- 年份
- 2024(7104)
- 2023(10280)
- 2022(9147)
- 2021(8637)
- 2020(7235)
- 2019(16744)
- 2018(16783)
- 2017(31879)
- 2016(17727)
- 2015(20061)
- 2014(19844)
- 2013(19596)
- 2012(17969)
- 2011(15974)
- 2010(15712)
- 2009(13899)
- 2008(13424)
- 2007(11402)
- 2006(9778)
- 2005(8198)
- 学科
- 济(63198)
- 经济(63124)
- 管理(47249)
- 业(45136)
- 企(37648)
- 企业(37648)
- 方法(31105)
- 数学(26733)
- 数学方法(26414)
- 学(19125)
- 农(17217)
- 财(15720)
- 中国(15613)
- 业经(14182)
- 地方(13324)
- 农业(11666)
- 和(11564)
- 理论(11227)
- 贸(10950)
- 贸易(10941)
- 环境(10824)
- 易(10588)
- 技术(10552)
- 务(10435)
- 财务(10378)
- 财务管理(10362)
- 制(10158)
- 企业财务(9846)
- 划(9277)
- 教育(9253)
- 机构
- 大学(246318)
- 学院(244318)
- 管理(96707)
- 济(86909)
- 经济(84844)
- 理学(84827)
- 理学院(83783)
- 研究(83551)
- 管理学(82193)
- 管理学院(81790)
- 中国(59216)
- 科学(58684)
- 京(52969)
- 农(47363)
- 所(43621)
- 业大(43094)
- 研究所(40609)
- 财(38627)
- 农业(37732)
- 中心(37624)
- 江(34568)
- 北京(33028)
- 范(32844)
- 师范(32423)
- 财经(31743)
- 院(30552)
- 经(28925)
- 州(28331)
- 技术(28268)
- 师范大学(26383)
- 基金
- 项目(179931)
- 科学(140071)
- 基金(130143)
- 研究(125588)
- 家(116116)
- 国家(115186)
- 科学基金(97599)
- 社会(75041)
- 省(71411)
- 社会科(70896)
- 社会科学(70876)
- 基金项目(70738)
- 自然(67971)
- 自然科(66329)
- 自然科学(66311)
- 自然科学基金(65093)
- 划(61064)
- 教育(56895)
- 资助(52620)
- 编号(50856)
- 重点(40754)
- 成果(40446)
- 发(38054)
- 部(38043)
- 创(37496)
- 计划(35789)
- 科研(35544)
- 课题(34991)
- 创新(34963)
- 大学(32718)
共检索到338792条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
邵根宝 高爱民 徐银学 丁红梅 贾超 刘红林
利用实时定量RT-PCR技术,对体外培养的小鼠植入前胚胎发育过程中鼠内源逆转录病毒样基因(MuERV-L)的表达进行研究,并通过appd icolin(DNA复制抑制剂)、TSA(组蛋白去乙酰化酶特异性抑制剂)分别抑制1-细胞期DNA的复制和合子基因组激活(ZGA)过程中组蛋白去乙酰化,探索MuERV-L基因表达的变化。结果表明:MuERV-L基因的转录在受精后9~11 h快速启动,并在2-细胞阶段出现瞬时高表达。抑制试验显示:1-细胞期DNA的复制受抑制后,MuERV-L基因的转录也被显著抑制(P<0.05);在TSA处理的4-细胞胚胎中,MuERV-L基因显著高表达(P<0.01),且其水...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
蒋宗良 张明 付强
