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[期刊] 西南农业学报
[作者]
王跃华 何诗虹 郭翠平 江明殊 王晓蓉 刘涛
为了利用四氮唑脱氢酶还原法测定川贝母悬浮培养细胞的活力,并对影响其活力测定的各种因素进行了研究。选取四氮唑脱氢酶还原法测定了经三次继代培养的川贝母悬浮培养细胞的活力,并研究了不同四氮唑溶液浓度、缓冲液种类和pH值以及脱氢酶还原反应时间对川贝母悬浮培养细胞活力测定的影响。通过实验得出用四氮唑脱氢酶还原法测定川贝母悬浮细胞活力的最佳条件为:四氮唑溶液最适浓度0.6%,脱氢酶还原反应在Tris-HCl缓冲液中的效果优于磷酸缓冲液和磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液,最适pH为7.0~7.5;脱氢酶最适还原反应的时间为18 h。
关键词：
氯化三苯基四氮唑 脱氢酶 细胞活力
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王跃华 朱丹青 代勇 何玉红 徐世军 邓启花 王晓蓉
通过正交试验筛选快速提高川贝母鳞茎生物量的氨基酸前体组合配方,为工业化大规模生产名贵药材川贝母奠定基础,以川贝母小鳞茎为悬浮培养外植体,利用正交试验研究在川贝母小鳞茎悬浮培养中添加不同氨酸前体观察其对生物量的影响。结果表明,川贝母小鳞茎在添加由0.60 mmol.L-1酪氨酸、0.60 mmol.L-1苯丙氨酸和0.60 mmol.L-1色氨酸组合的悬浮培养液中培养25 d,其鳞茎的生物量提高最大可达3.5倍。
关键词：
正交试验 川贝母 悬浮培养 氨基酸前体
[期刊] 草业科学
[作者]
吴海旭 马艳珠 成春亚 李冉 崔治家 晋玲 马毅 王振恒 王圆圆 刘立
本研究对不同年限的川贝母（Fritillaria cirrhosa）各器官进行称重，通过比较不同生长年限栽培川贝母的各器官性状及生物量占比，并进行正态性检验和方差分析，利用标准化主轴回归分析（SMA）探明川贝母的生物量积累及其异速生长规律。结果表明不同年限川贝母各器官生物量大小均为鳞茎>叶>地下茎>根；川贝母鳞茎及叶片生物量在第四年增长最多，根系及地下茎生物量在第五年增长最多；川贝母地上部分与地下部分生物量均随生长年限的增长而不断增大，且地上部分各器官生物量间均差异显著（P < 0.05）。整个生长过程中，川贝母各器官生物量占总生物量的比例随年限增长而有所变化，且各器官生物量与总生物量之间均呈正相关。除五年生川贝母花和果的生物量与总生物量为等速生长模式外，其余年限川贝母各器官生物量与总生物量皆为异速生长模式，为人工生产川贝母提供理论依据。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
苏鹏 胡莉 董品利
对8个川贝母品种采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)进行贝母碱分析、基于百合科植物特征序列trn H-psb A的分析、以及ISSR分子标记分析。结果表明,3种方法对川贝母的鉴定都是有效的。8个川贝母品种根据不同的贝母素含量均能独立区分开,trn H-psb A序列的分析和ISSR分子标记分析的聚类结果基本相符。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王跃华 闫胜杰 代勇 代娟 蕾芸 李洋
本试验筛选出诱导川贝母鳞茎的最佳外植体。选取生长不同时期的川贝母植株鳞茎外植体分别接入由不同激素浓度配比的培养基中,在不同培养条件下获得川贝母鳞茎快速增殖的最佳培养条件,并检测出再生鳞茎的总生物碱含量。结果表明:开花期鳞茎为鳞茎增殖的最佳外植体,其最佳培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.2 mg.L-1,川贝母出苗期、开花期和果实期植株鳞茎外植体再生鳞茎的总生物碱含量分别为0.180%,0.190%,0.182%,均高于野生川贝母鳞茎的总生物碱含量0.109%。
