【目的】为了研究双孢蘑菇工厂化生产催蕾期不同变温时长对覆土层细菌菌落构成、微生物的多样性的影响。【方法】采用16S rRNA基因高通量测序技术分析了4、6、8 d变温处理下覆土层细菌群落特征。【结果】试验共产生有效操作分类单元(OTU_S)572个、290个细菌种群,涵盖了14门、31纲、72目、117科、217属、290种。在属水平上,假单胞菌属、蛭弧菌属、和根瘤菌属等为优势种群,其中4 d变温处理中假单胞菌属所占的比例最高,为21.2%。Alpha多样性反映4 d变温细菌物种丰度最高,6 d变温物种多样性最高,4和8 d变温下多样性相似性更为一致。【结论】4 d变温下覆土层中的细菌种群在3个处理中最适宜双孢蘑菇菌丝生长和子实体形成,但形成的子实体的数量个数、产量及层次等与降温时长的关系还需进一步的研究。

在无菌覆土层中分别加入对蘑菇菌丝体生长有益的微生物菌悬液，该覆土层中能形成子实体，但产量较常规未灭菌覆土中的少，形成的时间晚；在常规未灭菌覆土层中加入有益微生物悬浮液，对提高蘑菇产量效果不明显。

通过对双孢蘑菇覆土层中微生物作用分析发现，覆土中同时存在对蘑菇菌丝体生长有促进作用、抑制作用和作用不明显３种类型的微生物。对蘑菇菌丝体生长有促进作用的微生物包括放线菌、固氮菌和细菌，经鉴定分析属于链霉菌属、固氮菌属、芽孢杆菌属和假单孢菌属。在平板培养基、液体培养基内分别处理这些微生物，蘑菇菌丝体生长速度加快，菌丝量增加。

以双孢蘑菇品种W-192为试验材料,系统研究了3个采收期(根据菌盖直径和生长期分别记菌盖直径2～3,3～4,4～5 cm为采收期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)双孢蘑菇的含水量、开伞率、褐变度、呼吸强度、总多酚、多酚氧化酶(PPO)活性及丙二醛7个指标在低温贮藏(4±1)℃期间的变化特征。结果表明,与采收期Ⅰ和Ⅲ相比,采收期Ⅱ的双孢蘑菇延后3 d左右才出现呼吸高峰,丙二醛含量始终较低,含水量在贮藏前期较高,白度值在贮藏后期保持较好,开伞率在贮藏后期低于其他2组,体现出更好的耐贮藏性。对于低温贮藏的双孢蘑菇W-192,应在采收期Ⅱ采收;对即将上市的蘑菇可在采收期Ⅲ采收。

选择14种常见的杀菌剂分别对菌盖疣孢霉菌丝、分生孢子和双孢蘑菇菌丝进行室内毒力测定.结果表明,供试的杀菌剂对菌盖疣孢霉菌丝生长和分生孢子萌发以及对双孢蘑菇菌丝生长均具有不同程度的抑制作用,且不同杀菌剂对菌盖疣孢霉菌和双孢蘑菇菌丝的毒力存在显著差异.其中,表现最好的杀菌剂为特克多,对菌盖疣孢霉菌具有较高的活性,而对双孢蘑菇菌丝的毒性相对较低.其次是甲基托布津、断灰、适乐时、施保功、施保克、多菌灵6种杀菌剂,它们对菌盖疣孢霉菌的毒力比对双孢蘑菇菌丝毒力相对较高.世高、富力库、爱苗、腈菌唑、福星、扑海因、代森猛锌等7种药剂对疣孢霉菌和蘑菇菌丝的毒性差异不明显.