采用RT-PCR和原位杂交的方法检测了小鼠GSE(gonad-specific expression gene)基因在性腺中的表达特征。RT-PCR分析表明,GSEmRNA在出生后第14天的小鼠的睾丸中和刚出生小鼠的卵巢中可检测到,这时间正是生殖细胞减数分裂发生的时期;原位杂交分析的结果揭示,GSEmRNA分布于精母细胞Ⅰ(粗线期)、圆形精细胞和伸长的精细胞中,这一结果与RT-PCR分析的结果相吻合。研究结果提示,GSE与配子发生过程中的减数分裂有关。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
马增友 秦歌 郑浩懿 卢郑坤 张文昌 彭辉
[目的]研究TRIM8基因在小鼠组织和早期胚胎中的表达情况及其沉默后对早期胚胎体外发育的影响。[方法]采用RT-PCR、免疫印迹分别检测TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠不同组织(心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、肌肉、子宫、卵巢和睾丸)中的表达情况,采用免疫组化技术对TRIM8在卵巢中进行定位。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、免疫印迹法检测TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠早期胚胎(1-细胞胚胎、2-细胞胚胎、4-细胞胚胎、8-细胞胚胎、桑葚胚和囊胚)中的表达规律,用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术对TRIM8在早期胚胎中进行定位。利用RNA干扰技术沉默TRIM8基因,研究该基因沉默对小鼠早期胚胎体外发育的影响。[结果]TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠不同组织中均表达,但在子宫、卵巢和睾丸中表达水平相对较高。在卵巢中,TRIM8蛋白主要定位在不同发育阶段的卵母细胞中。TRIM8基因及其编码的蛋白在早期胚胎中均有表达,但其mRNA表达水平在1-细胞到4-细胞期胚胎中的表达水平显著高于8-细胞到囊胚期胚胎。TRIM8蛋白主要定位在不同时期胚胎的胞质中。TRIM8基因沉默组的囊胚率显著低于对照组(P<0.05)。[结论]TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠各组织及早期胚胎中均有表达,主要定位在早期胚胎的胞质中;沉默TRIM8基因会显著降低囊胚发育率。TRIM8可能参与调控小鼠早期胚胎的发育进程。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
许诺 贾俊龙 王维 朱玉博 王雪晗 白文林 罗光彬
为探讨３种感染方法对不同发育阶段胚胎中ＥＧＦＰ基因表达影响，利用透明带下注射法、胞质内注射法及透明带切口与慢病毒共培养法感染１－细胞期小鼠胚胎，分别提取以上３种方法感染慢病毒的不同发育阶段胚胎的ＥＧＰＦ基因，并以其为模板，扩增出６３０ｂＰ的ＥＧＰＦ基因片段。结果表明：慢病毒转染后在不同发育阶段的胚胎中，均扩增出ＥＧＦＰ目的片段（６３０ｂＰ）。当透明带下注射病毒时，９０Ｐ Ｌ注射组（Ｃ组）和６０Ｐ Ｌ注射组（ｂ组）的ＥＧＦＰ基因阳性率显著优于３０Ｐ Ｌ注射组（Ａ组）（Ｐ＜０．０５）。当胞质注射病毒时，Ｃ组显著优于其他组（Ｐ０．０５）。透明带．．．
关键词：
慢病毒 胚胎 EGFP 体外表达
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张前军 卢光琇
【目的】研究Borealin在小鼠早期胚胎及睾丸中的表达情况,初步探讨Borealin的生物学功能。【方法】利用体外合成RNA探针,采用全胚胎原位杂交检测Borealin基因在9.5～10.5日龄小鼠胚胎中的表达,免疫组化检测Borealin基因在成年小鼠睾丸中的表达,RT-PCR等方法检测Borealin基因在成年小鼠多组织中的表达。【结果】Borealin在小鼠9.5～10.5日龄胚胎的头部和成年小鼠生精小管基底部细胞的部位有较强的表达,在睾丸、卵巢、肠以及眼睛组织中的表达量较其他组织高。【结论】Borealin在小鼠9.5～10.5日龄胚胎头部及成年小鼠睾丸中均有特异性表达,可能参与了成...
