸡感染巨型艾美耳球虫及用马拉拉霉素和甜菜碱控制感染所引起的血液中一些生理和生化指标进行了系统的
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
翟少钦 闫志强 陈春林 朱买勋 唐红梅 付文贵
将60只健康罗曼粉鸡随机分为正常组和模型组，每组30只，模型组灌服1×10~(4)个孢子化卵囊进行人工复制鸡球虫病模型，正常组灌服等体积生理盐水，感染5 d，剖杀试验鸡，无菌采集鸡盲肠内容物，并通过Illumina PE250型高通量测序仪对肉鸡盲肠内菌群进行16S rDNA基因V3～V4可变区检测，对肠道菌群可操作分类单元(OTUs)数、α多样性、β多样性及差异菌门与菌属进行综合性分析与评价，探究柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群结构和多样性的影响。结果表明：与正常组相比，感染柔嫩艾美耳球虫后鸡肠道菌群的OTUs数、Chao1指数极显著降低，Shannon指数显著降低，Simpson指数显著升高；门水平上，模型组变形菌门的相对丰度极显著升高，而厚壁菌门的相对丰度显著降低，拟杆菌门和柔膜菌门的相对丰度显著降低；属水平上，正常组的优势菌属为拟杆菌属、瘤胃菌属–UCG014、副拟杆菌属，而模型组瘤胃球菌属–uncultured、球藻菌属、埃希菌–志贺菌属相对丰度极显著升高。可见，艾美耳球虫破坏了盲肠菌群的完整性，促进潜在致病菌的建立和生长，尤其使埃希菌–志贺菌属大量繁殖，快速生长。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
翟少钦 闫志强 陈春林 朱买勋 唐红梅 付文贵
将60只健康罗曼粉鸡随机分为正常组和模型组，每组30只，模型组灌服1×10~(4)个孢子化卵囊进行人工复制鸡球虫病模型，正常组灌服等体积生理盐水，感染5 d，剖杀试验鸡，无菌采集鸡盲肠内容物，并通过Illumina PE250型高通量测序仪对肉鸡盲肠内菌群进行16S rDNA基因V3～V4可变区检测，对肠道菌群可操作分类单元(OTUs)数、α多样性、β多样性及差异菌门与菌属进行综合性分析与评价，探究柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群结构和多样性的影响。结果表明：与正常组相比，感染柔嫩艾美耳球虫后鸡肠道菌群的OTUs数、Chao1指数极显著降低，Shannon指数显著降低，Simpson指数显著升高；门水平上，模型组变形菌门的相对丰度极显著升高，而厚壁菌门的相对丰度显著降低，拟杆菌门和柔膜菌门的相对丰度显著降低；属水平上，正常组的优势菌属为拟杆菌属、瘤胃菌属–UCG014、副拟杆菌属，而模型组瘤胃球菌属–uncultured、球藻菌属、埃希菌–志贺菌属相对丰度极显著升高。可见，艾美耳球虫破坏了盲肠菌群的完整性，促进潜在致病菌的建立和生长，尤其使埃希菌–志贺菌属大量繁殖，快速生长。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
杨筱珍 高登慧 许乐仁
以成年胡子鲇(Clarisfuscuslacepede,体重1.5kg)为研究材料,通过组织化学与形态学研究证实,肥大细胞在胡子鲇肠粘膜与粘膜下数量较多,在头肾和胸腺中也有少量分布,并有沿血管周分布的倾向。肥大细胞以Carnoy氏固定、AB/SO染色的效果最好。以AB/SO着色的肥大细胞胞质颗粒呈深蓝色,胞核呈淡褐色;以TB/SO着色的肥大细胞胞质颗粒呈紫红色,胞核呈淡红色。而中性缓冲福尔马林固定对肥大细胞的着染有一定阻断作用。一些曾被国外学者用于鉴定硬骨鱼肥大细胞(或嗜酸性颗粒细胞)的组织化学技术在本研究中未能鉴定出胡子鲇的肥大细胞。电镜观察证实,胡子鲇肥大细胞中含有大量特征性的胞浆颗粒,胞...
关键词：
肥大细胞 组织化学 形态学 胡子鲇
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
秦泽荣 孔繁瑶 荒川皓 马场荣一郎
本研究揭示了柔嫩艾美耳球虫感染可以引起鸡肠炎沙门氏菌感染的复发。复发的主要表现为盲肠内容物的肠炎沙门氏菌阳性率和数量再次显著地升高;肠炎沙门氏菌在盲肠中的滞留时间显著延长。这种复发与肠炎沙门氏菌的初始感染量及球虫感染时间有关。肝脏和脾脏阳性率无显著变化。
关键词：
肠炎沙门氏菌 复发 柔嫩艾美耳球虫
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
秦泽荣 孔繁瑶 荒川皓 马场荣一郎
本试验对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染对肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)感染的影响进行了研究。实验结果表明:肠炎沙门氏菌和柔嫩艾美耳球虫的相互作用显著;在球虫感染后第4,10,14d 时,柔嫩艾美耳虫球虫感染可显著地(P<0.01)增加盲肠内容物中肠炎沙门氏菌数量。肠炎沙门氏菌和柔嫩艾美耳球虫之间协同作用与肠炎沙门氏菌的感染量大小和感染后的时间显著相关(P<0.01)。柔嫩艾美耳球虫感染并没有显著地提高肝脏、脾脏中肠炎沙门氏菌的阳性率。不同感染量的肠炎沙门氏菌感染对鸡盲肠的球虫病变记分显著影响.