关键词：
川贝母 鳞茎 增殖 培养基
[期刊] 林业科学研究
[作者]
梁军 魏刚 吕全 贾秀贞 张星耀
研究了印楝细胞悬浮培养系的建立及印楝细胞悬浮培养的条件。结果表明,印楝细胞悬浮系的建立以B5培养基,NAA2 0～4 0mg·L-1,采用直接倾倒法作为接种方法为好;基于生物量、印楝素含量和印楝素产率综合分析认为,印楝细胞悬浮培养的最佳条件为B5培养基,NAA2～4mg·L-1,蔗糖30g·L-1,培养温度25℃,及根据培养容器的大小选择合适的转速和装液量。
关键词：
印楝 细胞悬浮培养 印楝素 植物源农药
[期刊] 林业科学研究
[作者]
徐志荣 王婷 娄佳兰 魏赛金
[目的]南方红豆杉细胞悬浮培养体系优化及动力学模型构建。[方法]以南方红豆杉1年生枝条诱导产生的愈伤组织为材料,在优化愈伤组织接种量、培养基初始pH、植物激素类型及配比的基础上,分析南方红豆杉悬浮细胞生长和紫杉醇积累的动力学关系及主要营养成分的变化。[结果]适合南方红豆杉悬浮培养的培养基为:B5+0.4 mg·L~(-1) 2,4-D+0.3 mg·L~(-1) NAA+1.2 mg·L~(-1) 6-KT+30 g·L~(-1)蔗糖,培养基最佳初始pH为5.8,最佳接种量为0.09 g·mL~(-1)。在1个培养周期内,培养液中的糖、磷元素,铵态氮、硝态氮在细胞培养的第18天基本被消耗完全或保持不变;动力学拟合表明,南方红豆杉细胞悬浮培养生长符合Logistic生长模型,最大比生长速率为0.143 65 d~(-1),底物消耗和紫杉醇合成可用Luedeking-Piret模型描述,悬浮细胞生长与紫杉醇积累属于部分生长偶联型。[结论]南方红豆杉细胞悬浮培养体系优化后,通过模型的回归拟合,获得了反映南方红豆杉细胞培养的动力学参数,试验所构建的发酵动力学模型在一定程度上揭示了南方红豆杉细胞产紫杉醇代谢过程的特征。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
阙国宁 诸葛强
以牡竹属黄竹（ＤｅｎｄｒｏｃａｌａｍｕｓｍｅｍｂｒａｎｃｅｕｓＭｕｎｒｏ）的竹节及无菌苗根颈为外植体，培养于含有５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．２ｍｇ／ＬＫＴ和２００ｍｇ／ＬＬＨ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，然后移至相同成份或不同浓度２，４－Ｄ的液体培养基中，进行悬浮培养，以建立分散性良好的悬浮细胞系。利用悬浮细胞和无菌苗叶片经酶解获大量原生质体，其产量分别约为每克鲜重２．５×１０５个和５×１０５个，活力均可达８０％。
关键词：
黄竹,细胞悬浮培养,原生质体分离
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
胡博然 徐文彪 马峰旺
以宁夏农科院选育的新品种宁杞 1号 3年生树为试材 ,对影响枸杞胚细胞悬浮培养及其再生系统建立的培养基与激素配比进行了研究。结果表明 ,以人工授粉后 18d的幼果 ,剖取成熟胚作为外植体 ,选择 MS+6 BA1.0 mg/ L+IBA0 .5 m g/ L 培养基诱导愈伤组织 ,经单细胞悬浮培养建立了稳定的细胞系 ;MS+6 BA0 .2mg/ L 培养基较为适宜枸杞胚状体萌发成苗 ,该再生苗转移到 MS+NAA0 .2 mg/ L 生根培养基上 ,诱导生根并获得完整植株 ;共移栽成活 14株 ,成活率达 38.8%。
关键词：
宁夏枸杞 胚培养 细胞悬浮培养 植株再生
[期刊] 华北农学报
[作者]
张楠 王保军 张秀清 张京声 孙君社