真菌-细菌生物膜(FBB)在制备高效生物肥料接种剂和生防制剂中发挥着重要作用,探讨FBB的形成机理非常有必要。以双孢蘑菇和恶臭假单胞菌UW4为对象,研究了1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)在双孢蘑菇-细菌生物膜形成过程中的作用。采用PDA平板培养双孢蘑菇菌丝,在距离菌丝尖端边缘处涂布UW4菌悬液,双孢蘑菇菌丝生长速度比涂布超纯水的对照组提高10.85%,同时,显微镜和扫描电镜均可观察到UW4能够在双孢蘑菇菌丝表面形成菌膜。使用ACC合成酶抑制剂氨基氧乙酸(AOA)抑制双孢蘑菇菌丝ACC的合成,则UW4不能在双孢蘑菇菌丝表面形成菌膜。此外,UW4 ACC脱氨酶基因缺失突变株也不能形成菌膜。趋化试验发现,UW4可趋化ACC,趋化强度与双孢蘑菇菌丝分泌物中的强趋化物谷氨酰胺和柠檬酸类似,且ACC最适趋化浓度的趋化强度高于谷氨酰胺和柠檬酸最适趋化浓度的趋化强度。而UW4 ACC脱氨酶基因缺失突变株不能趋化ACC。转录组测序分析ACC对UW4基因表达的影响,发现ACC能够引起UW4中趋化和运动相关基因的表达水平发生显著的上调或下调。以上结果表明,ACC是假单胞菌趋化双孢蘑菇的一种强趋化物质,同时是产ACC脱氨酶细菌在真菌菌丝表面形成菌膜的关键信号物质。

利用白色双孢蘑菇和棕色双孢蘑菇之间杂交,构建10个杂交菌株;对亲株和杂交菌株进行了ISSR分子标记分析,建立遗传相似系数树状聚类图。结果表明,12个菌株遗传相似系数介于0.539～0.839之间,在相似系数为0.66水平上将杂交菌株和亲株划分为3个类群;杂交菌株之间在产量上差异较大,平均产量在0.30～5.73 kg/m2之间,其中产量高于亲株的杂交菌株有3个,杂交菌株子实体颜色为棕色和浅棕色;产量高和子实体颜色浅的杂交菌株,与亲株白色双孢蘑菇之间遗传关系较近,而与2个亲株之间遗传关系较远的杂交菌株,产量低。

对采自四川和西藏的双孢蘑菇(Agaricus bisporus)和蘑菇(A.campestris)9个野生菌株,以及双孢蘑菇5个栽培菌株为材料,进行了ITS-RFLP分析。结果表明,ITS-PCR条带约为750 bp,5种限制性内切酶(MspⅠ、HinfⅠ、HaeⅡ、AulⅠ、TaqⅠ)的ITS-RFLP分析结果为,只有4种限制性内切酶(HinfⅠ、HaeⅡ、AulⅠ、TaqⅠ)产生多态性条带,但完全能将双孢蘑菇和蘑菇区分的限制性内切酶为TaqⅠ;对5种限制性内切酶的ITS-RFLP分析数据进行聚类结果为,在相似系数为0.615水平以下分为2个类群,并将双孢蘑菇和蘑菇区分开;在相似系数为0.9...

以某矿山大型排土场覆土层改良为依据,参考国内蘑菇废料综合利用的成功经验,进行了试验田研究。结果表明:蘑菇废料对于提高覆土层土壤含水量、蓄水性,改善土壤颗粒粒级级配,提高土壤有机质含量,优化土壤pH值,提高微生物含量都具有重要作用;大豆种植试验也进一步证明了蘑菇废料改良土壤肥力的可行性。蘑菇废料的回收利用不仅为复垦植物提供良好的成长环境,而且也实现了变废为宝,避免其对周围环境造成污染,为该矿山排土场复垦、绿化提供了保障。

通过正交试验设计，考察不同发酵温度(30、40和50℃)、不同接种物含量(25%、50%和75%)条件下两种食用菌菌渣的产气效果.结果发现：两种食用菌菌渣中主要营养物质成分含量较高，可作为厌氧发酵原料，且双孢蘑菇菌渣产气潜能大于银耳菌渣；两种菌渣的反应体系内pH值始终为6.5～7.6,反应能够正常进行；食用菌菌渣种类和接种物含量对甲烷含量的影响极显著，发酵温度对甲烷含量的影响显著；日产气量随发酵温度的升高而增加，随接种物含量的升高而增加；以双孢蘑菇菌渣为原料，在发酵温度50℃、接种物含量50%的发酵工况下，产气效果最佳，可作为后期发酵罐流场分析的初始条件.

