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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 高梅  张国权  魏益民  张继澍  党娇  王秋娟  
为了进一步对小麦醇溶蛋白A-PAGE电泳的鉴定方法进行标准化,比较了凝胶浓度、缓冲体系及其pH值对电泳分辨率的影响,并初步筛选出了适合作为醇溶蛋白电泳标准样品的国内小麦品种。结果表明,丙烯酰胺和N,N-甲叉双丙烯酰胺2个单体的交联百分浓度(C)为4.0%,总百分浓度(T)为6%,缓冲体系为甲酸-甘氨酸(pH3.0)混合体系的A-PAGE电泳效果较好;通过国内40个小麦品种与加拿大硬红春麦Marquis的R24、R50、R79标准条带相比较,确定荔丰3号可以作为国内小麦醇溶蛋白电泳的标准样品。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 潘鹰  石顺唯  周爱平  邹毓  
运用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(A-PAGE)对两系杂交小麦不育系,恢复系及其杂交组合F1种子醇溶蛋白进行电泳分析,结果表明:(1)温光型不育材料C49S的电泳谱带与恢复系材料有明显差异,不育系之间谱带非常相似;(2)杂交F1谱带主要表现为互补型和偏母本型,互补型的杂种优势较强,偏母本型的优势较弱,电泳分析结果与育种研究和田间资料相符。因此,种子蛋白电泳技术不仅可以鉴定亲缘关系、判断杂种真伪,而且可以作为预测杂种优势强弱的一种重要手段,提高杂交小麦的选育效率。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 翟旭光  潘志芬  商闯  邓光兵  余懋群  
为了研究燕麦麦谷蛋白亚基组成及遗传多样性,本研究采用SDS-PAGE电泳方法对71份不同染色体组型的燕麦材料的麦谷蛋白,进行了电泳分析,并以中国春为参照,按条带迁移距离大小命名,分析条带多态性并以燕麦麦谷蛋白点泳图谱为依据对供试材料进行聚类分析。电泳结果显示燕麦麦谷蛋白主要集中在分子量较低的C区,高分子量麦谷蛋白没有检测到条带。71份燕麦材料共产生20种不同条带,条带g和条带i比较保守,出现的频率分别为64.8%和85.9%。各种条带组合形成62种不同的组合带型,多态性为87.3%。聚类结果显示燕麦麦谷蛋白的电泳谱型与材料的染色体组有很大关系,具有相同染色体组型的同种属的燕麦材料一般先聚为一类...
[期刊] 华北农学报  [作者] 高居荣  王洪刚  刘树兵  李兴峰  孔凡晶  陈冬花  
在ISTA小麦和大麦种子醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定品种的标准程序的基础上 ,对影响电泳效果的各主要因素进行逐一筛选、改进 ,尤其是实验设计的NaOH 醋酸 甘氨酸缓冲系统和先低后高再低的电泳方式使此项技术具有快速、分辨率较高、重复性较好、易剥胶、操作简单、经济实用等优点 ,适于一般实验室利用小麦种子醇溶蛋白技术对小麦进行大量的快速简捷的筛选、鉴定等初步研究。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 滕晓月  陈雪晖  
以梯度SDS-PAGE方法分析了T型小麦雄性不育系及其保持系种子醇溶蛋白和谷蛋白组分,发现两系间有明显差异,而且四个不同品种小麦不育系均有各自与保持系区别的谱带出现,表明T型雄性不育小麦醇溶蛋白基因的表达有品种特异性。用单、双向电泳结合银染技术进一步分析了胚乳醇溶蛋白,发现不育系11A和14A,分别有24kD和36kD的特异蛋白。
[期刊] 华北农学报  [作者] 何聪芬  刘植义  沈银柱  柏峰  罗颖坤  张召铎  白丽荣  
对两个化优杂种小麦(化优5号和化优8号)籽粒醇溶蛋白的分析结果表明,化杀杂种的纯度不低于80%;母本品质对杂种影响较大;多数情况下,染色体重组不影响父母本醇溶蛋白基因的表达,出现互补谱带.
[期刊] 中国农业科学  [作者] 刘千  龙海  魏育明  颜泽洪  郑有良  
【目的】克隆和分析"川农16"醇溶蛋白基因,为其进一步遗传改良提供更多依据。【方法】根据已报道的α-醇溶蛋白基因序列设计引物,对小麦品种"川农16"总DNA进行PCR扩增得到约900bp的DNA片段,分离纯化后连接到pMD18-T载体上,转化后筛选阳性克隆进行测序。【结果】获得4个不同的基因序列:Gli2-CN16-9、Gli2-CN16-12、Gli2-CN16-14和Gli2-CN16-6,GenBank登录号分别为DQ246446、DQ246447、DQ246448和DQ246449。其中,Gli2-CN16-9、Gli2-CN16-12和Gli2-CN16-14分别为861、870和9...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 蒲至恩  龙海  魏育明  颜泽洪  郑有良  
【目的】进一步了解斯卑尔脱小麦(Triticum spelta L.)α-醇溶蛋白基因序列信息。【方法】根据已知的普通小麦α-醇溶蛋白基因序列设计引物,采用PCR方法,克隆基因并进行序列分析。【结果】从NGB5149中克隆得到两个α-醇溶蛋白基因序列Gli-Spelt-1和Gli-Spelt-2(GenBank登录号分别为DQ234066和DQ234067)。它们具有α-醇溶蛋白基因的典型结构特征,但Gli-Spelt-1是一个假基因。Spelt-Gli-2编码区全长849bp,编码263个氨基酸。【结轮】氨基酸序列比较显示,Gli-Spelt-1和Gli-Spelt-2与已报道的α-醇溶蛋白...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王小利  张改生  陈新宏  赵继新  刘宏伟  王军卫  
 利用小麦种子贮藏蛋白凝胶电泳技术,对簇毛麦(Haynaldiavillosa)、滨麦(Leymusmollis)、华山新麦草(Psathyrostachyshuashanica)、大麦(Hordeumdistichom)以及黑麦(Secalecereale)的高分子量谷蛋白亚基和醇溶蛋白进行了分析。结果表明,簇毛麦、滨麦、华山新麦草、大麦的高分子量谷蛋白亚基和醇溶蛋白与普通小麦相比均有各自的特征带;利用簇毛麦和大麦的高分子量谷蛋白亚基特征带鉴定出了普通小麦中与小麦第一同源群染色体有部分同源的V1和H5附加系;利用黑麦1RS醇溶蛋白标记位点Gld1B3鉴定了1BL/1RS易位系,同时利用染色体...