研究了元宝草悬浮细胞生长及其金丝桃素类物质(金丝桃素和假金丝桃素)的代谢规律。悬浮培养细胞的生长周期为18 d,其中4~10 d是对数期。金丝桃素类物质在10 d达到46.06μg/g(DW),其含量增加与细胞鲜质量增长相偶联。可溶性糖的消耗与细胞的生长以及金丝桃素类物质的代谢有着密切的关系,是影响细胞鲜质量和金丝桃素类物质增长的重要因素。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
余舜武 朱永生 余毓君 章荣德 张端品
为了缩短建立胚性细胞悬浮系的进程 ,快速获得松脆胚性愈伤组织 ,以普通小麦、大麦和多花黑麦草为材料 ,采用能促进植株再生的高浓度铜离子作为毒害筛选因子 ,以MSD培养基为基本配方 ,2 .5mg L的 2 ,4 D浓度 ,不同梯度浓度的铜离子处理愈伤组织。结果表明 ,0 .1mmol L的Cu2 + 对愈伤组织具有较好的筛选作用 ,能使松脆胚性愈伤组织保存下来 ,而其它类型愈伤组织褐化死亡。产生的松脆性愈伤组织能很快适应悬浮培养 ,从而快速建立胚性细胞悬浮系。用密实细胞体积及其斜面高度评价细胞悬浮系的特点 ,发现悬浮细胞不仅具有很强的生长势 ,提高了愈伤对营养缺乏的忍受度 ,而且保持了高分化潜...
关键词：
细胞悬浮培养 胚性愈伤组织 铜离子
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
陈红贤 于笑笑 王晨阳 张敏 刘忠华
对国槐Ｓｏｐｈｏｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ槐角种胚细胞悬浮培养的动力学进行研究，在优化细胞接种量的基础上，分析测定培养周期内不同培养阶段的槐角细胞生长和培养基中碳源、氮源、磷源的消耗，以及细胞的鲜质量、干质量和黄酮产量的变化，从而了解细胞生长、营养消耗与次生代谢产物积累的基本规律，为建立结构化动力学模型奠定基础。结果表明：（１）初始接种量为４０．０００ ｇ·Ｌ－１时，最利于细胞的培养；（２）细胞的培养周期约为２７ ｄ，经过２７ ｄ的培养，生物量和黄酮的产量达到最高，分别为９．７３３ ｇ·Ｌ－１和５３．５６６ ｍｇ·Ｌ－１，对细胞比生长速率和黄酮比合成速率进行分析，得出黄酮的积累和细胞的生长为部分生．．．
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘菲 彭克勤 彭志红 夏石头 萧浪涛
以喜树的幼嫩叶片为材料,探讨了MS、SH、B5基本培养基和不同激素(2,4-D、NAA、6-BA)配比对愈伤组织诱导及继代培养的影响,并筛选喜树细胞悬浮培养体系的最优培养基配方.结果表明,喜树幼嫩叶片外植体诱导愈伤培养以SH+2.0mg/LNAA+0.5mg/L6-BA为最优,愈伤组织诱导率为92%.继代培养以MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA为最适,在此条件下诱导的愈伤组织质地疏松,适于进行悬浮培养.
关键词：
喜树 愈伤组织 组织培养 悬浮培养
[期刊] 林业科学
[作者]
尹忠平 上官新晨 陈继光 吴少福 黎冬明
通过大孔树脂吸附、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶层析、半制备高效液相色谱及重结晶对青钱柳悬浮培养细胞三萜酸进行分离纯化,获得5个单体三萜酸,经高分离度快速液相-飞行时间质谱(RRLCTOF/MS)、核磁共振氢谱(1H NMR)和核磁共振碳谱(13C NMR)等分析,分别被鉴定为2α-羟基齐墩果酸、2α-羟基熊果酸、白桦脂酸、齐墩果酸、熊果酸,其中2α-羟基齐墩果酸和白桦脂酸是首次在青钱柳中得到分离鉴定。
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