【目的】分析枳壳不同生育期根际土壤细菌群落组成及其与土壤环境因子的关系，揭示影响土壤细菌群落结构的关键环境因子，为枳壳合理的栽培管理和土壤培育提供科学指导。【方法】分别在枳壳花期、坐果期、采收期和越冬期采集根际土壤，采用高通量测序技术测定和分析细菌的群落组成及多样性变化特征。同时，采用化学分析方法对土壤理化性质和酶活性进行测定，并运用R语言软件对细菌群落和土壤环境因子进行RDA和相关性热图分析。【结果】枳壳采收期根际土壤pH值显著高于其他生育期(P<0.05,下同);土壤全氮、有效钾含量和过氧化氢酶活性均表现为坐果期显著高于花期和采收期；高通量测序共得到29 240个细菌OTUs,分属于24门、72纲、158目、253科、409属；土壤细菌群落丰富度在枳壳生育期中呈先升后降的变化趋势，在坐果期最高；在门水平上，变形菌门(Proteobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi)、放线菌门(Actinobacteria)和芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)为优势菌门，占总丰度的82.53%～88.49%;在属水平上，鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、RB41、MND1、硝化螺菌属(Nitrospira)、Subgroup＿10、Haliangium、Bryobacter和Dongia属为优势菌属，占总丰度的13.16%～19.49%;其中Dongia属菌群在坐果期明显增加，而Subgroup＿10属菌群在越冬期显著增加。相关性分析表明，Haliangium属、Bryobacter属和溶杆菌属(Lysobacter)的丰度与土壤pH、有机质含量和脲酶活性呈显著正相关；而Subgroup＿10属丰度与土壤有效氮含量呈显著负相关。【结论】枳壳根际土壤理化性质、酶活性及根际细菌群落组成均随生育期变化而发生波动，土壤pH和有效氮含量是影响土壤根际细菌群落结构变化的重要环境因子。

【目的】利用外源海藻糖,提高菌种抗高温能力,筛选耐高温品种。【方法】在培养基中添加外源海藻糖生产双孢蘑菇(Agaricus bisporus)菌种,提高抗高温势能,并根据不同品种在高温下的生长表现筛选耐高温品种(株系)。【结果】在添加外源海藻糖的培养基中,绝大多数品种在高温下菌丝生长快、生长势强且丰厚。供试各品种的生长特性可分3个类型:第1种类型是接种后菌丝萌发较快,第1周迅速生长,第2～3周生长缓慢,如Baichagu、2796系列的2796-Gaoyou、2796-4-9、Accc系列的Accc-52327、Accc-50842-411等品种;第2种类型品种接种后菌丝萌发较慢,第1周生长较缓,第2周迅速生长,如U3-4-22、日本引进品种JP-100和JP-118、F56系列;第3种类型是第1周菌丝体基本上不萌发,而在第2周后期,特别是第3周开始加快生长速度,如Accc-50554、Accc-50442-515、Mohuanong-2796-1等。【结论】筛选株系的结果表明,F56的2个株系,在小麦和玉米粒2种培养基质中生长良好,特别是在玉米粒培养基质中满袋率高达100%。2796-Gaoyou的株系,在小麦培养基质中满袋率达50%～85%以上,Ac-cc-50554的Accc-50554-1株系满袋率高达100%,其他所有株系也都在70%以上。