[期刊] 华北农学报
[作者]
李运生 杨宏星 刘晓蕊 习海涛 方富贵 刘亚
为探明Ghrelin及其受体Ghsr-1a在早期胚胎发育中的作用,以小鼠体内受精、体外受精和孤雌激活胚胎为研究对象,在其体外发育过程中添加不同浓度Ghrelin,观察胚胎发育效率;通过免疫荧光染色和荧光定量PCR,观察不同时期胚胎中Ghsr-1a的变化。结果表明,体内受精胚体外发育中添加0.1 ng/m L Ghrelin显著降低了囊胚率(P<0.05)。在体内受精胎中,Ghsr-1a的mRNA表达水平在4细胞显著高于其他时期(P<0.05);体外受精胚中,Ghsr-1a的mRNA水平在8细胞前无明显差异,桑...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
付强 薛雯 蒋宗良 秦文松 张明 卢克焕
从小鼠的睾丸中克隆了GSE(gonad-specific expression gene)基因,并对该基因进行序列分析和Southern、Northern杂交分析。核苷酸序列分析表明,GSE基因的ORF长度为745 bp,编码247个氨基酸,预测蛋白质分子量为27.6 kDa;Southern杂交证明GSE可能是单拷贝的基因;Northern杂交显示,GSE基因在小鼠体细胞组织(心脏、肝脏、肾脏、大脑、骨骼肌和脾脏)中没有检测到其表达,在睾丸中表达量很高,在卵巢中表达量较低。从推断出的氨基酸序列表明,GSE蛋白在细胞中可能是一个不带有信号肽的可溶性蛋白。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李军 吕长荣 窦琳 窦忠英
【目的】构建小鼠Nanog基因原核表达载体并进行表达,以期得到大量GST融合蛋白。【方法】根据Gene Bank中的Nanog序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有Nanog基因片段的pNA992重组质粒为模板,经PCR扩增出918 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化TGⅠ大肠杆菌,筛选阳性克隆,其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-Nanog已构建成功。提取pGEX-KG-Nanog质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体进行SDS-PAGE电泳鉴定,并优化其表达条件。【结果】在大肠杆菌中获得Nanog基因...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
乔海莲 吕长荣 赵瑾 张燕 曹力 王根辈 范光丽
采用免疫组织化学超敏SP法,对大鼠胚泡植入期卵巢组织内白血病抑制因子(Leukemia inhibito-ry factor,LIF)的表达进行了检测。结果表明,LIF在不同发育阶段卵泡的颗粒细胞中均有表达,在原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡的卵母细胞中高表达,成熟卵泡的卵母细胞中等表达;在初级卵泡和次级卵泡的内膜细胞中LIF高表达,在成熟卵泡的内膜细胞低表达;在卵巢组织基质细胞、血管内皮细胞、粒性黄体细胞、生殖上皮中高表达,在卵泡液中中等表达。说明LIF在大鼠胚泡植入期卵巢中的多种细胞内均呈高水平表达。
关键词：
白血病抑制因子 免疫组织化学 大鼠卵巢
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
安磊 孙婵 解芸菲 王勇 吕彬 孙超
【目的】探讨SOCS3对3T3-L1细胞凋亡的影响。【方法】以小鼠脂肪组织提取的RNA为模板,用RT-PCR扩增SOCS3基因,将其克隆至pMD18-T Simple,构建pMD18-T-SOCS3重组质粒,经测序验证后,以pMD18-T-SOCS3为模板扩增SOCS3基因,将其克隆至pEGFP-N1,构建真核重组质粒pEGFP-N1-SOCS3,测序正确后,将重组质粒pEGFP-N1-SOCS3转染3T3-L1细胞,荧光下观察GFP的表达,RT-PCR和Western blotting检测细胞内SOCS3mRNA和蛋白的表达,观察细胞凋亡的变化。【结果】测序表明,pMD18-T-SOCS3和...