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
蒲响林 潘仰栋 相权珈 孙晓婷 陆明敏 严若峰 徐立新 李祥瑞 宋小凯
[目的]为探讨巨型艾美耳球虫Th1类细胞因子刺激性分子Armadillo/β-catenin样重复序列（EmARM-β）蛋白对鸡免疫细胞功能的影响。[方法]利用密度梯度离心法和免疫磁珠分选法分别分离出鸡外周血单个核细胞（PBMC）、CD8~(+) T细胞和CD4~(+) CD25~(- )T细胞，之后将EmARM-β重组蛋白（rEmARM-β）分别与上述细胞进行体外共孵育6 h，利用CCK-8试剂和qPCR法分别观察其对上述细胞增殖能力及相关细胞因子分泌水平的影响。[结果]经免疫磁珠分选后，流式细胞术检测鸡CD8~(+) T细胞和CD4~(+) CD25~(-) T细胞的纯度分别为93.01%和88.88%。与对照组相比，rEmARM-β能显著促进鸡PBMC的增殖能力，显著上调Th1类细胞因子（IFN-γ和IL-2）和促炎性细胞因子（IL-1β、IL-6和IL-17A）mRNA水平；能显著促进CD8~(+) T细胞的增殖能力，显著上调其IFN-γ、IL-2和TNF-α mRNA水平，能显著上调穿孔素、FasL（Fas配体）和Fas mRNA水平；能显著促进CD4~(+) CD25~(-) T细胞的增殖能力，显著上调其IFN-γ和IL-2 mRNA水平，下调IL-4和IL-10 mRNA水平。[结论]EmARM-β可以有效促进鸡PBMC和T细胞亚群（CD8~(+) T细胞和CD4~(+) CD25~(- )T细胞）的增殖能力，提升其Th1类细胞因子和促炎性细胞因子的分泌水平，提示EmARM-β具有研发鸡球虫病新型疫苗候选抗原的潜力。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张高英 杨宇 罗广生 赵雅心 彭克美 刘华珍
为寻求一种较好的显示肥大细胞的方法,采用硫堇染色法和硫堇-甲苯胺蓝染色法分别对用不同固定液固定的兔肠系膜中肥大细胞进行染色。结果显示:Carnoy氏液固定,硫堇染色可清楚显示肥大细胞,背景干扰小,阳性细胞多且可见肥大细胞的脱颗粒现象;硫堇-甲苯胺蓝法虽然也可显示肥大细胞,但背景干扰大,不利于对肥大细胞的观察;甲醛-乙醇固定,2种染色方法都可清楚地显示肥大细胞,但阳性细胞较少;中性甲醛则完全阻断肥大细胞的着色,2种染色方法都不能显示肥大细胞。兔肠系膜肥大细胞有沿血管分布的趋势。研究结果表明:Carnoy氏液及硫堇染液分别是兔肠系膜优良的固定液和染色液,可清楚显示肥大细胞。
关键词：
肥大细胞 固定液 染色 兔 肠系膜
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蒋金书 胡景辉
采用体外脱囊的方法,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和堆型艾美耳球虫(E.aceroulina)的子孢子分别接种于9日龄 SPF 鸡胚的尿囊腔和鸡肾原代细胞中,置40～41℃恒温箱中培养.E.tenella 子孢子接种 SPF 鸡胚尿囊腔后,24h 后发现早期的第一代裂殖体;34h 后可观察到成熟的第一代裂殖体和裂殖
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
查红波 蒋金书
通过石蜡切片、H.E.染色等研究了巨型艾美耳球虫 Eimeria maxima 在免疫鸡体内的发育及鸡体相应肠道的组织学变化.E.maxima 在非免疫鸡体内有3代裂殖生殖。在其第1,2代裂殖生殖阶段,所见虫体寄生的空肠组织发生粘液变性.在裂殖生殖后期和配子生殖阶段,非免疫攻毒鸡空肠绒毛组织病理学变化明显,包括粘膜上皮大量脱落,固有层淋巴细胞浸润等,有时可见大量上皮间淋巴细胞(IEL)出现,在免疫攻毒鸡,E.maxima 从子孢子的侵入、移行阶段在免疫鸡体内就受到抑制.随着时间推移,第1,23代裂殖生殖受到日益加重的抑制,最终使虫体没有进入有性生殖阶段。给免疫鸡攻毒后24h 即可见空肠...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
陈刚 蒋金书
利用肠粘膜压片镜检的方法,对 E.brunetti,E.maxima 和 E.acervulina 在鸡体内的发育部位和各期虫体的形态学特性进行了研究,经三次重复试验检查结果表明,E.brunetti 第一代、第二代裂殖生殖主要在空肠和回肠进行;第三代裂殖生殖,配子生殖和卵囊形成主要在空肠、回肠、直肠和盲肠近端进行;第三代裂殖生殖,配子生殖和卵囊形成主要在空肠、回肠、直肠和盲肠近端进行.朋代裂殖体出现时间分别为接种后24～48h;56～80h 和88～96h;小配子体与大配子体均于104～112h 出现,未完全成熟的卵囊和极少数成熟卵囊见于112～120h。
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