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[期刊] 华北农学报
[作者]
张卫华 杨军 韩成贵 李大伟 于嘉林
许多真菌介体传播的病毒在机械接种过程中易于发生自然缺失。利用在小麦上连续机械接种WYMV的方法,自第27代起,利用RT-PCR和Northern blot方法在感病小麦中检测到一个WYMV RNA2的缺失突变株,序列分析发现缺失区域位于RNA2的214~2 808 nt,共计2 595 nt,并在缺失区域的两端存在7个碱基的反向互补序列。缺失区域上游紧邻这7个碱基双链区存在一富含AU的短序列,并据此对此D-RNA2的缺失机制进行了讨论。
关键词：
WYMV 机械接种 RNA2缺失突变株
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙现超 邱并生
【目的】获得大麦条纹花叶病毒中国株(BSMV-CH)基因组RNA1的全长cDNA,进行序列分析,明确与国外报道株系间的亲缘关系和分类地位【。方法】以自然侵染BSMV-CH的大麦叶片中提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法获得BSMV-CH RNA1的全长cDNA,克隆到载体pMD18并测序,用DNAstar软件将获得的序列与GenBank登录的BSMVRNA1序列进行对比,分析各株系序列RNA1之间的同源性,构建系统发育树分析BSMV-CH与国外株系间的亲缘关系。【结果】BSMV-CH的RNA1全长为3795bp(GenBank注册号:AY789693),基因组RNA15′端有一个甲基化的帽...
[期刊] 华北农学报
[作者]
尚巧霞 韩成贵 于嘉林 杨莉莉 刘仪
通过大量的接种实验,分析了影响病毒接种效率的各种因素,经ELISA和RT PCR方法进行检测,确立了较为稳定有效的小麦黄花叶病毒机械传毒体系。采用新鲜病叶或用氯化钙干燥保存的病叶作为接种毒源,在0 2mol·L-1磷酸缓冲液中研磨后,对低温下(11～13℃)培养的小麦幼苗(1～2叶龄)进行叶面接种,并将接种后的小麦低温培养可获得较高的接种效率(12 57%～13 43%)。对毒源类型、小麦苗龄和接种部位等其他可能影响接种效率的因素进行了测定。
关键词：
小麦黄花叶病毒 机械接种 病毒检测
[期刊] 华北农学报
[作者]
王子宁 郭北海 张艳敏 温之雨
利用SDS -PAGE技术 ,从河北省小麦地方品种及国内外小麦育成种 12 70份中 ,发现Wx B1突变体 6 3份 ,Wx D1突变体 4份 ,Wx E 2份。红蘖麦和白芒白等品种的发现 ,丰富了品质育种的亲本 ;长穗偃麦草的蜡质基因与小麦蜡质基因不同 ,可以进行更深入的分子水平研究。研究表明 ,地方品种和育成种具有相似的突变规律 ;国外优良品质材料含有较高的Wx B1突变频率 ;国内以源自北京、山西、陕西、云南的材料突变频率最高 ;河北、河南、山东、江苏等省份突变频率居中 ;而四川、天津、黑龙江和安徽等省份的样本量太小 ,突变频率也最低。该频率分布规律为今后育成种筛选的重点提供了帮助。
[期刊] 华北农学报
[作者]
董家红 于嘉林 韩成贵 方守国 刘仪
通过RT PCR,获得了小麦黄花叶病毒罗田分离物28kD蛋白基因的cDNA克隆pUW28 10。序列分析结果表明,小麦黄花叶病毒不同分离物的28kD蛋白基因的核苷酸序列存在一定的差异:湖北罗田和河南潢川分离物在第326,327和336位较四川雅安、江苏扬州及日本分离物缺少3个核苷酸(nt),前两者核苷酸长度为762nt,后三者为765nt;不同分离物核苷酸序列同源性从92 1%到96 9%,相应的氨基酸序列同源性从89 8%到97 3%。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张宗英 徐建美 韩成贵 张振臣 李大伟 于嘉林