关键词：
细胞凋亡 SOCS3 pEGFP-N1
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
程金波 王加启 卜登攀 刘光磊 张春刚 董晓丽 魏宏阳 周凌云 刘开朗
研究小鼠不同生理阶段以及免疫条件下,乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量的变化。选择120只健康昆明小白鼠,于分娩后4 d进行如下制剂处理:脂肪酶蛋白(Lipase)、空免疫刺激复合物(ISCOM)和Lipase。于分娩后8和12 d(即注射后4和8 d)用间接ELISA法测定乳中和血清中的特异性IgG含量,用Real Time PCR检测小鼠乳腺中乳铁蛋白基因的相对表达量。另外,正常生理状态乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量的变化分别是在分娩后1、4、8和12 d进行检测。结果表明,正常状态下,小鼠分娩后1 d时,乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量相对较高,而在分娩后4、8和12 d时较低;免疫条件...
关键词：
小鼠 免疫刺激 乳腺 乳铁蛋白 基因表达
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
杨青 薛立群 刘斌 刘扬 袁安文
为了探讨维生素E对一氧化氮(NO)的产生及其对早期胚胎发育的影响,用Griess试剂法检测了附植前小鼠胚胎中一氧化氮的生成情况.结果表明,附植前胚胎中有NO的产生,且从第1天到第3天有逐渐上升的趋势,第4天有所下降.用抗氧化剂维生素E处理后,NO的生成量下降,表明在附植前小鼠胚胎发育中维生素E对NO的产生可能起到一定的抑制作用.
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
肖成 胡进 纪红军 牛亚茹 焦建桥 戴玉健 徐银学
［目的］本文旨在研究转录因子同源框Ａ１０基因（ＨＯＸＡ１０）结合动力蛋白基因（ＤＮＭ１Ｌ）启动子区域绑定位点，并调控ＤＮＭ１Ｌ基因的表达机制。［方法］通过转录因子网站（ＴＦＳＩＴＥＳＣＡＮ）预测ＤＮＭ１Ｌ启动子区域存在ＨＯＸＡ１０的结合位点。分离怀孕１～７ Ｄ的小鼠子宫内膜，采用ＲＴ－ｑ ＰＣＲ检测其ＨＯＸＡ１０和ＤＮＭ１Ｌ ＭＲＮＡ表达量的变化规律。结合ＨＯＸＡ１０过表达和ＳＩＲＮＡ干扰试验，分析小鼠子宫内膜基质细胞中ＨＯＸＡ１０ ＭＲＮＡ表达量的变化如何影响ＤＮＭ１Ｌ表达。构建ＤＮＭ１Ｌ野生型和绑定位点突变型启动子区域（－１ ７４９～－２ ０３３ ｂＰ）荧光素酶报告载体，分别与ＨＯＸＡ１０．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙琪 丛霞 索佳佳 曹荣峰 姜忠玲 崔凯 高善颂 田文儒
为证实热休克小鼠胎儿成纤维细胞中钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)对热休克蛋白70(Heat shock protein70,HSP70)基因表达的影响及其作用机理,将体外培养的小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblasts,MEF)随机分为39℃和41℃热处理组(分别处理0.5,1,1.5,2 h)和常温对照组(37℃),测定各组细胞CaMKⅡ和HSF1 mRNA的量。此外,将培养的细胞分为37℃和39℃CaMKⅡ特异性抑制剂(myr-AIP)处理组和相应的空白对照组,分别测...
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙星虹 孙晓凤 孙雷雷 李兰
为研究小鼠Dazl基因的功能及探究Dazl基因过表达在干细胞向生殖细胞分化过程中的作用,采用RTPCR方法,从13.5 dpc雌性胎鼠卵巢中克隆出Dazl基因的全部编码区,测序正确后利用限制性内切酶将其连接到真核表达载体pc DNA3.1上。线性化后对小鼠成纤维细胞进行转染,qRT-PCR及Western Blot技术显示外源基因Dazl已经成功转染并表达。为研究Dazl基因的功能及干细胞向生殖细胞的诱导分化奠定了基础。
关键词：
Dazl基因 真核表达载体 转染
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