随着双孢蘑菇工厂化生产规模日益扩大,人工分级劳动量激增,双孢蘑菇自动分级得到广泛关注。针对目前双孢蘑菇分级系统只考虑菌盖大小参数,设计了一种综合考虑大小、残缺和褐变程度的双孢蘑菇自动分级系统。为尽可能获取双孢蘑菇全表面信息,设计了翻面机构能够获取双孢蘑菇正反两面图像。该系统主要由上料机构、传送机构、图像采集系统、翻面机构、控制系统和分级执行机构6部分组成,并且可以通过本地显示屏、手机移动端、Web端对蘑菇分级结果进行实时显示。针对3个品质指标的检测,提出基于分水岭算法获取双孢蘑菇轮廓并计算菌盖面积;基于SURF算法判断双孢蘑菇是否残缺;通过将获取的RGB格式图像转换为Lab格式图像,计算L值判断双孢蘑菇的褐变程度,从而实现双孢蘑菇大小、残缺以及褐变程度的在线分级。基于研发的双孢蘑菇智能分级系统样机,以人工分级为标准,对200个新鲜双孢蘑菇进行试验测试。结果表明:提出的图像处理方法对单个蘑菇正反面图像处理时间平均为0.4s,当传送速度为0.32m·s~(-1)时,系统平均分级速度可达72个·min~(-1),分级正确率为96.45%。该试验结果表明基于机器视觉的新鲜双孢蘑菇质量分级检测方法可行,可用于双孢蘑菇外部品质在线检测。

【目的】翻炒的本质是一种非稳态传热的技术，炒制过程会显著改进食品的风味。通过比较不同炒制时间和温度对一种新型预制菜肴中双孢蘑菇风味的影响，为食用菌类预制菜肴的研发生产提供数据参考。【方法】首先通过电子鼻、气相离子迁移色谱（GC-IMS）以及游离脂肪酸含量测定，评价预制菜肴中双孢蘑菇挥发性风味特征；进而利用电子舌分析结合可溶性糖（醇）、游离氨基酸、呈味核苷酸及有机酸含量测定对不同炒制条件下预制菜肴中双孢蘑菇非挥发性风味进行分析，并通过等效鲜味浓度（EUC）分析对预制菜肴鲜味强度进行评价；最终基于感官评定分析，探究在不同炒制条件下，预制菜肴中双孢蘑菇形态、色泽、风味、组织和口感的差异，根据消费者对于产品风味认知的主观性评价对不同炒制条件所得的产品。【结果】整个炒制过程可分为3个阶段，对于炒制时间可具体分为2 min、4—8 min和10 min，而随着炒制温度上升，风味也可分为3个阶段，即160—170℃、180—190℃和200℃。随着炒制时间的延长，双孢蘑菇特征气味成分1-辛烯-3醇和3-辛醇含量增加；而随着炒制温度的增加，1-辛烯-3-醇和3-辛醇含量在180℃时达到最大值。从鲜味角度来看，4 min是预制菜肴中双孢蘑菇非挥发性风味形成最佳的炒制时间。随着炒制温度的增加，鲜味和甜味在180℃达到最强。过长的炒制时间会降低预制菜肴中双孢蘑菇可溶性糖（醇）的含量，并提高有机酸的含量。而随着炒制温度的提高，可溶性糖（醇）含量先升高，后降低；有机酸则呈现出升高的趋势。另外，通过对呈味核苷酸及游离氨基酸测定，发现不同炒制条件对核苷酸影响不大，但较长时间或较高温度的处理皆会降低预制菜肴中双孢蘑菇的游离氨基酸含量。最终通过等效鲜味浓度及感官评价分析发现，当炒制时间和炒制温度分别为4 min和180℃时，预制菜肴中双孢蘑菇的鲜味及感官评分最高，说明在炒制时间4 min，炒制温度180℃条件下所炒制的产品更容易被消费者所接受。【结论】为使预制菜肴中双孢蘑菇具有最佳的香味和滋味，确定炒制工艺为炒制温度180℃，翻炒4 min。

【目的】本文以利用年限分别为100、300、700、1000和2000年的水稻土及杭州湾海涂(0年)作为研究对象,探究对不同利用年限水稻土氨氧化细菌群落结构随着利用年限的变化而显著变化。【方法】采用PCR-DGGE技术分析6个利用年限水稻土的氨氧化细菌群落组成。【结果】利用PCR-DGGE得到的电泳图像显示不同利用年限水稻土样品可检测到的AOB的DGGE条带数量均存在明显差异。【结论】不同利用年限对水稻土氨氧化细菌群落结构产生较大的影响。