采集河南省驻马店市13个不同田块小麦样品,利用RT-PCR、ELISA和Western Blotting检测技术进行检测,结果表明,该地有小麦黄花叶病毒的存在与分布。对检测为阳性的一个分离物全序列进行cDNA克隆和测序,与已报道WYMV河南潢川、江苏扬州、四川雅安和日本分离物的全序列进行比对,RNA1核苷酸一致性为97.1%~98.4%;RNA2为95.1%~98.4%;氨基酸一致性分别为94.8%~97.8%和94.2%~98.2%。利用软件MEGA4.1对上述五个RNA1和RNA2的全序列分别进行进化树分析,结果表明,驻马店分离物与潢川亲缘关系最近,而与四川雅安亲缘关系最远。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李素明 张昌毅 彭楠 梁运祥 佘群新
为在体内研究古菌核苷酸切除修复(nucleotide excision repair,NER)机制,利用基因敲除的方法,对泉古菌核苷酸切除修复机制进行研究,构建了冰岛硫化叶菌编码真核生物NER解旋酶XPB同源蛋白的基因xpb1和xpb2单缺失突变体,从而在体内分析xpb1和xpb2基因的功能。结果表明:基因xpb1或xpb2不是冰岛硫化叶菌存活的必需基因。表型分析发现,xpb1和xpb2基因单缺失突变体相较野生型菌株REY15A,对DNA损伤试剂4-NQO 4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline 1-oxide,4-NQO)分别表现出轻微敏感性和不敏感性,暗示NER解旋酶功...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张建军 李祥 侯明生
研究了小麦抗病品种SK-4、SN7859和感病品种8201-69、81-5对梭条斑花叶病毒病的抗病性与其抗病毒(WSSMV)和抗传毒介体禾谷多粘菌(Polymyxa graminis Led.)的能力之间的关系。结果表明:小麦品种的抗病性与它们抗病毒的能力一致;与它们抗传毒介体的能力有一定的相关性,但不尽一致。具体表现为抗病品种SK-4抗病毒和抗介体能力均强,SN7859抗病毒能力强,但抗介体能力较弱;感病品种81-5抗病毒能力弱,但抗介体能力较强,而8201-69则抗病毒和抗介体的能力均弱。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李彬 范永坚 许志刚 周益军 吴淑华 程兆榜
采自江苏省南京市郊区的小麦病毒病样品提纯后 ,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,结果表明 ,病毒外壳蛋白 (CP)为单一组分 ,相对分子质量为 36 5× 10 3 。经 1 2g·dL-1琼脂糖凝胶电泳检测 ,病毒核酸有两个组分 ,即RNA1和RNA2。根据AnbeSohn发表的小麦梭条花叶病毒RNA 13′端部分核苷梭序列 ,设计一对引物 ,以提纯样品的RNA1为模板 ,经RT PCR扩增出包含CP基因在内的 1 7kb的特异性目的片段 ,据此鉴定所采集的毒原为小麦梭条花叶病毒 (WSSMV)。
关键词：
小麦梭条花叶病毒 RT-PCR 分子鉴定
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
郑艳茹 翟玉山 邓宇晴 成伟 程光远 杨永庆 徐景升