[期刊] 华北农学报  [作者] 葛荣朝  赵宝存  李薇  王莎莎  沈银柱  黄占景  
应用玉米盐溶蛋白PAGE电泳方法检测了10个玉米品种的纯度及其杂交种的真实性。通过品种间的盐溶蛋白谱带的对比,发现其中有2条蛋白带是各品种所共有的,而除这些共有的蛋白带以外,各品种还具有一些特异条带。根据每个品种特有的蛋白条带,建立其特征条带图谱,可应用于该品种的相关鉴定工作。
[期刊] 华北农学报  [作者] 杨延兵  王海莲  秦岭  张华文  管延安  
醇溶蛋白是谷子籽粒主要的贮藏蛋白,研究谷子醇溶蛋白的差异对于谷子品种选育及种质鉴定评价有重要的意义。本研究利用SDS-PAGE方法对来自不同省份的46份谷子材料进行醇溶蛋白谱带分析,结果表明,单个品种可分离出14~24条醇溶蛋白谱带,平均每个品种18.74条带,46份品种共分离出32条醇溶蛋白谱带,其中7条为共有带,25条为多态性带,多态性带数占分离出总带数的78.1%。根据迁移率大小将醇溶蛋白谱带分为A、B、C、D四个区段,四个区段内分别有6、16、15、4种带型。在B、C区段醇溶蛋白有较丰富的多态性,A、B区段弱带较多,C、D区段强带较多。醇溶蛋白分子量在13.0~55.0 kDa之间,在...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 易克  田云  徐向利  卢向阳  萧浪涛  
为探讨水稻灌浆期间与籽粒充实相关蛋白表达的变化,建立了一套适于水稻种子胚乳蛋白双向电泳分析技术,探讨了胚乳蛋白的提取、纯化以及双向电泳的一些关键技术.结果表明,通过乙醇铵沉淀、高压等电聚焦和两步平衡等方法可以获得较好的分析结果,获得胚乳蛋白斑点数约 350 个,等电点范围在 3.0~9.0,其中大部分集中在 4.0~7.0.
[期刊] 西南农业学报  [作者] 舒晓霞  王耀东  
本文根据已报道的α-醇溶蛋白基因5'上游调控区和编码区的保守序列,设计特异性引物,以5份密穗小麦DNA为模板,用PCR克隆的方法获得了51条α-醇溶蛋白基因5'上游调控区序列。对长度大于380 bp的19条序列进行了分析,发现19条序列均含有与基因表达相关的重要调控元件,包括胚乳基序元件TGTAAAG、GCN4类似元件ATGAGTCAT、CAAT框、AAA G基序、TA-TA框、GCN4类似基序ATGAC(T)GATCAT以及CAC-box,同时在序列中出现了AACA元件。序列比对表明,密穗小麦与普通小麦和乌拉尔图小麦α-醇溶蛋白5'上游调控区存在较为丰富的变异,遗传差异较大。对各序列的5'上...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 陈华萍  龙海  刘千  魏育明  郑有良  
【目的】克隆四川小麦地方品种AS1643中的α/β-醇溶蛋白基因,并进行序列分析,探讨小麦AS1643的优良品质与其贮藏蛋白基因间的关系。【方法】采用PCR扩增的方法。【结果】从四川小麦地方品种AS1643中克隆到3个α/β-醇溶蛋白基因,即Gli-AS1643-1(GenBankNo.DQ166376)、Gli-AS1643-2(GenBankNo.DQ166377)和Gli-AS1643-3(GenBankNo.DQ166378)。其中,Gli-AS1643-1和Gli-AS1643-2的编码区长度分别为873和852bp,可编码270和263个氨基酸残基的成熟蛋白。Gli-AS1643-...
[期刊] 华北农学报  [作者] 马冬云  朱云集  郭天财  王晨阳  
用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)对河南省 2 1个小麦新品种 (系 )麦谷蛋白高分子量 (HMW )亚基构成、不同等位基因间亚基变异及出现频率进行了系统分析 ,并计算了品质得分。结果表明 ,河南省现有小麦新品种 (系 )的高分子量麦谷蛋白亚基构成中以 2 + 12亚基居多 ,5 + 10亚基的品种数量较少。对今后河南省小麦品质改良提出了建议。
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