针对已公布的１８个甘蔗花叶病毒（ＳＣＭＶ）全基因组序列，利用ＭＥＧＡ ５．１分析了其１１个蛋白（Ｐ１、ＨＣ－Ｐｒｏ、Ｐ３、６Ｋ１、ＣＩ、６Ｋ２、ＶＰＧ、ＮＩＡ－Ｐｒｏ、ＮＩｂ、ＣＰ－Ｃ和多聚蛋白）编码基因所受的选择压，并结合其编码蛋白的功能，预测了部分基因在ＳＣＭＶ进化过程中的角色和变异位点．结果显示：Ｐ１和ＣＰ－Ｎ端的变异性程度较大，Ｐ１蛋白多样性最高；ＣＰ－Ｃ端变异性和多样性均较低；ＰＩＰｏ受到的选择压最小，但多样性最低，可能是由于ＰＩＰｏ与Ｐ３共用一段编码序列．来源于甘蔗的ＳＣＭＶ多聚蛋白的第２ ８５３、２ ８９７和２ ９０４个氨基酸位点（在ＣＰ中部）分别为Ｔ、ｒ和Ｅ，而来源于玉米的ＳＣ．．．
关键词：
甘蔗花叶病毒 种群结构 选择压力
[期刊] 华北农学报
[作者]
张维宏 安哲 范学锋 冯月琪 杨文香 刘大群
为了利用小麦感叶锈病突变体进行抗病基因功能和机制研究，用ＥＭＳ处理小麦抗叶锈病近等基因系Ｔｃ Ｌｒ１９的种子，对获得的Ｍ２、Ｍ３植株进行农艺性状观察和田间抗叶锈性鉴定。结果显示，不同浓度的ＥＭＳ溶液处理种子共获得３６７个Ｍ１单株，处理浓度为１．０％时，接近半致死剂量，且Ｍ２表型突变频率最高，适宜突变筛选。在２ ３５９个Ｍ２突变群体中，共筛选到表型突变体３８个，表型突变频率１．６１％；筛选出感叶锈病突变体５３个，感病突变频率２．２５％。在４５９个Ｍ３感病突变群体中，共鉴定出１４６个感病突变体，其中Ｍ３６－２、Ｍ３３３－８、Ｍ３３３－９、Ｍ３３３－１１、Ｍ３４４－４、Ｍ３９６－８这６个Ｍ３感病突变．．．
关键词：
小麦 叶锈病 甲基磺酸乙酯 突变体
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孔飞 蔡跃 汪鹏 尤小满 张杰 江玲 张文伟 万建民
［目的］本试验旨在对水稻温度敏感型黄叶突变体ｙｌ２（ｔ）进行表型分析和基因定位，为图位克隆该基因奠定基础。［方法］在连续２０℃温度处理下测定突变体ｙｌ２（ｔ）叶绿素含量和观察其叶绿体结构；构建ｙｌ２（ｔ）与籼稻品种‘南京１１’的杂交Ｆ２群体，借助ＳＳＲ和Ｉｎ Ｄｅｌ分子标记，选取隐性极端个体进行基因定位；利用ｑＲｔ－ＰＣＲ测定叶绿素合成相关基因表达水平。［结果］２０℃持续处理１５ Ｄ，ｙｌ２（ｔ）幼苗表现黄叶；若处理时间延长至２０ Ｄ，ｙｌ２（ｔ）幼苗则不能继续生长最后死亡，处理１５ Ｄ后转移至３０℃或在３０℃连续生长时叶色正常。田间生长条件下，ｙｌ２（ｔ）的农艺性状与野生型相比，没有显著差异．．．
关键词：
水稻 温敏感型黄叶突变体 表型 基因定位
[期刊] 华北农学报
[作者]
王宏英 黄占景 仇艳光 沈银柱
利用RAPD技术分析了小麦耐盐突变体RH8706 49、其母本濮农3665以及与49同为"一粒传"后代的敏盐材料H8706 34的线粒体DNA,发现三个材料的线粒体DNA存在有明显的差异,初步认为这些差异可能与突变体49耐盐性的增强相关,回收克隆了突变体49线粒体DNA的特异扩增产物,为进一步的研究打下了基础。
关键词：
小麦 耐盐突变体 线粒体DNA RAPD
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王祖秀 汤泽生
叶色黄化突变属于叶绿素突变。对大麦叶绿素缺乏突变体的研究及遗传控制分析,国外已有不少报道。但在国内,除李玉湘等对大麦叶绿体突变体中叶绿素蛋白质复合体进行过一些研究外,尚未见对大麦叶绿体突变体遗传控制的研究报道。笔者用30KR_（60）Coγ射线处理早熟三号大麦干种子,在M_2代分离群体中获得叶色浅黄突变体。突变体的早期世代有少量绿苗分离的现象,现已无分离,能稳定遗传。 叶绿体有自己的遗传物质（ct DNA）。但叶绿体中许多重要的蛋白质是由细胞核基因编码的。故叶绿体是受细胞核基因和质体基因（ct DNA）的双重遗传控制。核基因突变或质基因突变都可能产生叶绿素缺乏突变体。本文对突变体进行的...
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大麦 黄化突变体 遗传分析
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